Введение к работе
Актуальность проблемы. Миотоническая дистрофия является наиболее распространенной формой наследственных нервно-мышечных заболепаний j взрослых (Harper P.S.,1989). В Башкортостане болезнь встречается в среднем с частотой 3,01: 100 000 (Магжанов Р.В., Ахмадеева Л.Р., 1999); в настоящее время в Республике, по данным компьютерного регистра, проживает 134 больных МД.
Мутация при МД представляет собой увеличение количества CTG-(цитозин -тимин-гуанин)-тринуклеотидных повторов в З'-нетранслнруемом ло-кусе гена, локализованного на длинном плече 19 хромосомы и кодирующего фермент миотонинпротеинкиназу (МПК), который относится к подсемейству серин-треониновых протеинкиназ (Brook D.J. et al., 1992, Mahadevan M., 1992). Клеточный эффект CTG -экспансии и механизм его реализации в мультиси-стемный клинический фенотип не ясен. Поэтому несомненный интерес представляет дальнейшее изучение патогенеза этого заболевания с целью оптимизации его лечения, поскольку эффективных этиотропных терапевтических мер не существует, а используемые методы не всегда патогенетически обоснованы.
При анализе клинических данных, доказывающих вовлечение многих органов и систем, предположено, что ведущую роль в проявлениях заболевания играет генерализованный дефект клеточных мембран (Roses А. et г\., 1975, Ito К, et al., 1997). Это предположение основано на исследованиях клетак крови, системы мононуклеарных фагоцитов, мышечных клеток в модельных условиях. Однако результаты, полученные исследователями, часто оказывались противоречивыми. Литературные данные относительно активности Na^-K^- и Са2+ -АТФ-аз (Luthra М. G. et al.,1979,. Mishra et al., 1981, Benders A.A. et al., 1993, 1997) также различаются, и поэтому требуют дополнительного выяснения. С другой стороны, многие вопросы клеточного метаболизма осгаются почти не
изученными. Так, в доступной литературе сведения о резистентности мембран клеток при МД малочисленны.
Имеются лишь единичные сообщения о состоянии системы циклических нуклеотидов у больных МД, в частности, цАМФ (Somer Н. et al., 1992), между тем докгзано, что МІЖ имеет тесное сродство с цАМФ -зависимыми протеин-киназами (А-киназами) (Brook D. J. et al., 1992) и возможное изменение функции фермента при МД может отразиться на уровне этих внутриклеточных посредников дейс1вия регуляторных сигналов.
Отсутсгвуют данные о метаболизме межклеточного вещества (гликозаминогликанов, протеогликанов, коллагеновых и неколлагеновых белков) при МД, хотя качественные и количественные изменения в структуре соединительной ткани оказывают существенное влияние на состояние плазматических мембран, обмен и функционирование клеток различных тканей в целом.
Биохимические изменения на организменном уровне при МД изучались многими исследователями (Магжанов Р.В. 1987, Diliberti J.H. et al., 1982, Annane D. et al., 1998 и др.), в то же время анализа гематологического профиля пациентов с МД в доступной нам литературе встречено не было.
Для изучения состояния клеточных мембран в организме человека в качестве модел4 наиболее часто используется эритроцитарная мембрана, отражающая системные изменения плазматических мембран клеток тканей и органов и и то же время обладающая всеми свойствами мембран, доступная выде-лСНИЮ и ПОЭТОМУ наиболее удобная для исследования (Черницкий Е.А., 1981)
Цель. Изучить структурно-функциональное состояние эритроцитов и их мембран, а также обмен гликозаминогликанов при миотонической дистрофии в связи с клиническими проявлениями заболевания и определить подходы к коррекции мембранной патологии.
Задачи исследования. У больных миотонической дистрофией в зависимости от дпительности заболевания и клинических особенностей течения :
-
Изучить сдвиги функционального состояния эритрона и основных параметров эритроцитов путем определения их количества и объема, общего и внутриклеточного содержания гемоглобина.
-
Оценить состояние мембран эритроцитов путем определения осмотической, кислотной резистентности эритроцитов и активности транслоргных иде-нозинтрифосфатаз мембран.
