Введение к работе
Актуальность проблеми.В связи с широкой распространенностью' сердечно-сосудистых заболеваний выяснение молекулярных механизмов регуляции общего и регионарного кровообращения приобретает первостепенное значение.Регуляция артериального давления (АД), как и многие другие процессы в организме, осуществляется при участии биологически активных веществ противоположно направленного действия. Изучение прессорных и дспрессоркнх систем организма, выяснение их взаимоотношений и регуляции их деятельности ваяно как для понимания сути процесса, тше и для целенаправленного воздействия на него. Такие исследования закладывают основи для разработки эффектна- * них мер терапии и профилактики.
Регуляция АД, поддержание кровообращения, включая микроциркуляцию, на определенном уровне в постепенно меняющихся условиях внешней среды и в зависимости от состояния организма представляет собой комплексный процесс, обеспечивающий необходима уровень кровоснабжения тканей. По современным представлениям, основным биохимическим мехшшзмом, посредством которого осуществляется постоянная регуляция АД и микроциркуляции, является решш-ашготензгато-вая система (РАС),контродирущая сосудистый тонус и водно-солевой баланс - оба фактора, определяицке уровень АД. Она функционирует п тесной взаимосвязи с центральной и симпатической нервной системой ( cat-t et m. » 1904), влияние которых на АД, как и целого ряда эндогенных веществ, реализуется в большой мере при участии РАС (imurn et ai. 1280). Антагонистом РАС по действию на АД являетоя каллякреин-кшшновая система (ККС), уравнояеияваюдая в какой-то степени прессорное дейстше РАС. Обе эти системы вклжаюг каскада реакций ограниченного протеолдза, приводящих к образованию вазоактивных пептидов ангиотензина П (А П) и брадгашша (Ш), отлячахщпхел противоположным действием на гемодинамику л водно-солевой обмен. Ферменти, участвующие в образовании и янагстияецпя этих пептидов, являйтеся регуляторами их концентрация в кровя н тканях, могут определять в конечна» итоге их эффект я еркиишо*
Конечний этап образования активного прессорного пептяда А П катализирует агпгнотензіш-превраідаксшй фермент (карбоксйпатстспя, кгашпаза И, дотептддвл-карбоксипептпдаза А, КФ 3.4.15.I). Этот, фермент привлекает внимание исследователей во леем мире, п интерес к нему продолжает расти, в особенности со стороны фармакологов.а клиницистов.Это связано о его ратью в регуляция кровообращения я
с гем, что он является центральным звеном, воздействием на которое ыоьыо целенаправленно влиять на уровень АД и кровоснабжение орта-нов. Торможение его активности введением специфічних ингибиторов (каптоприл, зналапріл, рамішрил), отличающихся высокой избиратель-иосгъа, приводит к сшикошно повышенного АД почти яра всех формах, лшоргонзнвшйс состояний, в том числе и при гипертониях, не поддающихся лечению традиционными средствами ( Dnvies et ai. , 1984 Ибеї et al. , 1980). Ингибитора оказывают хорошій лечебний еф|>окт, обусловленный улучшением кровоснабжения, при сердечно-сосудистой недостаточности ( RonanEiewicz et al. , 1983), инфаркте миокарда
Цель и основные задачи исследования. Целью работы являлось изучение свойств н биологической функции протеолыгического фермен-*га, обнаруженного наїді в кора почек блка и названного карбокепкате-иониом (Кк).
В основнце задачи работи входило: I) Разработка метода видело-нал и получение гомогешюго препарата Кк, 2) Изучение фазико-хими-чзских свойств и специфичности действия Кк на пептида, а таккз тор-поеония его активности различиями ингибиторам'., 3) Выяснение физиологической роли Кк. Разработка метода определения его активности в оиворотке крови и выяснение ее уровня у ладе 13 в норме. Исследование scKSiioiiau активности Кк при некоторая патологических состоящая* у; лздаіі. и гидотних, 4) Поиски бндогоннш: модуляторов фермента, 5) Щ-ие синтетических высокоактивна:: норорл-ллых нктибиюпов Кп, ойп-ыва:щш: аатигипертенвивное действие,
Научяля нохшня.О'спаруухш проїоолгшнеокпй фермент Кк, отллчз-ї..щі:йіі ко сіюцпфлчноохіі довствли ої :;зк;оііш.х притепназ тоней, , Вігорвке бил равработші кзгод лщз.тешк Кк и шорвие получек
ВПС0КО0ЧИи,!ЛШЦЁ фОрМЗНЇ.
Исследование особенностей деііотвпя Кк па синтогичеекпе ьенти-т Дії іюа'іоі'лло офо]*.луллрова'и- ocaotuuo 'зробог-ангя фар-.-ош'г к огру»:уу-|,їз иотидов, пояснить iwnimwe рабліїчшж группировок на скорость nil
р;іллса і^іііВДй фург-^нгса» тытптъ сиооиС:шо\ъ грг<гш'н рлоь^шіяїі
ЕЙрсца niui^zno, чїо цр;вга:-:;:;-в:-"о Л І ь L Ш v. рурулоіао Ik vj'i'-^Oki-KiiijZiih одьл t-'-j].-..'jii;c-.b Пі. оа^;э,:лл;,и ьровадзд&іц лоа-";^догл-
їй t'ci-r/ії щ^^^ПгСїі^.') ь ^yuawj Кі: » оргазпімг, Издвпііута иояцзп-і
цил его ключевой роли в регуляции концентрации юэоактивпнх пепта-' дов-антпгонистов А П и Бк в крови и гг-чяк.
