Введение к работе
SMSM!ulu2IkJiE5SSEMb Социально-экономические преобразования, которые происходят в нашем- аграрпо-промншленном комплек -со, создай? условия для развития частного зшютноволства, фор -мерства я других структур падения хозяйства, направленных па обеспечение населення высококачественншн продуктами яжвотного происхождения, а проАшшленнооти - снрье'м,
В атой связи важное значение приобретает индпвндуалышй подход к лсивотнкм в вопросах диагностики, лечения п профилактики заболевали!, в т.ч. незаразной этиологии.
Изучению болезней печени у крупного рогатого скота посвящено много работ /В.С.Постников, 1S63, 1968, 1972, 1982, 1988; А.Г.Савойскяй, 1965, 1968, 1982; Б.В.Уша, 1965, I9G9, 1974,1979; А.В.Зароз, 1975, 1983; Д.Я.Луцкий, 1970, 1974 и др./, в которых раскрыты вопросы агиологии, патогенеза, диагностики и профилактики гепатодистрофии у високопродуктивних животных.
Взаимоотношения между гепатобшгаарной п иымуной пистемамн организма сложны л многообразны. Печень пришшает участие в фагоцитозе, инактивации чужеродных агентов, элиминации иммунных комплексов и др. Естественно, что поралеиил печени различной этиологии сопровождаются изменениями функциональной активности иммунной системы, в т.ч. факторов естественной резистентности /А.Ф.Елюгер, Х.М.Векелер, 1982; В.А.Джалалова, 1985; И.Н.Алек- ' сеев, Т.М.Брнзгина, 1987 и др./. Следовательно, изучение .показателей естественной резистентпости при гепатозе коров позволя-ет составить представление о характере фукциопалышх нарушений в печени, судить об активности процесса, его динамике, прогнозе,
В настоящее время предложено большое количество фармакологи"- * ческих и других средств для профилактики и лечения заболеваний нечени. Однако, большинство из них требуют значительных материальных затрат к длительного срока применения. Метод рефлексотерапии, один из самых физиологичных методов стимуляции организма, позволяет получить выраженный терапевтический г#ект даже в тех случаях, когда обычные медикаментозные и физиотерапевтические процедуры не дают сколько-нибудь значительного результата. Э.Д. і Тнкочкнская, 1962; Д.М.Табеева, А.И.Абдуллова, 1903; Е.В.Боико, [ 1965 и др./.
Это позволяет сократить сроки лечения, снизить расход лекарсї*-венных препаратов, а следовательно, и их токсическое влияние на организм в целом,
Цель и задачи нсследокзнкй. Цель нашей работы заключалась в изучении механизмов нарушения звеньев неспецифической резистентности при гепатозе коров и влияния па них злектропунктурного воздействия, одного из методов рефлексотерапии.
Для достижения данной пели были составлены следующие задачи:
-
Изучить клшшкс-иммунологический статус коров при гепатозе.
-
Изучить влияние электропунктуры на клинпко-гематологичес-кие п биохимические показатели к на активность факторов естественной резистентности здоровых коров.
-
«лучить блчярис электропунктуры на клинико-ишунологкчес-кий ста :ус коров, болъннх гепатозом.
Научная кодизнз. Впервые в условиях животноводческого комплекса разработан я внедрен метод диагностики функционального состояния нечеки крупного рогатого скота основанный на исследовании активность органоспецифаческого фермента печени - уроканкназы /у рока на г гпдрагаза "АФ 4.2.1.49/.
Впервые проведено комплексное изучение клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности организма при гепатозе коров.
Впервые изучено влияние метода электропунктуры на клиняко-пшунологичес'кий статус больных гепатозом коров.
Научно-практическое значение. Полученные данные расширяют пред сгавление о патогенезе гелатоза коров и позволяют прогнозировать развитии и исход болезни. Рекомендуемые метода делают возможным определение характера и глубины изменений іслишшо-иммунологичєс-кого отатуса при гепатозе коров. Определение активности фермента урокапинази в сыворотке крови больных животных открываетъно-вне еозмоеносги в ранней диагностике заболеваний печени. Применение ялектропунктуры для коррекции вторичного иммунодефяцитного состояния у животных позволяет расширит» представление о механизмах рефлекторного воздействия.
На, защиту выносятся следующие положения: I. Клинико-идаунологичеокий статус здоровых и больных гепа-тозом коров;
2, іі.і;ішїігї'"з улелгрс-пункт'/рч на їгл^'Н^сО'-гочатологіїчсо.'о..':5 п oil-
охимические пока за тел**, кроси здоровых її больных гепатозом коров;
3. Влияние электропунктури на активность факторов Естествен
ной резистентности здорових и больных животных.
ДіШбіШИЯ» Материалу диссертационной работы обсуждались на заседании кафедри клинической диагностик:; и болезней молодняка Московской ветеринаркой академии и Совете молодых учёных МЗА /196Э-1992/, на отчетной конференции MBA /1990/, на конференции молодых учених ВИЗВ /1991/.
Публикация работ..По материалам диссертации опубликовано две статьи»
0іШЖЛЗ^~9іЬ^І-Ш^2^Л' Диссертация состоит из введет:.."!,. обзора литературы, собственных исследований, обсуждения резуль-татовисследований, выводов,сведений о практическом использова-ипп полученных научных результатов, рекомендаций по использованию научных выводов, списка литература и приложения;
Работа изложена на 154 страницах машинописного текста, иллэс-трнрована 6 фотографиями, II графиками, 21 таблицей. Список литературы вклвчает 235 источников, из них 53 иностранных авторов.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛШ.0ВА1ЖЯ 2.1. Материалы и методы
Экспериментальная часть работы выполнена в 1990-1992 гг на кафедре клинической диагностике и болезней молодняка Московской ветеринарной академии, фэрмепгологяческяе исследования проводились на кафедре биохимии ММА, гистоморфологическпе исследования - на кафедре патологической анатомии а физиологии МВА.
