Введение к работе
M^M^msXtJISSUSSBl' Синтез стероидных гормональных препаратов, весы/а широко применяемых почти по всех областях медицины, главным обрезом осуществляется на оскоие природных соединений растительного происхождения: стероидных сапогенинов и глю-коалкалоидов. Однако производство этих важна лекарствокшх средств ограничено из-за недостатка сырья для их синтеза.
В Институте фармакохимии им. И.Г.Кутателадяе АН Грузии о предыдущие годы из листьев юкки славной выделен стероидны;! са-погешн-тигогенин, который оказался рентабельным промшяенным сырьем для синтеза стероидных гормональных препаратов. Разработана технология получения тигогешна из юкки славноіі. Создана промшленгал плантация растения.
В листьях юкки славной содержатся стероидные гликозидм как в спиростаноловой, тан и в ^уростаноловой фор:ло. Тигогенин является генинои ряда спиристана.и для максимального его выделении из растительного сырья ваггае значение имеет оптимальное превращение олигоіТуростанозидов в олигоепироетаиоэиди, осуществляемое ондогешюй /?-глюкозидазой.
В связи с этим, изучение специфичности и физико-химических свойств глюяогидролаэы листьев юкки славной и влияния аутофзр-ментации на выход тигогенина может играть большую роль а оптимизации технологии производства данного вещества.
Цель .и.задачи исследования. Цельо диссертационного груда является изучение свойств уЗ-глюкозидпэн юкки славной и установлений ее участия п превращении олигофуростанозидов в олиго-спиростанозиды.
Для достиаеушя поставленной цели решались следующие задачи:
- исследование локализации (І -глюкозияазн и олигофуроста-
ноэидо'в в листьях юкки славной;
-:'выделение и очистка Р -глюкозидязы и изучение физико-химических свойств фермента;
изучение специфичности р -глюхозидаэи по отт-отению к аг-ликону и углеводному фрагменту субстарта на примере некоторых природных стероидных гликозидов;
установление корреляционных связей меаду изменением
. й-глюкозидлзной активности и содержанием стероидных гликозидов в течение вегетационного периода растения;
- изучение влияния аутоферментации листьев юкки славной
на шкод тигогелина.
Ня.уцная нояипна работы. Впервые в листьях юкки славной обнаружены две формы уЗ-глшояидазы. 1-ая форма катализирует превращение олигофурастонозидов в олигоегшростанозиды и расщеі. -ляет синтетически субстрат 4-іштрофенил-$--/,'-глюкопиракозидІ а 2-ая фо jMa - только синтетический. Определены их молекулярные массы, которые составляют 32000 и 68000, соответственно.
Установлена внутриклеточная локализация G -глшозидазы в листьях юкки, славной, изменение активности фермента в процессе вегетации растения и некоторые его физико-химические свойства.
Выявлена субстратная специфичность 1-ой форлы в -глюко-эидаэы по отношении к природным стероидньм гликозидам. Доказано, что сродство фермента к природным субстратам не зависит от строения агликопа или олигосахариддаго фрагмента при С-3 стероидного ядра.
Наказано, что в листькх шу.и славной олигофуростанозидн накапливаются в эпидермальный слой в нескольких расположенных рядом і.леткох.
Выявлена зависимость выхода тигогенина от условии аутоферментации.
Практическая значимость .работы. Разработан простой способ выделения високоочиїцгаїшо'і суммц олигофуростшюзидов из эпидермиса листьев юкки славной.
Предложены условия аутог'ерментацми, позволяющие значительно увеличить выход тигогенииа из растительного сырья.
.Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены на У Международной конференции по химии и биотехнологии биологически активных природних веществ (Варна, Болгария, 1989).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 научных работ.
Структура и объем диссертации._ Диссертация изложена на /4(? страницах мааинописного текста, иллюстрирована 13 рисунками, 8 таблицами и одной схемой. Работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной* части, обсуждений получении результатов, выводов и списка цитируемой литературы (191 наименование, в том числе 128 иностранных).