Введение к работе
Актуальность исследования. На современном этапе развития эстетической дерматологии все большее внимание уделяется разработке новых методов лечения дефектов кожи с применением высокоточных наукоемких технологий (Самнов А В с соавт , 2001, Кубанова А А , 2004, Alster Т S , Lupton J R, 2002) Одні- м из наиболее перспективных направлений аппаратной дерматокосметологии в настоящее время является использование лазеров (Кубанова А А , 2000, Верарди С , 2003, Goyal S et al, 1995, Hruza GJ, 1996) Уникальные свойства лазерного излучения позволяют проводить эксфолиацию поврежденного эпидермиса с высокой степенью контроля, что положительно сказывается на косметическом результате (Ос.ерская О С , 2001, Антонова Л Е , Шутенко Т В , 2002, Wheeland R G , 1998) Тем не менее, несмотря на широкое использование лазерной технологии дія устранения врожденных или приобретенных дефектов кожи, методы восстановительного лечения пациентов и способы профилактики осложнений после лазерной дермабразии далеки от соверыенства (Данилин Н А , Доронин В А , 2002, ЛючиА,2003^о8зЕУ «t al 1999)
Вмешательство лазерным инструментом сопряжено с повреждением структурных элементов кожи влекущим за собой интенсивную тканевую экссудативно-воспалительную реакцию, при которой темпы заживления зоны абляции могут ощутимо замедлялся (Неворотин АИ, 2000, Khatri К А, 2003, Roy D, 2005) Нередким исходом лазерной эксфолиации являются инфекционные осложнения (бактериальные, вирусные, грибковые), формирование рубцов, поствоспалительная гиперпигментация (Глубокова И Б, 2002, Гулев В С с соавт, 2002, Шутенко Т В , 2004, Manuskiatti W, 1999) В связи с этим, послеоперационный уход за пациентами после лазерного обновления кожи должен быть сфокусирован на снижении выраженности экссудации отека, образования корок, более раннем восстановлении эпицермиса (Варава М, 2005, Papadavid Е, Katsambas А , 2003)
В течение последних десятилетий в дерматокосметологической практике для этих целей используются различные препараты для местного лечения ран многокомпонентные мази, гидрогели, спреи, полупроницаемые пленки, композитные синтетические и биологические раневые покрытия (Жигульцэва ТИ, 1998, Christian MM et al, 2000, Onouye T et al, 2000) Вместе с тем, проблема создания раневой повязки, способной обеспечить полноценную эпителизацию после дермабразии, остается нерешенной Давно устарела используемая до настоящего
времени методика эпителизации раневой поверхности под струпом (Жигульцова Т И , Паркаева Л В , 2000)
Перспективным направлением в разработке принципиально новых биологически активных раневых покрытий при поверхностной и глубокой лазерной дермабразии, представляется апробация метода трансплантации аутологичных и аллогенных культур клеток кожи (кератиноцитов, фибробласгов) (Блинова МИ с соавт, 2004, Глинских НП, 2004, Слипченко И О с соавт , 2004, El Ghalbzouri A et al, 2004) Данный метод в настоящее время успешно используется в лечении обширных ожогов и других поражений кожного покрова (Глущенко ЕВ с соавт, 1993, Воздвиженский СИ с соавт 1996, Малахов СФ с соавт, 1997, Парамонов Б А с соавг, 2000) Культивированные фибробласты оказывают выраженное ранозаживляющее действие путем продуцирования щпокинов, а также большего числа факторов роста и макромолекул внеклеточного матрикса (Косоа И С, 1994, Жилина НМ с соавт, 1997, Sandulache V С et al, 2005) Трансплантация культивированных кератиноцитов способствует своевременной защите и формированию эпидермиса (Малахов С Ф с соавт , 1993, Озерская О С , 2001, Shelton J , 2001, Bogaeidt A J et al, 2004) Есть основания полагать, что использование культур клеток кожи на раневых покрытиях, а также в составе «дермального эквивалента» может обеспечить благоприятное течение восстановительных процессов в зоне лазерной дермабразии
Цель исследования Определить эффективность трансплантации культивированных кератиноцитов и фибробластов в программах косметической коррекции кожных дефектов после лазерной дермабразии
Задачи исследования,
Оценить течение раневого процесса при трансплантации пациентам монослоя культивированных аутологичных кератиноцитов после лазерной дермабразии рубцов и татуировок
Изучить течение раневого процесса при трансплантации пациентам монослоя культивированных аллогенных фибробластов человека после лазерной дермабразии лица и татуировок
Определить сроки и эффективность трансплантации монослойной культуры клеток кожи на раневом покрытии в зависимости от площади и _ глубины лазерной дермабразии
Исследовать динамику активности провоспалительных цитокинов и интерферонов в раневом экссудате при пересадке культивированных аллофибробластов на лазерную рану
5 Оценить эстетический результат поверхностной и глубокой
лазерной дермабразии при аппликации кутьтивированных
аллофибробластов человека в составе «дермального эквивалента»