Для проведения опыта использовали коров черно-пестрой порода в возрасте 4-6 лет, молочной продуктивностью 5,5-6,0 тыс. яг молока в год по предыдущей лактации, в первой половиш стельности,
диагностику гепатоза осуществляла клиническими, биохдмячес-кеми исслвдопзнпями і-рови и с выборочным изучением биопснйного материала г:;с голсгкюскк.
Для проведения ^епорим^лта животных разделила на две группы: первая группа - контрольная / клинически здоровые хявопшо/, вторая - опытная /коровы, больные гепатозом/. F^oia проводалаоь в два атапа: первый итэп- изучение клянико-и.илунологі<їесйого..
статуса здоровых к болънкх животных; второй этап - изучение влияния олектрспункгури ію глш-шко-гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели здоровых :: сольных гепатозом' коров. На втором зтаяе б качестве контроля использовали показатели исходного урові'я клинически здоровых коров,
Элоктропунктурное воздействие осуществляли прибором ПЭРТ-4\М> изготовленным Укр.ИЖ разведения и искусственного осеменения,' Воздействие проводилось на 5 биологически активных точек /БАЇ/,-соответствующих печени, два раза в пять дней постоянным импулй-опшл током силой 150 мхА, напряжением 9 В, продолжительностью от 4 до 6 минут /Методика электродиагностики заболеваний пече-ни крупного рогатого скота :Метод.указ..-.'Л.:;-,1ЕЛ, 1989.16 с'.-?' Насибов Ф.К,,1989/.
Динамику влияния электропунктуры на клинщю-шлыунологйчШк'М стьтус здоровых и больных коров изучали в следующие сроки* через 3 ч поело первого воздействия, через I, 3, 5, 7, 15/ 30 й 60 сут„ эксперимента.
Биохимические показатели определяли в цельной крови к ее' сыворотке. 3 крови определяли: количество зрктроцктов к лейкоцитов в камере Горяева, гемоглобин - гемоглобинцианидным методом, лейкограмму выводили трёхпольным методом /по Филилчекко/ на мазках крови, скрашенных по Романовскому-Гпмза /Кондрахии И,Г1,, и др., 1985/, глюкозу - по цветной реакция с орто-толуидином. В сыворотке крови определяли: количество общего белка рефрактометрическим методом, белковые фракции - турбидиметрияееким методом, общий билирубин по методу йендрапика, Клеггорна и Грофэ, активность амінотрансфераз по методу Рейтмаиа к Френкеля /1957/* Проводили коллоидно-осадочные пробы с сульфатом меди и с 0,1 раствором сулеш. /Кондрахии К.П. и др. ,1985/. Исследовали активность оргакоспоцифических ферментов - сорбитолдегидрогеназы методом Севела и Товарек /1965/ и уроканиназы по методу Табор и Иехлер в модификации В.А.Буробкна /1968/.
Для определения иммунного стаїуса животных исследовали:
абсолютов и относительное количества Т-лимфоштов в периферической крови методом Т-розаткообразования лимфоцитов с эритроцитам барака /А.Ьс'/г ,IS5B;M.Jcndo,t et.al. 1972; В.И.Тамошгонас и др.,1975/,
абсолютное и относительное количество В-КЛ9Т0К периферической крови ывтодоа В-розегкообразования лимфоцитов с эритроцитами барана, нагруженными антителами в комплементом /C-j/ /г Bianco 1970, В.К.Тншшзаас, I9SI/.
абсолютное и относительное количество "нулевых" клеток способом '- :> Ji-v -'-'.«(..; і\М;,к; J /1973/ и ft .jc-iclui ьі А. /1973/, согласно которому от общего количества лжфоцитов периферийной крови вычитали число Т- и Е-клстск;
фагоцитарную активность нейтрофилов кров;: мет-'-^м предложенным П.А.Емелъяненко с соавт./1980/, вклвчэкдкм :ределение про~ цента фагоцитоза, процента переваривания, фагоцитарного индекса, кроме того определяли фагоцитарную емкость /абсолютное содержание нейтрофилов, участвовавших в фагоцитозе в I л/ и абсо-литный фагоцитарный показатель, который является интегральной величиной, получаемой, в результате умножения фагоцитарного индекса на обшее количество нейтрофнлов віл крови /С.И.Плящен-ко, В.Т.Сидоров, 1979; Г.М.Соловьев и др.,1987/.
Гуморальные факторы естественной резистентности организма определяли методами, предложенными П.А.Емелъяненко а соавт. /I960/:
-содержание иммун ^глобулинов С,М, А в сыворотке крови методом радиальной иммунодкффузии в агаровом геле; -активность лизоцима сыворотки кровз, основанному на способности лизоцима лизпроэать клеточные оболочки itUc Ьг-Ч'^еч-сЦ^ь взвешенные в агаре;
-бактерицидную активность сиворотки крови, основанному на изменении оптической плотности МПБ при росте э нём тест-микроба с добавлением и без добавления испытуемой сквороткл /в качество тест-микроба использовали суточную культуру S.coii0817/непато-гєннніі штамм/, выращенную на косом агаре и доведенному по стандарту мутности до концетрации 2,5 млрд. микробных тел в I мл.
Полученные результаты обрабатывали методом вариационной статистики по Г.Ф.Лакину /1980/.