-
Оценить степень метаболических сдвигов в организме путем определения некоторых показателей углеводного, белкового, липидного и эпектролитного обмена (концентрации в крови общего белка, креатинина, мочевины, холестерина, билирубина, глюкозы, ионов натрия, калия, кальция).
-
Изучить степень развития цитолитического синдрома на основании определения сывороточной активности аланинаминотрансферазы и гспартатгми-нотрансферазы, а также концентрации цАМФ и цГМФ в плазме крови.
З.Оценить состояние системы гликозаминогликанов по изменению их содержания в плазме крови и моче.
Научная новизна. Впервые проведена комплексная оценка важнейших сторон структуры и функции эритроцитов у больных миотонической днстрофией в зависимости от клинических особенностей течения и длительности заболевания, включающая параметры стабильности мембран, активности мем1ранных АТФ-аз. Установлено, что течение миотонической дистрофии сопровождается изменениями гематологических показателей: снижением количестоа эритроцитов у больных мужчин и концентрации гемоглобина у обоих полов, причем с прогрессированием двигательных расстройств в популяции эритроцитов несколько увеличивается содержание макроцитов. Также выявлено у больных повышение осмотической и кислотной резистентности мембран эритроцитов, снижение активности общей и Na*, К^- Mg^*- АТФ-азы (ЭГТА-) эрнтрсцитарных мембран. В зависимости от степени выраженности миотонического феном1на и двигательного дефицита обнаружены изменения содержания в кропи больных уровня общего белка, мочевины, глюкозы, холестерина, активности АЛТ и ACT,
а в зависимости от длительности заболевания - изменение концентрации ионов кальция и натрия.
Впервые установлено при миотонической дистрофии снижение содержания е; плазме крови гликозаминогликанов с одновременным увеличением их экскреции с мочой. Уровень этих изменений зависит от выраженности клинических проявлений.
Полученные данные дополняют имеющиеся сведения о патогенезе миотонической дистрофии, о значении при этом заболевании состояния плазматических мембран и метаболизма гликозаминогликанов.
Практическая значимость. Предложены критерии объективной оценки глубины поражения при миотонической дистрофии, включающие определение структурных м функциональных показателей эритроцитов, уровня глюкозы, холестерина, общих гликозаминогликанов и активности трансаминаз в крови, а также степень экскреции гликозаминогликанов с мочой. Данные критерии целесообразно использовать наряду с клиническими исследованиями больных.
Ряд изученных показателей (кислотная и осмотическая резистентность эритроцитов, активность общей и Na\ К*- Mg^*- АТФ-аз, уровни гликозаминогликанов в кропи и моче) предложено использовать как критерии в диагностике прогрессирования патологического процесса, оценки тяжести состояния больных.
По ма1ериалам диссертационной работы оформлено рационализаторское предложение; «Способ оценки тяжести течения миотонической дистрофии». Зарегистрирован БГМУ, № 2126 от 16.11. 99.
Внедрение в практику. Полученные результаты работы внедрены в лечебно-диагностическую практику неврологического отделения Республиканской клинической больницы им. Г, Г. Куватова.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на 61-й и 63-й научных конференциях молодых ученых БГМУ (Уфа, 1996; 1998), конференции «Современные методы диагностики и лечения заболе-
ваний нервной системы» (Уфа, 1996); конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири «Актуальные вопросы прикладной биохимии и биотехнологии» (Уфа, 1998, Челябинск, 1999); конференции «Актуальные вопросы неврологии, нейрохирургии и медицинской генетики» (Уфа, 199S), совместном заседании кафедр биохимии, биоорганической и клинической химии с курсом лабораторной диагностики ИПО, неврологии с курсами медицинской генетики и нейрохирургии 7 октября 1999.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация представлена на 108 страницах машинописи, содержит 11 рисунков, 34 таблицы, состоит нз впедения, обзора литературы, характеристики обследованных больных и описания материалов и методов, результатов исследования, обсуждения и списка литературы (19 отечественных и 140 иностранных авторов).