Научная новизна. Изучены особенности течения раневого процесса при аппликации на лазерную рану монослоя аутокератиноцитов и аллофибробластов на раневом покрытии Выявлено негативное влияние раневой экссудации на плотность прилегания клеточного монослоч к раневой поверхности кожи после лазерной дермабразии Определены сроки пересадки на раневом покрытии культивированных клеток кожи в зависимости о г глубины лазерной дермабразии
Установлена эффективность трансплантации культивированных аутологичных кератиноцитов и аллогенных фибробластов для коррекции кожного покрова после лазерной дермабразии различных косметических дефектов кожи лица и тела (рубцовые деформации, возрастные изменения, любительские татуировки) Показано сокращение продолжительности на 3-4 суток раневой воспалительной реакции, более раннее созревание грануляционной ткани, ускорение на 4-5 суток эпителизации зоны лазерной дермабразии, преимущественное формирование эластичных нормотрофических рубцов по сравнению с традиционным мазевым методом
Получены данные о способности культивированных
аллофибробластов стимулировать локальную продукцию
провоспалительных цитокинов и интерферонов, активировать приток в лазерную рану макрофагов и фибробластов, обусловливая усиление процессов репаративной регенерации, а также снижение числа инфекционных осложнений
Научно обоснована целесообразность включения в схему восстановительного лечения повреждений кожи после поверхностной и глубокой лазерной дермабразии культивированных аллогенных фибробластов в составе «дермального эквивалента»
Практическая значимость. Обоснованы показания к применению культивированных аутокератиноцитов и аллофибробластов в целях коррекции косметических дефектов кожи лица и тела после лазерной дермабразии
Установлены сроки трансплантации монослойной культуры клеток кожи на раневом покрытии в зависимости от глубины лазерной дермабразии При поверхностной дермабразии положительные результаты достигаются пересадкой клеточных культур непосредственно после лазерной абляции В случае лечения глубоких лазерных ран пересадку
клеточного трансплантата на ргневом покрытии требуется проводить в ранний период фазы регенерации (не ранее 3 суток после операции)
Культивированные аллофибробласты человека на раневом покрытии и в составе «дермального эквивалента» могут быть рекомендованы для клинического применения в качестве перспективных способов восстановления структуры кожи после лазерной дермабразии рубцовых деформаций, татуировок, возрастных изменений кожи
Личное участие автора в получении результатов. Автором лично выполнен весь объем клинических наблюдений, проведены все процедуры лазерной дермабразии у пациентов с разтичными косметическими дефектами кожи, самостоятельно выполнены планиметрические и цитологические исследования, организованы работы с культурами клеток, лабораторные иммунологичесрие исследования, лично проведено формирование первичной базы данных и ее статистический анализ Основные положения, выносимые на зашиту
Трансплантация культивированные ауюлогичных кератиноцитов и аллогенных фибробластов ускоряет заживление поверхностных и глубоких лазерных ран, обеспечивает более эффективное восстановление кожного покрова после лазерной дермабразии рубцов и татуировок по сравнению с традиционным мазезым методом
Пересадка культивированных аллофибробластов после лазерной дермабразии лица стимутирует регенерацию эпидермиса, индуцирует локальный синтез провоспалнгельных цитокинов и интерферонов, способствуя сокращению п эодолжите тьности фазы воспаления, ускорению эпигелизации бе; развития местных инфекционных осложнений
3 Трансплантация «дермального эквивалента» стимулирует
регенерацию поврежденных тканей, сокращает продолжительность
заживления поверхностных и глубоких лазерных ран без образования
выраженных рубцовых изменений, позволяет разместить жизнеспособные
клетки кожи человека и элементы внеклеточного магрикса на раневую
поверхность любой формы и локализации
Реализация и внедрение результатов работы. Результаты работы апробированы и внедрены в лечебную практику Клиники лечебной косметологии ООО «Меди эстетическая медицина» (Санкт-Петербург) Материалы диссертации используются в учебном и течебном процессах кафедры дерматовенерологии СПбГМУ им акад И П Павлова
Апробация и публикация материалов исследования. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на XII Российском
национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005 г), научно-практической конференции «Здоровье женщины Вопросы профилактики и оздоровления» (Санкт-Петербург, 2005 і), 59-й итоювой научной конференции молодых ученых Ростовского Государственного медицинского университета (г Ростов-на-Дону, 2005 г), V Международном симпозиуме по эстетической медицине (Москва, 2006 г)
По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, в том числе 1 статья - в журнале по перечно ВАК Минобразования РФ
Структура н объем диссертации. Работа изложена на 194 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы Диссертация иллюстрирована 10 таблицами, 21 рисунком Список литературы содержит 348 источников, из них 168 отечественных и 180 иностранных авторов
