Введение к работе
Актуальность проблемы. В последние годы возрастает частота заболеваемости гепатитом различной этиологии (вирусный гепатит, алкогольное и лекарственное поражение печени) (Онищенко Г.Г., Шахгильдян И.В., 1987; Серов В.В. и соавт., 2004). Вопросы патогенеза гепатитов различной этиологии изучены недостаточно. По данным литературы поражение печени может быть обусловлено прямым гепатотоксическим, опосредованным вирусами цитолитическим, иммунологическими механизмами (Серов В.В. и соавт., 2004). В последние годы, в связи с разработкой методов иммуномодулирующей терапии, наибольшее внимание привлекают иммунологические механизмы повреждения печени Основная роль в иммунологических механизмах повреждения печени принадлежит клеточным иммунологическим реакциям, опосредованным НК-клетками (натуральные киллеры) и, выделенным в самостоятельную субпопуляцию Т-лимфоцитов НКТ-кпеткам (натуральные киллеры - Т-клетки) и цитокинам (Batey R., Cao Q., Gould В., 2002; Saito Т. et al., 2004; Sun R.etal., 2004).
Для выяснения роли клеточных иммунологических механизмов в развитии патологических процессов в печени на современном этапе наиболее адекватной моделью является модель Кон А-индуцированного гепатита (Tiegs G. et al., 1992; Nicoletti F. et al., 1997). В развитии индуцированного Кон А гепатита важную роль играет активация клеточного звена иммунитета и продукция цитокинов' фактора некроза опухоли (ФНО)-а, интерлейкина (ИЛ)-2 и интерферона (ИФН)-у, ИЛ-4 и ИЛ-10 (Kato М. et al., 2001; Tsutsui Н. et al., 2003; Yamanaka A. et al, 2004; Ma X. et al., 2004).
Для понимания иммунологических механизмов Кон А-индуцированного
гепатита необходимо изучение действия Кон А в системе in vivo на
различные звенья иммунитета, патоморфологических особенностей
действия этого лектина на органы иммунной системы и печени. Несмотря на
почти тридцатилетнюю историю изучения этого митогена,
3 рос. и5 ;и'.'-і'.„-[.:пя
2аа^?к
морфологические изменения органов иммунной системы при воздействии Кон A in vivo описаны фрагментарно (Okamoto Т. et al., 1998; Ksontini R et al., 1998). . Это, по-видимому, связано с тем, что Кон А, являясь мощным "пан-Т-клеточным митогеном", активно изучался преимущественно в иммунологическом аспекте. Большинство работ, связанных с анализом функциональных изменений иммунной системы при Кон А-индуцированном гепатите, посвящены главным образом цитокиновому каскаду (Tsutsui Н et al, 2003; Yamanaka A. et al, 2004; Ma X et al., 2004), характеристике иммунокомпетентных клеток по кластерам дифференцировки, т е CD-маркерам клеточной поверхности (Batey R , Cao Q , Gould В , 2002; Saito Т et al., 2004; Sun R. et al., 2004) и молекулярным механизмам повреждения гепатоцитов (Okamoto Т., 2000). Оценка таких функциональных параметров иммунной системы, как спонтанная и индуцированная пролиферативная активность лимфоцитов, способность к генерированию цитотоксического и супрессорного ответа, на модели экспериментального Кон А-индуцированного гепатита не проводилась В литературе существуют лишь единичные данные о структурных изменениях печени при действии Кон А Эти разрозненные результаты не дают представления о динамике процессов, протекающих в печени и органах иммунной системы при экспериментальном гепатите (Ksontini R. et al., 1998; Tiegs G. et al. 1992; Hentze H. et al, 2000; Santucci L. et al. 2000). Гистологическое исследование печени мышей C57BL/6 через 1 сутки после однократного введения Кон А выявило мелкие фокальные зоны некроза с умеренной воспалительной инфильтрацией портальных зон. В селезенке Кон А индуцировал геморрагический некроз и реактивное развитие герминативные центров (Okamoto Т et al., 1998; Ksontini R. et al., 1998). Таким образом, динамика изменений печени, тимусе и селезенки при Кон-индуцированном гепатите не изучена.
Исходя из этого, мы сочли необходимым детально изучить в динамике морфологические изменения в печени, селезенке и тимусе и сопоставить их с
динамикой развития иммунологических реакций при Кон А-индуцированном гепатите.
Цель исследования Изучить морфофункциональные изменения иммунной системы в динамике при экспериментальном Кон А-индуцированного гепатите.
Научная новизна Впервые охарактеризована динамика морфологических изменений в печени и органах иммунной системы при Кон А-индуцированном гепатите.
Впервые данные морфологического исследования органов мишеней соотнесены с результатами функциональных тестов в процессе развития экспериментального кон А-индуцированного гепатита
При анализе динамики Кон А-индуцированного гепатита показано, что в течение первых трех суток происходит нарастание дистрофических и некротических изменений в печени, сопровождаемых развитием геморрагических некрозов селезенки.
В динамике Кон А-индуцированного гепатита в первые трое суток функциональная пролиферативная и цитотоксическая активность лимфоцитов возрастает, что сочетается с прогрессированием альтеративных (дистрофических и некротических) изменений в печени.
В тимусе при Кон А-индуцированном гепатите развивается и прогрессирующе нарастают морфологические проявления акцидентапьной инволюции.
В селезенке в 1-е сутки отмечается опустошение Т-зон, что, по-видимому, обусловлено миграцией активированных лимфоцитов в барьерные ткани В последующие сроки на фоне нормализации пролиферативной активности лимфоцитов отмечается восстановление и гиперплазия Т- и В-зон селезенки
Практическое значение работы. Полученные в работе данные о динамике морфологических изменений иммунной системы при индуцированном Кон А гепатите могут быть использованы для доклинической оценки
иммуномодулирующих и гепатопропротекторных фармакологических препаратов.
Данные о высоком пролиферативном ответе клеток селезёнки, через 1 сутки после введения 10 мг/кг Кон А, позволяют рекомендовать использование этих клеток в тест- системе для определения активности ИЛ-2, т к этот тест по сравнению со стандартным является менее трудоемким и более информативным.
Апробация работы Основные положения работы доложены и обсуждены на научной конференции ГУ НИИ морфологии человека РАМН "Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии" (Москва, 2003, 2004 гг), межлабораторной конференции ГУ НИИ морфологии человека РАМН (Москва, 2004 г.).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 печатные работы
Структура и объём работы. Диссертация изложена на страницах
машинописного текста, состоит из введения, глав обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов собственных исследований, выводов и списка литературы иллюстрирована 25 рисунками, 1 таблицей Библиография включает 19 отечественных и 90 зарубежных источников