Обнаружено присутствие Кк в синодальной жидкости, полученной из воспаленных суставов больных артрпташ различной этиологии.
Обнаружены природные ингибиторы Кк в сиворотко и лейкоцитах (нейтрофілах и мононуклеарах) человека и быка, в синовиальной тд.--кости большие артритами,. .в легких и почках быка, а такта в яде s?,iod эфы и кобры.
Обнарукеп эндогенный активатор Кк в нейтрофілах и в крови человека.
Показана в экспериментах на собаках возможность применения ингибиторов Кк с целью повышения выживаемости и снижения осложнений в постреатшапионном периоде.
Практическая значимость. Ванное теоретическое и практическое значение и.\<еют исследования, которые привел! к обнаружению ключевой роли Кк. Они создалі! основу для понимания взаимосвязи ренпн-антио-' тензиновой и каллнкреин-кининовой систем - двух физиологических систем, участпушзіх в регуляции ДД и считавшиеся до этого ко связанпя-кя меаду собой. Это привело к новому уровню погашання механизма рзЦ гуляцпп кровообрашнпл в организме. На основе ингибиторов Кк были созданы высокоэффективные ангигипортензивные препараты, оказывающее положительный терапевтический эффект при различных формах гипертонии, при сердечно-сосудистой недостаточности и других нарушениях кровообращения.
Исследования, посвященные поиску ногах синтетических ингибиторов Кп, активгалс при пероральном применении, позволили предложить повое соединение, отличающееся высокой аятигипертензивной активностью в опытах на крысах с различными формами гипертонии.
Применение специфичного ингибитора Кк тепротида на ранних стадиях реанимации, вызывая улучиенпе кровоспабплтл органов, оназыкн до заштное терапевтическое действие, шракавкоося в снижошта ослоа-понпЗ со стороны ШС и повшиепип выживаемости. Полученные результата представляют существенный интерес, т.к. полнопэннос воесгаповлоппо ' функций ИШ является основной целью пр! оиівленгаї оргаяпвма поолэ тергяшального состояния.
Обнаружение п изучение природних глялйятороь и активаторов Its,' пзходшесся в крова и лейкоцитах человека, в перспектива кого? приметя к выяснонпв механизма регуляции Кк в организм, Кроко того,
это mozst послуетть основой для создания попа торзпэвтагсеокях
средств, а такяе может оказать пшощь б ранней диагностике ряда за-болеваїшй, включая гипертонию, различные воспалительные процессы, і заболевания, сопровождающиеся нарушениями системы комплемента. ,
Обнаружение ингибиторов Кк в лейкоцитах имеет теоретическое л практическое значение для понимания участия Кк в эоспалошга. . Эта данные позволили предложить гипотезу механизма влияния лейкоцитов на проницаемость сосудов при воспалении.
Предложенный наші метод определения активности Кк в сиворотко был передан в ряд клиник страны (Ленинград, Харьков, Ашхабад, Хабаровск, Рита).
Апробация работа. Основные положения работы доложены и обсуг;-; деїш на I, П, Ш и У Всесоюзных биохимических оъездах (Ленинград, ! 1964; Ташкент, 1969; Рига, 1974; Киев, 1986), на сессиях Отделения медоко-біюлотических наук АМН СССР (Москва, 1976; Ереван, 1902; Мо~ оква, 1983), Советско-итальянском биохимическом симпозиуме (Москва, 1977), 17-м.съезде терапевтов (Москва, 1974), Ш Всероссийском съезде кардиологов (Свердловск, 1985), Симпозиуме по биологически активным пептидам и белкам (Баку, 1980), 4 Всесоюзном симпозиуме по медицинской энзимолотии (Алма-Ата, 1983), УІ Международном биахимичо-^ оком конгрессе (Нью-Йорк, 1964), ІУ Конгрессе ревматологов латип- . окшс стран (Льеж, Бельгия, 1980).
Положения, внносимые на задмту.
-
Обнаружение нового протеолитичеокого фермента, карбоксика-эепсина, отщеплявшего дипептиды с карбоксильного конца различных''по строению пептидов; его физико-химические и онзвматаческко свойства.
-
Идентификация кэрбоксикатепсина о двумя разными ферментами, описанными как пнтиотензин-превращэвдиЯ фермент и киншшза П, и доказательство ого ключевой роли в функционировании рениы-ангиотензи.-ноьоЁ и каллйкршш-кйниновой систем, контролирующих кровяное давле-нив,
-
Результаты исследований активности КК в сыворотке больных ; роно-ваокулярной гипертонией а гипертонической болезнь» н у собак в окотренольтпс состояниях, овздетедьотдрзчие в полъву его участия и. оаддтннх шлшшсоїорикх реакциях орхаяшда, направддшга на восста-ковлзішо нормального кровообращения,
-
Обааруюпде аддогсннах иитябахоров корбоксикаїеиоаїш в крс-і;:д, хойкоютсг її оїиоіаалгьиой хздксстл чзяовока і: сктаїлїора(ов) і| rqqvx а н&Ітрсфлах человека; их фааиодотачоойоо еаачоше.
6« Bos^oraocri. їерапеїжїчеакого ирвгашикш сантетаческіа іше-- йіїоров .ЪарбокешгвнсвЕа орд рсашіацса.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит но введеній,
обзора литературы, методической части, трех глав собственных иссле
дований, обсуждения результатов, заключения и выводов. Диссертация
пзяокена на страницах машинописного текста, содержит 48 рпсуіь
Похожие диссертации на Свойства и регуляционные функции карбоксикатепсина (ангиотензин-превращающего фермента)
