Введение к работе
- З -
Актуальность течи. Проблема старения клонов вегетативно разг*-нокающихся растений является одной из фундаментальных проблем в биологии развития. Явление клонового старения описано рядом исследователей ( Кренке, 1940; Trlppl, 1960. 1S73; Sax 196? Ефепкин 1970; Трикклер. 1972). Однако, до сих гор не? единой точки зрения на возможные причины этого явления. Сложность проблемы заключается в многообразии взаимосвязанных и взаимообусловленных процессов, составляющих сущность старения.
Изучение Фазовых переходов затруднено тага» из-эа отсутствия надежных морфологических и физиологических критериев, позволяющих четко разделять ювенильную и зрелую фазы развития. В связи с этим, большой интерес представляет поиск белков, специфичных для определенной возрастной фазы . Наличие таких фазоспецифичных белков позволит использовать их в качестве биохимического критерия оценки возрастного состояния растения при отсутствии или неоднозначности морфологичесіаїх и физиологических признаков.
В качестве одного из подходов к решению.вопроса о старении и выровдении клонов шлет быть с успехом ИСП0ЛЬ80ВЭЛ ые-тод ыикроклоналъного разшюиения растений. При выращивании (слонов в культуре і п. vitro появляется возможность, моделировать условия культивирования ускоряющие или. наоборот, замедляющие процессы старения. Однако, о возрастных изменениях клонов in vitro на сегодняшний день известно очень немного, причем данные достаточно противоречивы.
Цэхь н задачи 'пссжедрваяиа. Целью наших исследований являлось изучение морфологических и биохимических различий между двумя возрастными фазами развития плюща обыкновенного in vivo и при культивировании in vitro и поиск биохимических маркеров, адекватно характеризующих возрастные фазы этого растения.
Для достижения цели исследований в работе были поставлены следующие задачи: получить In vitro клоны побегов плюща обыкновенного из меристем ювенильных и зрелых побегов; получить антисыворотки к белкам меристем ювенильных и 8ре.лых по-
- 4 -бегов; провести ишунохиыическое сравнение различных органов у ювенильных и зрелых побегов плюща; провести сравнение профилей белков, полученных от побегов и каллусов ювенильных, реювенильных и врелых клонов с целью выявления белковых маркеров возрастных фае in vivo и in vitro; провести сравнение гормонального баланса побегов плюща двух возрастных фаз с целью возможного выявления связи между возрастной фазой и количественным содержанием эндогенных фитогорыонов;
Научная новизна Впервые изучены профили белков тканей двух возрастных клонов плюша обыкновенного, культивируемых in vitro. Показаны количественные различия между ними в содержании отдельных белков. Впервые в динамике изучены изменения в белковом составе, происходящие при дедифференциации тканей различных возрастных фаз. Показано наличие каллусоспецифичных белкоп. Впервые изучено содержание цитокининов в тканях плюща обыкновенного двух возрастных фаг. Показано, что-меристемы, ювенильного растения содержат более высокий уровень цитокининов по сравнению с меристемами зрелого растения.
Теоретическое Бначекие. В работе удалось показать наличие в тканях плюща обыкновенного "ювенильного" белка, который может быть использован в качестве маркера фазоспецифичности. Обнаружение данного белка в растениях in vitro и в каллусах является одним из подтверждений предпрлоаения о происходящем в культуре in vitro процесса омоложения. Наблюдаемые различия в содержании эндогенных цитокининов между ювенильными и зрелыми растениями, подтверждают предположение о взаимосвязи между возрастными изменениями и внутренним гормональным балансом раатении.
Публикации и апробация работы. Со материалам диссертации опубликовано 7 работ. Результаты диссертационной работы представлялись на Шшле по физиологии растений (Пушино, 1990), на втором Всесоюзном съезде общества физиологов растений (Ыинск, 1991), на третьем съевду Всероссийского общества Физиологов растений (Санкт-Петербург, 1993) и на второй Международной конференции "Биология культивируемых клеток растений и биотехнология" (Адматы, 1993).
Структура диссертации. Работа изложена на -iSo страницах
ьшнописного текста, содержит 6 таблиц, ЗО рисунков и состоит из введения, 3-х глав, выводов и приложения. Список использованной литературы включает 2ІІ источник отечественной и зарубежной литературы.
