Введение к работе
Актуальность темы. Интенсификация воспроизводства стада невозможна без использования новейших достижений биологической науки, к которым относится и биотехнология трансплантации эмбрионов. Ее использование в практике животноводства открывает огромные возможности в разведении и воспроизведении крупного рогатого скота.
Она обеспечивает более интенсивное размножение животных с высокой генетической ценностью, сокращает генерационный интервал, является важным фактором ускорения процесса качественного улучшения популяции сельскохозяйственных животных.
В последние полтора-два десятилетия трансплантация эмбрионов стала важным инструментом племенного прогресса, о чем говорит тот факт, что во многих странах мира с развитым скотоводством она включена в селекционные программы. Среди 50-ти лучших быков черно-пестрой породы в США 32(64%) получены путем трансплантации. Из 47 быков-производителей на станции RPN Германии 28(59,5%) получены также с использованием данного метода. Уже в начале 90-х годов в мире проводилось 72 000 вымываний ежегодно и получали 364 000 эмбрионов, пригодных для пересадки. В Брестской области Беларуси за последние 12 лет получено 5 938 нормальных эмбрионов произведено 4 336 пересадок и получено 1 847 телят.
Разработка технологии криоконсервации эмбрионов позволила снять проблему импорта-экспорта скота и внести элемент планирования в работу с телками-реципиентами.
Маточное поголовье через своих сыновей оказывает значительное влияние на крупные популяции скота.
Естественным путем от коровы получают по одному теленку в год, при вероятности рождения 50% бычков. В связи с этим большое значение и приобретает получение быков-производителей от меньшего числа, но более ценных в генетическом отношении коров. Это побудило ученых разработать методы определения пола ранних зародышей.
Последние достижения в области биологии клетки позволили разработать технологию получения эмбрионов путем оплодотворения ооцитов коров вне организма, что еще на порядок повышает эффективность трансплантации эмбрионов и интенсивность использования высокоценных животных. Существенную роль в повышении эффективности трансплантации играет и технология разделения эмбрионов на две половинки, что позволяет за счет двойнс-вых отелов на 35-40% повышать выход молодняка от одной коровы.
Однако, не смотря на достаточно высокий уровень развития, технология трансплантации в животноводстве не получила широкого использования. Многие ее элементы требуют дальнейшего совершенствования и внимания ученых.
Цель н задачи исследований. В связи с вышеизложенным, целью наших исследований явилась разработка технологии ускоренного воспроизводства высокопродуктивных племенных животных на основе совершенствования старых и разработки новых биотехнологических методов.
Для достижения поставленной цели были поставлены и решены следующие задачи:
-разработка методики отбора и подбора коров-доноров для ускорешюго воспроизводства;
определеіше эффективности различных типов гонадотропинов при вызывании суперовуляции у доноров;
изучение факторов, влияющих на уровень суперовуляции, оплодотво-рясмость яйцеклеток и качество эмбрионов;
определение эффективности получения двоен после нехирургической пересадки;
изучение влияния различных факторов на приживляемость целых и разделенных эмбрионов;
усовершенствование методов разделения эмбрионов и определение эффективности нехирургической пересадки разделенных эмбрионов;
изучение влияния биопсии клеток при определении пола на жизнеспособность и приживляемость эмбрионов;
изучение эффективности трансплантации эмбрионов, получешгых путем экстрокорпоралыюго оплодотворения ооцитов крупного рогатого скота;
определение перспективы и экономической эффективности трансплантации эмбрионов в разведении и селекции крупного рогатого скота
Научная новизна. На основе использования последних достижений в биологической науке, совершенствовании старых и разработки новых методов получила развитие технология ускорешюго воспроизводства племенных животных.
Разработана методика отбора и подбора коров-доноров. Определена эффективность различных типов гонадотропинов. Изучена результагивность получения телят-двоен после пересадки свежих, замороженно-оттаянных и половин разделсшшх эмбрионов. Определена степень влияния породы, сезона года, числа лактации, продолжительности сервис-периода, интенсивности охоты, синхронности эстрального цикла донора и реципиента, качества и стадии развития эмбриона на приживляемость целых и разделенных эмбрионов.
