Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. В настоящее время кажется вполне закономерным, когда новые экспериментальные данные не укладываются в уже устоявшиеся представления об особенностях функционирования тех или иных систем организма и, тем самым, служат отправной точкой для развития новых научных направлений, что, в конечном итоге приводит к появлению новых, более полных знаний. Особенно важно, когда эти данные являются экспериментальным воплощением идеи, возникшей на основании достижений различных научных направлений. Одним из наиболее ярких примеров вышеизложенного может служить открытие абзимов - антител, обладающих каталитической активностью. Предпосылкой для получения абзимов послужила идея В.Дженкса о возможной каталитической активности антител, сформированная на основании достижений иммунологии и биокатализа. Первые абзимы были получены А.Трамонтано и Дж.Полаком при иммунизации животных стабильными аналогами переходных состояний химических реакций, что дало толчок для интенсивного развития этого научного направления. Развиваясь как один из методов молекулярного дизайна (получение антител с заданной каталитической активностью), наука об абзимах получила существенное дополнение в связи с открытием природных каталитическиактивных аутоантител у людей. Первые такие антитела были обнаружены в крови больных астмой и системной красной волчанкой группами С.Паула и А.Габибова и обладали пептид- и ДНК- гидро-лизующей активностями. Следует особо отметить, что появление природных абзимов у человека связано с наличием выраженной аутоиммунной патологии. Способность таких абзимов гидролизовать физиологически важные биомолекулы (нейропептид, ДНК, РНК, тиреоглобулин) дает основание предполагать, что абзимы могут каким-то образом принимать непосредственное участие в развитии заболевания. В настоящее время остается открытым вопрос о существовании абзимов у людей без выраженных аутоимунных патологий. Поскольку аутоантитела (в частности и антиидиотипические антитела) обнаружены как у больных, так и у здоровых людей, по-видимому, есть некоторые основания предполагать, что абзимы могут присутствовать и у здоровых людей.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Проведенные ранее исследования показали, что инкубация препарата обработанного формалином S.aureus с молоком человека приводит к истощению последнего по протеинкинаэной активности. Поскольку использованный препарат стафилококка обладает способностью связывать иммуноглобулины, то было сделано предположение о возможном участии антител в фосфорилировании белков молока. Целью данной работы было изучение протеинкинаэной активности иммуноглобулинов молока и их роли в фосфорилировании белков молока человека.
Научная новизна и практическая ценность работы.
Впервые показано, что секреторные иммуноглобулины класса А (slgA) могут обладать ферментативной активностью. slgA из человеческого молока, катализирующие в присутствии АТР фосфорилирование казеина, являются первым примером природных абзимов, присутствующих в организмах без аутоиммунной патологии и катализирующих фос-фотрансферазную реакцию. Нами показано, что обнаруженные абзимы могут принимать участие в фосфорилировании белков молока. В настоящее время известно, что женское молоко является для ребенка не только источником питательных веществ, но и оказывает на него иммунное и даже психотропное влияние. Такое разнообразие природных функций молока предполагает наличие в нем определенных регулятор-ных систем. Поскольку роль фосфорилирования белков в регуляции их биологической активности общеизвестна, то не исключено, что обнаруженные абзимы могут принимать участие в регуляции физиологической активности молока. Таким образом, полученные результаты могут служить отправной точкой для исследования особенностей протекания антитела-зависимых реакции в норме и при патологиях, что, в конечном итоге, может иметь определенную диагностическую ценность.
Было обнаружено, что каталитически активный slgA различается по сродству как к АТР, так и к казеину. Такая гетерогеннось исследуемых антител указывает на их поликлональное происхождение. Следует отметить, что факт сродства slgA к казеину и АТР позволяет отнести его к определенному типу антител. Известно, что существуют так называемые полиреактивные антитела, характерной особенностью которых является способность взаимодействовать с несколькими неродственными антигенами. В частности, описаны антифосфолипидные
антитела, обладающие способностью взаимодействовать кроме фосфоли-пидов с такими антигенами, как ДНК, АТР и казеин. Таким образом, выделенные антитела, по-видимому, можно отнести к классу полиреактивных антифосфолипидных антител.
Было обнаружено, что в крови доноров разного пола присутствуют иммуноглобулины класса G, обладающие сродством к каталитически активным slgA из молока человека. Добавление к молоку таких aHTH-sIgA-антител приводит к избирательному ингибированию фосфорилирования его белков.Полученный результат указывает на то, что выделенные из молока slgA могут присутствовать как в молоке, так и в крови здоровых людей. По-видимому, наличие sIgA-абзимов не связано с процессом лактации, как и репродукции в целом, а является нормальной функциональной составляющей секреторной иммунной системы человека.
СТРУКТУРА И ОВЬЕМ РАБОТЫ. Диссертация опубликована на 94 страницах, включая 16 рисунков, 2 таблицы и список цитированной литературы (108 ссылок). Работа состоит из следующих разделов: Введение, Обзор литературы, Материалы и методы исследования, Результаты и их обсуждение, Заключение, Выводы, Список литературы.
Публикации и апробация работы, по материалам диссертации опубликовано 3 печатных работы.