Введение к работе
ІШШШ-ШР. проблемы. В последние гоци синдром токсического кока (СТШ) привлекает к себе всё возрастающее внимание исследователей как в нашей стране.'так и за рубешм. К числу основных факторов, обусловивших, значительный подъём интереса к настоящему заболеванию в США и западноевропейских странах, относятся крайне тяжелее течение СТШ, Бысокая частота детальных исходов при нём в сочетании с отсутствием надёжных методов диагностики и патогене-тичесмои терапии (M.S. Bergdoll, P. J.Chesney, 1991J. Синдром токсического шока, этиологически связанный со штаммами Staphylococcus aureus, был выделен в самостоятельную нозологическую единицу (J. К. Todd et al., 1978), и в настоящее время рассматривается исключительна как отдельное инфекционное заболевание, ведущим син-' дромом которого является токсический шок.
Важнейшим патогенетическим фактором СТШ является экзотоксин токсического шока S. aureus (*ЭГЩ). продуцируемый практически всеми штаммами золотистого стафилококка, выделенными от больных СТШ (M.S. Bergdoll et al., 1.981; P. MSchlievert et al. . 1981). Несмотря на то., что воздействием именно данного-токсического продукта S. aureus обусловлены практически все проявления СТШ (P. M.Schhe-. vert, 1939). многие особенности патогенетических механизмов реализации его токсических проявлении не изучены. 3 полной мере это относится и к биохимическим аспектам патогенеза СТШ
Как известно, евоСоднорадикалькым процессам принадлежит ведущая роль как в защите организма от повреждающего действия различных чужеродных агентов (в том числе бактерий и токсинов), так и в проявлении токсических свойств многих соединений (Ю. А. Владимиров, А.й.Арчаков, 1972). Показано активирующее влияние различных бактериальных токсинов (как знтеротокоинов, так н эндотоксинов), на перекисное окисление липидов (ПОЛ), а'.такте метаболическую активность фагоцитов 1-Е. В. Рябиченко, 50t Б. Еэепчук, 153? й1); S. Sonkare, T.Pekkanen. 1932; K.3ungino et al. , 108?; A, Kappet al. , 1987; S. Muto et al. , 1988).
Очевидно, что участие свободноридикальных процессов ъ нечто-' генэзе токсического воздействия ЭТШ на организм также мо.жт быть вполне вероятным- Б-доступной литератур? .нам удалось найти только одну работу, посвященную иселедойслим влиянии ЭТШ на клетки
фагоциты (E.MBerger et al., 1988). Показанное авторами in vitro 'подавляющее влияние ЭТШ на реактивность полиморфнойдерных лейкоцитов свкдетедьствуе? о перспективности исследования биохимичее--ких особенностей патогенеза. ОТШ. --—-. -
Целью настоящ.его~йсаледования явилось выявление наущений в процессах перекиеного окисления липидов в органах и тканях животных, а также состоянии бйоцидного компонента реактивности поли-. морфноядерных лейкотдитов при экспериментальном воздействии экзотоксина токсического" шока S. aureus.
В соответствии с поставленной целью исследования были определены .следующие экспериментальные задачи:
-
Определить-содержание продуктов ПОЛ (диеновых конъюгатов и шффэвых оснований) в плазме крови, тканях печени и миокарда.в различные сроки поел** введения ЭТИ подопытным животным.
-
Изучить активность ферментов систем обезвреживания реак-' циошюсдособных кислородных радикалов и метаболитов (супероксид-дисмутазы и каталазы) и перекисей липидов (глутатионпероксидазы, глутатиокредуктазы и глутатион-З-трансферазы) эритроцитов, печени и миокарда- в различные сроки после введения ЭТШ.
-
Исследовать биохимические особенности реактивности поли-морфкоядерных лейкоцитов в условиях воздействия ЗТШ как in vivo,. так и in vitro.
-
Обосновать экспериментальным -путём возможность использования в терапии СТШ соединений, оказывающих влияние на свободно-радикальные процессы. .
Научная новизна..
В результате проведенных исследований получены новые' факты, имекяцие.существенное значение для понимания механизма реализации токсических эффектов экзотоксина токсического шока S. aureus.
БперЕые проведено систематическое исследование динамики образования продуктов ПОЛ и активности антиоксидантных ферментов в условиях воздействия ЭТШ на организм in vivo.