Внесены новые технологические решения в способы пересадки эмбрионов, их микрохирургическое деление. Впервые в Республике Беларусь получены телята с заведомо определешшм полом и телята из эмбрионов, культивированных in vitro. Совместно с коллегами из Германии изучено влияіше биопсии эмбрионов при определении пола на их жизнеспособность и при-
живляемость. Изучена эффективность трансплантации эмбрионов, полученных in vitro.
Практическая ценность работы. Впервые обобщен богатейший материал полученный в производственных условиях и определена экономическая эффективность биотехнологии трансплантации эмбрионов в ускоренном воспроизводстве племенных животных.
Изучена эффективность большого количества гормональных препаратов используемых для стимуляции суперовуляции и сішхронизации половой охоты. В первые в Республике Беларусь получены телята с прогнозируемым полом и оплодотворенные вне организма. С использованием этнлентлюколя разработан экспрес-метод замораживания и пересадки эмбрионов.
В производственных условиях разработана и внедрена технология получения телят-двоен различными способами. Созданы две лаборатории по трансплантации эмбрионов на производстве.
По результатам исследований изданы три монографии и шесть информационных бюллетеней и листков.
Новизна и практическая ценность исследований подтверждена тремя изобретениями. Полученные результаты использованы при разработке пяти методических рекомендаций и комплексных программ по племенной работе и воспроизводству.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту;
влияние условий синхронизации охоты на эффективность трансплантации эмбрионов;
зависимость суперовуляции от ряда биотсхнологических факторов;
влияние некоторых факторов на эффективность получения эмбрионов;
оценка качества целых и разделешшх эмбрионов в зависимости от различных факторов;
эффективность крио- и деконсервирования эмбрионов в зависимости от различных факторов;
обоснование эффективности трансплантации эмбрионов, полученных in vitro;
влияние биопсии клеток при определении пола на приживляемость эмбрионов;
биотехнологические методы получения двоен;
- рост и развитие телят-трансплантатов;
- экономическая эффективность биотехнологии трансплантации эм
брионов в ускоренном воспроизводстве племенных животных.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждеїш:
- на Республиканской научной конференции «Состояние и перспективы
развития биологии в животноводстве» (20-21 сентября), г. Харьков,!988г.;
- на 42 научно-методической конференции «Проблемы интенсификации
животноводства» Дубровицы, ВИЖ, 1989г.;
-на Республиканском совещании-конференции «Трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота» г. Жабинка, 1990 г.;
на научно-практической конференции «Генстико-селекционные и технологические проблемы воспроизводства сельскохозяйственных животных» (19-20 мая), г. Киев, 1994 г.;
на международной научно-практической конференции «Селекционно-генетические и биотехнологические проблемы разведения крупного рогатого скота» г. Брест, 23-25 мая 1995г.;
-на международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы интенсификации развития животноводства», 6-8 июня 1996г.,Горки;
на международной научно-практической конференции «Использование трансплантации эмбрионов в селекции и разведении сельскохозяйственных животных», октябрь 1997г.,Аскания-Нова;
на коллегии Минсельхозпрода (30,03.1996г.);
на международной научно-производственной конференции «Конкурентоспособное производство продукции животноводства в Республике Беларусь», г.Жодино, 1998г.
на 49-ой ежегодной конференции ассоциации европейских животноводов, 24-27 августа 1998 г. Варшава, Польша.
на конференции в рамках Форума « Восток-Запад» 24-25 января 1999 г. и 14-17 января 2000 г., г. Берлин, ФРГ.
По материалам диссертации опубликовано 30 научных работ, в том числе три монографии.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 257 страницах, содержит 95 таблиц, 6 схем, 52 рисунка, состоит из введения, результатов собственных исследований, обсуждений, выводов и практических предложений.
Список литературы включает в себя 375 источников, из них 189 иностранных.