Введение к работе
Актуальность проблемы. Развитию нового перспективного направления функциональной нейрохимии особенно способствовали систематические исследования уникальных для нервной ткани белков (Moore, 1965, Hyden, 1978).
В настоящее время известно свыше 100 нейроактявных белков, большинство из которых идентифицировано только в 80-х годах. (laobe, 1984). Разрабатываются новые, более спенифи-' ческие высокочувствительные методы идентификации этих белков, их количественного определения. Интенсивно изучаются возможные иммунологические, ферментативные, регуляторные, трансмит-терныеГ нейрогуморальные я другие свойства нейроспєшіфических белков. Однако, выяснение функциональных возможностей этих белков для большинства из них пока не завершено.
К нейроспеиифическим белкам, известным еще в ЄО-х годах и идентифицированным биохимически, относятся кардиоактивные белок-гормональные комплексы, образуемые в магнопеллилярных ядрах гипоталамуса (Галоян А.А., 1964; Галоян А.А., Срапионян P.M.,. 1965,-1968). На основе накопленного большого экспериментального материала, характеризующего макромолекулярнке свойства, функциональные возможности, тканеспвшфичяость, региональную и субклеточную локализацию этих соединений, была сформулирована концепция (Sulojan, Srapionlan, 1933) о наличии в гипоталамусе ряда животных и человека новых систем, осуществляющих химическую регуляцию метаболизма и функций не только в мозгу, но'и в ряде висперальных органов, в особенности в сердце. Однако, изучение метаболических превращений этих белок-гормональных комплексов, в особенности удасгие в патологических процессах, например, в ишемйческих. болезнях сердца, решалось менее успешно. Между"тем, сравнительное изучение кардиоактив-ных белок-гормональных комплексов в организме в норме и при сердечной патологии может быть полезным как в выяснении их функционального предназначения, так и в их возможном прикладном применении.
Цель настоящей работы заключалась: в изучении нейроспепи-фичеоких кардиоактиБных белок-гормональных комплексов в орга-
_4 _
низме крысы в норме и при экспериментальном инфаркте миокарда, В связи с этим задачи настоящей работы сводились к следующему:
1. выделить и очистить три кардиоактивных белэк-гормо-
. нальных комплекса (НТК) из гипоталамуса крупного рогатого
скота,
-
получить специфические кроличьи антисыворотки к бычьим индивидуальным БГК; исследовать их иммунохимические свойства ,
-
изучить региональное и клеточное распределение кардиэ-активных БІК методами иммунохимического и радиоиммунологического анализа (РИА) в организме крысы в норме,
-
охарактеризовать распределение кардиоактивных БГК в условиях моделирования экспериментального инфаркта в организма крысы.
Научная новизна и практическое значение. Получены высоко-специфические антисыворотки к бычьим гипоталамическим кардио-активным БГК. Впервые показана динамика распределения искомых БГК в норме в организме крысы. Продемонстрирована корреляция в содержании БГК в мозгу крысы и быка, которая на три порядка превышает таковые в любом периферическом органе, что позволяет считать их специфическими для нервной ткани. Выявлено также совпадение в распределении кардиоактивных БГК между видами в различных регионах мозга, а именно - их высокое содержание в гипоталамусе, в убывающей последовательности в мозжечке для БНС и БНК, а для БНГ - в коре больших полушарий мозга.
Иммуноцитохимические исследования клеточной локализации БНК в мозгу подтвердили высокое его содержание в мозжечке, в частности, в клетках Пуркинье. Выявлено также четкое окрашивание цитоплазмы, нервных отростков, синаптических окончаний, что может свидетельствовать о возможной его миграции вдоль нервного волокна я последующей секреции в кровяное русло. Дан- . ные РИА продемонстрировали значительное содержание БГК в крови (от 10 до 25 нг/мл).
Впервые показано становление нового гомеостаза кардиоактивных БНГ при инфаркте миокарда (ИМ). У крыс с коронароокклю-зионным ИМ выявлено резкое уменьшение иммунореактивных БГК в различных регионах мозга, с одновременным многократным (от 6
- 5 -до 17 раз) увеличением в периферической крови. Исследование сдвигов в содержании БГК показало также их многократное увеличение в ряде периферических органов, в особенности в сердив и селезенке.
Впервые показано увеличение содержания кардиоактивных БГК в сиворотко инфарктных больных, примерно в 8-12 раз.
Полученные данные позволяют считать целесообразным использование кардиоактивных БГК в качестве маркеров в сердечно-сосудистых патологиях. Применение же специфических антисывороток' к ним может явиться новым подходом в диагностике определенных изменений при отих патологиях.
Апробация работы. Материалы диссертации были представлены: на ХУІ конференции ФЕЮ (Москва, 1984); У Всесоюзном съезде биохимиков (Киев, 1986); X Всесоюзной конференциипо биохимии нервной системы (Горький, 1988); Ш Всесоюзной конференции по нейроэндокринологии (Харьков, 1988); X собрании Европейского общества нейрохимиков (Лейпциг, 1990).
Диссертационная работа рассмотрена и одобрена на заседании ученого совета Института биохимии АН РА (Ереван, 1992).
Структура и объем диссертационной работы. Диссертация' изложена на' 90 страницах машинописного текста и состоит из введения, трех глав (обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований и их обсуждение), общего заключения, выводов. Диссертация иллюстрирована 8 таблицами я II рисунками. Список литературы содержит 174 наименования на русском и английском языках.
