Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время ассортимент лекарственных средств растительного происхождения в России составляет более 40%. Лекарственное растительное сырье (ЛРС), содержащее дубильные вещества широко применяется для получения лекарственных препаратов, обладающих вяжущим, кровоостанавливающим, противовоспалительным действием. Эта группа растительного сырья включена в ГФ XI, ГОСТы, ФС.
Измельченное ЛРС, содержащее дубильные вещества, отпускается из аптечных учреждений без рецепта для приготовления настоев и отваров в домашних условиях. ЛРС должно быть стандартизированным и соответствовать высоким нормам фармакопейных требований.
В Государственную Фармакопею ХI издания (ГФ ХI) включено 11 статей на ЛРС, содержащее дубильные вещества, а также общая фармакопейная статья «Определение содержания дубильных веществ в ЛРС», которые требуют совершенствования и гармонизации с международными фармакопейными требованиями.
Актуальным является разработка и совершенствование методик по идентификации ЛРС, в том числе измельченного и порошка, определения содержания действующих веществ; создание проектов современной нормативной документации на ЛРС, содержащее дубильные вещества.
Цель исследования. Проведение комплексных теоретических и экспериментальных исследований по стандартизации фармакопейного ЛРС, содержащего дубильные вещества.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
провести анализ требований отечественной и зарубежной нормативной документации и научных данных по стандартизации ЛРС, содержащего дубильные вещества;
изучить вариабельность диагностических признаков цельного, измельченного и порошка ЛРС с использованием микроскопического метода;
изучить спектральные и хроматографические характеристики ЛРС;
разработать характеристики подлинности ЛРС с использованием современных физико-химических и микроскопических методов анализа;
оптимизировать фармакопейные методики определения содержания дубильных веществ в ЛРС с использованием современных физико-химических методов анализа.
изучить возможность использования нового реактива осаждения для определения содержания дубильных веществ в ЛРС.
Научная новизна. На основании микроскопического анализа разных морфологических групп сырья, получены новые данные по вариабельности диагностических признаков при измельчении сырья, позволяющие идентифицировать порошки 9 видов ЛРС, содержащего дубильные вещества.
При сравнительном изучении диагностических признаков измельченного сырья корневищ бадана, змеевика, лапчатки, имеющих пучковый тип строения; корневищ (беспучковый тип строения) и корней (вторичное строение) кровохлебки, выявлены отличия в строении и размерах сосудов ксилемы, механических волокон (змеевик, лапчатка), особенностей формы и размеров кристаллических включений оксалата кальция.
Диагностическое значение в измельченном сырье коры дуба и калины имеют лубяные волокна и каменистые клетки.
Измельченное сырье плодов черники, черемухи, ольхи имеет характерные особенности в строении эпидермиса, каменистых клеток, формах кристаллических включений оксалата кальция.
Разработаны характеристики подлинности для 13 видов ЛРС на основе изучения морфолого-анатомических особенностей сырья и физико-химических свойств биологически-активных веществ (БАВ), содержащихся в ЛРС.
На основании изучения анатомического строения измельченного ЛРС различных морфологических групп предложены оптимальные условия пробоподготовки ЛРС для получения ИК- и КР-спектров. Впервые получены и описаны ИК- и КР-спектры 11 видов сырья и 8 стандартных образцов; подобраны оптимальные условия проведения тонкослойной хроматографии (ТСХ) для 11 видов сырья.
На основании результатов реакции взаимодействия 1% раствора коллагена с комплексом дубильных веществ, содержащихся в водных извлечениях 13 видов сырья, предложен способ определения содержания дубильных веществ в сырье, включенный в Патент, подтвержденный Заявкой на изобретение № 2010 141622 от 12.10.2010г.
Практическая значимость работы.
Полученные результаты по идентификации 11 видов ЛРС с использованием микроскопического и физико-химических методов предложены для включения в проекты фармакопейных статей.
Методика определения содержания суммы дубильных веществ, методом спектрофотометрии предложена для включения в проект ОФС «Определение содержания дубильных веществ в ЛРС».
Полученные данные микроскопического изучения измельченного сырья и ТСХ внедрены в учебный процесс на кафедре фармакогнозии Первого МГМУ им. И.М. Сеченова.
Основные положения, выдвигаемые на защиту. Вариабельность и сравнительное изучение диагностических признаков цельного, измельченного сырья и порошка ЛРС, содержащих дубильные вещества; ТСХ-характеристики, спектральные характеристики (ИК, КР) и обоснование оптимальных условий пробоподготовки ЛРС для их получения; результаты определения содержания дубильных веществ и отдельных компонентов в ЛРС методом спектрофотометрии и ВЭЖХ; совершенствование фармакопейной методики определения содержания дубильных веществ в ЛРС.
Апробация работы. Основные результаты работы доложены и обсуждены на Научно-практической конференции "Стандартизация готовых лекарственных средств"., Москва, 25.05.2010г.; Итоговой Всероссийской научной конференции молодых исследователей с международным участием "Татьянин день", Москва, 24–26.01.2011г.; ХХI Московской международной гомеопатической конференции "Развитие гомеопатического метода в современной медицине", Москва, 28–29.01.2011г.; Научно-методической конференции "Гаммермановские чтения", Санкт-петербург, 1–3.02.2011г.; Всеукраинской научно-практической конференции студентов и молодых ученых "Актуальные вопросы создания новых лекарственных средств", Харьков, Украина, 20–21.04.2011г.
Личный вклад автора. Вклад автора заключается в непосредственном участии на всех этапах исследования: от постановки задач, их экспериментально-теоретической реализации до обсуждения результатов в научных публикациях и докладах и их внедрения в практику. Автором лично проведена аналитическая и статистическая обработка и обобщение полученных результатов.
Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.02 – Фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты проведённого исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 5 и 6 паспорта фармацевтической химии, фармакогнозии.
Связь задач исследований с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в рамках отраслевой научно-исследовательской программы ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова «Разработка современных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским и фармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологических исследований» (№ государственной регистрации 012.20606352). Тема включена в план научных исследований кафедры фармакогнозии «Фармакогностическое изучение лекарственного растительного сырья, лекарственных сборов, лекарственных форм из сырья и разработка методов их стандартизации с учетом влияния антропогенных факторов, оценки качества и сертификации».
Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 работ, из них 3 в ведущих изданиях, входящих в перечень ВАК.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 165 страницах и содержит 34 таблицы, 78 рисунков.
