Введение к работе
1. 1.1. Актуальность темы. Широкое применение молекулярной биологии, биохимии, микробиологии, генной и клеточной инженерии в биологической, медицинской, ветеринарной практике за последние два десятилетия, по мнению академика М.Н.Манакова (1996), привело к форменной революции в производстве лекарственных средств, вакцин, сывороток и разработке нового поколения диагностикумов.
Необходимость массового применения биопрепаратов в животноводстве вызвана широким распространением в природе различных инфекционных болезней, многие из которых представляют серьезную опасность для человека и животных. По данным международных организаций ООН (МЭБ, ФАО, ВОЗ), в мире ежегодно регистрируется свыше 500 тысяч очагов различных болезней. В связи с этим исключительно важным является поиск путей повышения качества биопрепаратов диагностического, профилактического и лечебного действия.
Одним из методов решения этой проблемы является применение в промышленной технологии культивирования микроорганизмов различных факторов и стимуляторов роста. В последние годы разработано и внедрено в производство большое количество основ для питательных средств и биостимуляторов из растительного, животного сырья, продуктов микробиологического синтеза, фитогормонов (Н.Н.Ситяшин с соавт., 1988; Л.Н.Воробьев, 1989).
В период с 1995 по 1997 годы сотрудниками кафедры эпизоотологии и микробиологии Ставропольской госсельхозакадемии был разработан стимулятор роста микроорганизмов ТС-1 (СРМ ТС-1), который по своей природе является культуральной жидкостью ассоциации микроорганизмов «чайного» гриба. СРМ ТС-1 недостаточно изучен с точки зрения воздействия на основные свойства микроорганизмов, в том числе и энтеробактерий, при добавлении в среды их культивирования.
Представители семейства Enterobacteriaceae были нами избраны в качестве объектов исследований в связи с широким распространением в природе и
огромной этиопатогенетичсской значимостью в инфекционной энтеропатс гии животных и человека.
1.2. Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является
учное обоснование целесообразности применения СРМ ТС-1 в промышлен
технологии культивирования энтеробактерий путем изучения его влияния
биологические свойства эшерихий и сальмонелл. Для её достижения были
ставлены следующие задачи:
изучить распространение и этиологическую структуру эшерихиозов и сі монеллезов сельскохозяйственных животных и птиц в Ставропольском щ
провести селекционную работу с наиболее важными в этиологическом ношении музейными и производственными штаммами энтеробактерий и ределить оптимальные концентрации СРМ ТС-1 для каждого типа изу> мых микроорганизмов;
изучить в лабораторных и производственных условиях влияние СРМ Т на морфологические, культурально-биохимические, антигенные свойс энтеробактерий, а также степень их диссоциации и чувствительность к н« торым химиотерапевтическим препаратам;
определить антигенную активность производственных штаммов ошерю выращенных на средах со СРМ ТС-1, в условиях промышленного изго: ления агглютинирующих О-коли сывороток;
определить иммуногенную активность эшсрихиозных и сальмонеллезі моновакцин, полученных с использованием экспериментальных сред СРМ ТС-1;
определить выживаемость (резистентность) энтеробактерий, полученных средах со СРМ ТС-1, в процессе сублимационного высушивания.
1.3. Научная новизна работы. Впервые было изучено влияние СРМ '
1 на основные свойства энтеробактерий родов Escherichia и Salmonella, pa;
ботана технология приготовления высокопродуктивных сред и эксперт
тально обоснована перспективность и целесообразность использования данн
стимулятора в промышленной технологии получения знтеробактсрна.чі ! препаратов диагностического, профилактического и лечебного действия.
Нами установлено, что высокий стимулирующий эффект СРМ ТС-1 сопряжен с изменениями основных биологических свойств изучаемых энтер бактерий. Кроме того, испытания показали, что стимулятор роста в срсл;\ культивирования способствует более длительному поддержанию стабильное і г «Sw-форм энтеробактсрий и повышению резистентности микробных клеток I стрессовым возденстпиям сублимационного высушивания.
1.4. Практическая значимость работы. Обобщены сведения по распро
странению и этиологической структуре эшерихиозов и сальмонеллезов живот
ных в Ставрополье ч крае. Разработана технология приготовления высокоэф
фективных сред для культивирования эшерихий и сальмонелл, которая обеспе
чивает повышение качества энтеробактериальных биопрепаратов. Применение
СРМ ТС-1 позволяс, добиться экономической эффективности в размере 268,7
тыс. руб. при затратах на получение стимулятора 1,8 тыс. руб.
Основные положения совершенствования процессов промышленного культивирования микроорганизмов с использованием СРМ ТС-1 используются в учебном процессе при проведении курсов «Микробиология и иммунология» и «Биотехнология» на кафедре эпизоотологии и микробиологии СтГСХА.
1.5. Основные положения, выносимые на защиту
Крайне широкое распространение энтеробактсриозов побудило к проведению исследований но совершенствованию качества производственных энтеробактериальных биопрепаратов.
СРМ ТС-1 обеспечивает высокую степень накопления активной биомассы отдельных серотипов энтеробактерий в процессе культивирования.
Данный биопродукт не влияет на основные биологические свойства энтеробактерий наиболее распространенных родов Escherichia и Salmonella.
При применении СРМ ТС-1 для культивирования энтеробактерий значительно повышается антигенная активность эшерихий и иммуногенная актив-
ность моновакцин, а также увеличивается число жизнеспособных клеток в прс цессе их сублимации.
Апробация. Материалы диссертации доложены на Международно научно-практической конференции, посвященной 70-летию Ставропольско НИВС (Ставрополь, 1999), Всероссийской конференции по биотехнологи (Ставрополь, 1999), 11-ой региональной конференции по «Актуальным пробле мам ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавка зе» (Ростов, 1999), на ежегодных научно-практических конференциях Ставрс польской ГСХА (1997, 1998, 1999, 2000).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзо ра литературы, собственных исследований, выводов, практических предложе ннй, списка литературы, включающего 285 отечественных и 94 зарубежных ис точника, приложения.
Работа изложена на 169 страницах машинописи, иллюстрирована 20 таб лицами, одним рисунком и 6 фотографиями.