Обнаружено выраженное фазное изменение активности ферментов систем обезвреживаний активных форм кислорода (еупероксиддисму-тэзы и каталазы) и перекисных метаболитов липидов (глутатионпе- роксидазы, глутатион-о-трансферазы и глутатио'">едуктазы), разно-, направленный характер которого в эритроцитах в инициальный период воздействия ЭТШ указывает на возникновение дисбаланса в есте-
ственно протекающих процессах генерирования и обезвреживания высокоактивных свсбоднорадикальных метаболитов, а также.понижение эффективности антиоксидантная зашиты.
Показано повышенное накопление в различные фазы воздействия ЗТШ на организм продуктов перекисного окисления (диеиових конгю-гатов и шиффовых оснований) в плазме крови, тканях печени и wo-карда, что подтверждает развитие в организме комплекса патохими-чёских нарушении, связанных о активацией процессов свобсднсради-кадьного окисления.
Получены данные, свидетельствующие об ингиОироваяик функциональной активности полиморфноядерных лейкошітов в условиях воздействия ЗТШ in vitro и Пі vivo и возможности коррекции возникающие нарушений путём применения прооксидантов, в частности, препаратов антибиотиков антрациклического ряда.
Установлено, что подавление активности метаболических реакций полиморфноядерных. лейкоцитов под действием ЗТШ сопровождается, наряду с выраженным снижением продукции активных форм кислорода, нарушением чувствительности активирующих механизмов к действию свободных ионов кальция.
По результатам проведенных исследований на защиту выносятся следующие основные положения:
экзотоксин токсического шока S. aureus вызывает выраженную активацию процессов" пере'киеного окисления в органах и тканях тавотных, характер которой свидетельствует о дисбалансе.происходящих в организме сопряженных процессов образования и обезвреживания реакционноепссобных свободнорадикальных со»динениа и понижении эффективности механизмов антиоксидантной защиты; .
наблюдающееся в условиях воздействия экзотоксина токсического шока S.aureus как in vitro, так и in vivo подавление био-цидного компонента реактивности полиморфноядерных лейкоцитов со-провождается выраженным уменьшением генерации активных форм кислорода и обусловлено снижением чувствительности механизмов регуляции активности клеток к действию свободных ионов кальция;
. , - применение прооксидантов и, в частности, антибиотиков аи-трацкюшческого* ряда, являющихся индукторами свободнорадикальных процессов, приводит к подавлению токсических эффектов экзотоксина токсического аока S. aureus.
Научно - теоретическая и практическая значимость работы за-
ключается в.экспериментальном подтверждении существующих в-лите
ратуре предположений о значительной роли процессов свободноради-
кального окисления, в том числе ПОЛ, в реализации некоторых ток
сических эффектов бактериальных токсинов и, в частности, экзото
ксина" токсического шока S. aureus. . .
* Представляют'теоретический'интерес результаты изучения вли
яния ЭШ на функциональную активность полиморфноядерных лейкоци
тов, свидетельствующие о подавляющем его действии на образование
важнейших биоцидных продуктов фагоцитов - активных форм кислоро-
да вследствие ингибируквдего воздействия на естественные механиз
мы регуляции функционального состояния клеток и позволяющие рас
сматривать с новых позиций возможные механизмы патогенетического
действия бактериальных энтеротоксинов. '
Получены данные, позволяющие рекомендовать применение некоторых лекарственных средств, обладающих прооксидантным действием (в частности, антрациклических антибиотиков), для коррекции воз- * никающих при синдроме токсического шока патологических изменений з функциональном состоянии органов и систем больного.
В ходе' работы продемонстрирована возможность применения хе-милюминесцентного метода исследования для оценки активности бактериальных экзотоксинов, проведено сравнительное изучение эффективности предлагаемого метода-и обычных методов определения, ос- . нованньос на использовании биологических моделей.
Апробация работы. ' .'. '
Основные положения работы доложены на заседании Ростовского
отделения Российского биохимического общества (Ростов"н/Д, 1992)'
и научной конференции "День науки" студентов, молодых учёных и
специалистов РОДНШ (Ростов н/Д,' 1992). . '
. Публикация материалов исследования.
По теме диссертации опубликовано 4 научных работы, из них 1 в зарубежной печати. '
Структура и объем работы. ..!.-..,