Введение к работе
Актуальность темы. Образование цитоплазматических пространств, окруженных мембраной и содержащих различные группы оргаиелл, отмечено дод влиянием ряда условий /Матиенкр, Елисеев, Кротов, 1975; Саляев, 'Черныаов, 1978/ и широко используется .для конструирования клеток из фрагментов /Зеленин, Кущ, Прудовский, 1982/, Универсальность этого явления позволяла причислить .пробную целостность к основным модусам цитогепеза /Матиенко, 1969/, настоятельно выдвигая необходимость изучения свойств субклеточных блоков.
Диагностика состояния фрагментов клеток требует выявления сохранившиеся функций и структур. Успех во многом предопределяется правильностью подбора модельного объекта и возможностью использовать максимальное число методик исследования. Этим условиям в большей мере соответствуют изолированные протопласты клеток растений, которые широко используются для физиологических /Еутенко, 1981/ и молекулярных исследований /Тарчевский, Марченко, 1985/. В то же время морфодинамила изолированных протопластов остается малоизученной, хотя феноменология, спектры форм и динамичность их смены, сопутствующие мм надмолекулярные перемещения весьма детально описаны на модельных объектах животного происхоадения /Ровенский, 1979; Васильев, Гельадд, 1981/.
Цель и зтдтщ исследований. Целью работы явилось выявление шрфодин.'г.аши изолированных протопластов клеток основной паренхимы в ходе реакций на воздействия некоторых физических л химических факторов .для определения возможности применения изолированных фрагментов ююток растений в качестве
модели при морфологических исследованиях проявлений .дробной целостности в клеточной организации. Задачи исследований:
- Визуализация форм и микрорельефов протопластов в ходе ферментативного выделения и при детергентном изолировании.
Морфологический анализ реакций изолированных протопластов на воздействия физических /центрифугирование, замораживание-оттаивание/ и химических /хелаторы, многоатомные спирты/ факторов.
Ультраструктурный анализ фибриллярных структур цитоплазмы.
Научная новизна и практическое значение работы. Показана возможность использования изолированных протопластов клеток основной паренхимы в качестве модели для исследования морфодинамических реакций 'фрагментов растительных клеток. Выявлена последовательность модификаций формы и микрорельефа в ходе ферментативного выделения. Пополнена иконотека хореографии изолированных цротопластов при воздействиях некоторых физических и химических факторов. Проведен систематический анализ ультраструктуры фибриллярных компонентов цитоплазмы изолированных протопластов клеток основной паренхимы с применением ряда модификаций методик стабилизации и визуализации.
Подтверждена цитоплазматаческая локализация формообразующих элементов я расширены представления о морфодинамических потенциях изолированных протопластов клеток основной паренхимы. Показано, что разнообразие фибриллярных структур цитоплазмы изолированных протопластов клеток основной паренхимы трудно укладывается в существувдие классификации органелл.
з Предложена рабочая гипотеза, объясняющая морфодинамическяе реакции направленностью молекулярных перемещений на .постижение состояния наибольшей иммобилизации фибриллоформерннх компонентов цитоплазмы.
Результаты исследований используются при оценке состояния изолированных протопластов в генно-инженерных и бис— технологических процессах, а также в качестве фактических материалов при чтении курса цитологии.
Публикации. Материалы диссертации изложены в 7 опубликованных работах, вт. ч. в ввде раздела коллективной монографии.
Апробация работы. Основные результаты работы были до
ложены на УШ Европейском конгрессе по электронной микроско
пии /Будапешт, 1984/, УІ Всесоюзном симпозиуме по ультраст
руктуре растении /Чернигов, 1988/, ІУ РеспубликанскЗй' кон
ференции по электронной микроскопии /Кишинев, 1990/.
Структура л объем работы. Диссертация состоит из введения,
четырех гл«а специального текста, заключения, выводов и спи
ска литературы, использованной автором. Основное содержание
излечено на страницах машинописного текста. Диссертация
лллюстрировача 55 электронномикроскопическими фотографиями. В списка литературы указаны 193 источника.