Введение к работе
Актуальность проблеми. Шучеіше ишішсісшзи структуры II 'механизма действии ферменти» всегда представляло большой научный интерес Ферменты семейства 21п-а>лержицих кирбохсипептилаз исследуются с ысиеита идентификации в 1954 году бычьей панкреатической карбохсинептадази А - фермента, ашшсщекха классический объектом этимологии, одним из наиболее полно изученных к иасгсащему времени.
Иесмотра на зги, иексгерые важные особенности структурно-фуішціаїшіьішї соипіішиеігай а 2п-садержаииа гарбаїсітеїсіидазах остаются далеко ие schumh. В настоящее время существуют дсз гипотезы относительна меіашома катапіоа. Многочкслещаде данные рснтеиоструктурны* и кинетически иссведоь.ошй сиадепельствуют а пользу ойщєосііоеііого катализа. 1$ то ке крема, механизм катализа через образование аиилфермеїгга, предсташіїїоїцчйся существенно пенса убедительный, us может считаться окончательно опровергнуты.
До последнего времени выделяли два типа пераичнай специфичности карсотшептида:»: карбоксипелпидаш А-тина отщендзют преимущественна ароматические и объемные алифатические С-конт;еаые аминокислота, феруїенти It-типа - остатки с положительно заряженными босовиші цепами. Однако бактериальные Zn-карбоксипептвдазы, ^Загруженные недавно, проявляют необычную "двойную" первичную специфичность, отщеплен
Гидрофобные И ОШОВНЫе ОСГатКН СО СрЭЕЯИМОЙ Эффективностью. Роли
отдельны» остатков аминокислот в катализе и структурные ошоьы того или иного (А, В или А+В) типа первичной специфичности изучены до сих пор достаточно слабо.
Таким образом, структурио-функционалъиог' иссіедооание бактериальной Хл-содержащей карбокашептидазы Т Thmnoactmumyces vulgaris, обнаруженной и охараь~гернэавашгоЧ А.Остерманем с соагт, сочзтакниен оба типа пераичноя специфичности, stuiECTca несьма актуальної задачей.
Целью рабогц аапялось клиивроаание структурного гена карГкмсипегггадаэы Г ncnnoactiiuimyces vulgaris, определение его полной последовательности и струкгурио-фудаднональное нсследоиание этого фермента.
Научная ноаазоа в практическая цедаость. работы. В данной работе
д.гш определенна первичной структуры карбокшпешндазы микрооріанюма
злериие применен іенио-шіженернил иодшд, ічлючашіцнй получение
. тотальний клоцогеки іенима микроорганизма и клонирование гена
. 2
хпрбокапюитидазы. 1>юг ген лллгєтся исходным материалом в проводящаяся в настоящее время работая do напраалепнему муіатняу фермента я оптимизации его экспрессии, а также может быть кслодьаойзн в бд<отекнологичє«ой схеме для пронесении» геяно-иїшснершио «роичеупина.* Для сравнительного структурно-функциональною алалим . впероме щепшиаявпяы гес 16 швееттиых к настоящему времени поспедордтельиосіей Zn-содержашн карбоксшіеігтндат.
НублЕк&цаа и гпроЗагдая работы. Содержание диссертации штуКпикоагиа в .Vx статыл.
Объем в структура работы. Диссертация состоит т введения, обюрл
литерттуры, шхж;. .ценного механизму действия Хп-солержаїщч
кярбохсипеггтядаз, обсуждения ргзультатов, экспериментальной части, вывода?
и атсхя щпиропанной литерзгуры. ,
Диссертация содсржігк^о рисунков и таблиц.
Полный с&тем работы /22. страниц.
