Введение к работе
з
Актуальность темы. Особый интерес представляют исследования по разработке способов изолирования лекарственных веществ из биообъектов и их качественное и количественное определение в лекарственных формах, что позволяет не только усовершенствовать и модифицировать известные методы анализа, но и предлагать новые подходы в решении обсуждаемых проблем. Эти исследования можно охарактеризовать как комплексное направление в практическом использовании в химических лабораториях, в технологических процессах и судебно-медицинской экспертизе.
В последнее время большое внимание уделяется лекарственным формам, обладающим, антиоксидантной активностью. К ним относятся современные новые лекарственные препараты дибунол и оксиметилурацил.
Высокая фармакологическая активность антиоксиданта дибунола (2, 6-дитретбутил-4-метилфенол) делает актуальными исследования, направленные на разработку новых лекарственных форм (таблетки, суппозитории, карандаши, овули), а также создает предпосылки для разработки современных методов анализа и изучения фармакологической активности, фармакокинетики, что позволит расширить область клинического применения данного антиоксиданта.
В лаборатории укрупненного синтеза и УНЦ РАН синтезирован стимулятор иммунитета - оксиметилурацил (5-гидрокси-6-метилурацил). Впервые его иммуномодулирующие свойства обнаружены Д.Н.Лазаревой, Е.К.Алехиным в начале 60-х годов.
Препарат успешно прошел две стадии клинической апробации в ведущих клиниках страны. На основании комплексных исследований Фармакологическим комитетом МЗ РФ утверждена ФСП 42-0415-2776-02 на субстанцию оксиметилурацила. В связи с этим представляются актуальными исследования по разработке новых методов изолирования оксиметилурацила из биообъектов, по разработке методов качественного и количественного определения оксиметилурацила из различных лекарственных форм (суппозиториев и мазей), по изучению фармако-кинетических параметров.
Расширение ассортимента методов анализа действующих веществ - дибунола и оксиметилурацила, изучение их фармакокинетики позволяют оценивать влияние фармацевтических факторов, и решать вопросы усовершенствования технологии различных лекарственных форм.
Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явились комплексные исследования по разработке методов анализа дибунола и оксиметилурацила в биологических объектах, изучение влияния фармацевтических факторов на высвобождение исследуемых соединений из лекарственных форм, а также изучение их фармакокинетических параметров.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
\s
Обосновать с помощью метода математического планирования эксперимента оптимальные условия экстракции дибунола из плазмы крови и разработать способ его количественного определения в биообъектах.
Определить время экстракции дибунола из биологических объектов в экспериментах на опытных животных.
Определить время достижения максимальной концентрации дибунола в плазме крови после введения перорально и ректально опытным животным. Установить наличие корреляционной связи в опытах in vitro и in vivo при различных способах введения.
Разработать методики качественного анализа дибунола в лекарственных формах.
Разработать способ определения концентрации оксиметилурацила в крови.
Изучить связывание оксиметилурацила с белками и эритроцитами крови.
Определить фармакокинетические параметры и предложить оптимальную схему приема оксиметилурацила.
Разработать методику изолирования оксиметилурацила из биообъектов и его количественного определения в опытах in vitro и in vivo при различных способах введения. Установить наличие корреляционной связи.
Научная новизна. Установлены оптимальные условия экстракции дибунола из плазмы опытных животных, выявлены оптимальные условия очистки экстракта методом ТСХ, с последующим спектрофотометрическим определением. Разработан способ количественного определения дибунола в биообъектах, и установлено время экстракции для каждого биообъекта. При пероральном и ректальном введении дибунола установлена его максимальная концентрация в плазме крови. Методами in vitro и in vivo установлена биодоступность таблеток и суппозиториев, расчитаны площади под фармакокинетическими кривыми.
С использованием ГХ/МС разработана методика обнаружения дибунола в лекарственных формах (суппозитории, овули, карандаши и таблетки).
Разработан способ изолирования оксиметилурацила из биологических объектов (кровь, сердце, почки, печень, кишечник, надпочечники, мышцы, мозговая ткань и раневой струп), с последующим качественным и количественным определением методом спектрофотометрии. Изучено связывание оксиметилурацила с белками и эритроцитами крови.
С помощью разработанного способа изолирования оксиметилурацила в крови и органах животных установлены основные фармакокинетические параметры: время и периоды полувсасывания, полураспределения и полувыведения, кажущийся и кинетические объемы распределения, общий клиренс, площадь под фармакокинетической кривой, а также время достижения максимальной концентрации. Рассчитана площадь под фармакокинетической кривой AUC, которая составляет 34Л,00± 8,05 мкг/мл. Предложена схема приема пероральных лекарственных
5 форм, содержащих оксиметилурацил. Препарат следует назначать 4 раза в день с временным интервалом 5 часов.
Практическая значимость. На основании проведенных комплексных исследований разработаны и внедрены:
Методические рекомендации «Изолирование, обнаружение и определение оксиметилура-цила в биологических объектах». Бюро судебно-медицинской экспертизы МЗ РБ.
Акт о внедрении результатов научно-исследовательской работы «Изолирование, обнаружение и определение оксиметилурацила в биологических объектах». ,Бюро судебно-медицинской экспертизы МЗ РБ.
Акт о внедрении «Средство для лечения заболеваний глаз с метронидазолом и оксиметилу-рацилом» №44-1/01 от 27.05.03. ГУ Всероссийский центр глазной и пластической хирургии.
Акт о внедрении «Средство для лечения заболеваний глаз с метронидазолом и оксиметилу-рацилом» от 23.05.2003. УФНИИ глазных болезней МЗ РФ.
Акт о внедрении «Стоматологический карандаш с дибунолом и экстрактом прополиса» от 19.12.2002. ООО «Космедент».
6. Акт о внедрении «Стоматологический карандаш с дибунолом и экстрактом прополиса» от
. 15.01.2003. Клиническая стоматологическая поликлиника БГМУ.
Положения, выносимые на защиту:
Принципы разработки методов анализа дибунола и оксиметилурацила.
Методы изолирования дибунола и оксиметилурацила из биообъектов, время и условия экстракции.
Методы качественного и количественного определения дибунола и оксиметилурацила в лекарственных формах (таблетки, суппозитории, овули, карандаши).
Результаты биофармацевтических исследований, фармакокинетические показатели как неотъемлемая часть фармацевтических факторов, влияющих на высвобождение дибунола и оксиметилурацила. .
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы обсуждались на научных конференциях студентов и молодых ученых БГМУ (Уфа, 1997, 2000, 2001, 2002), научной конференции (Пятигорск, 2004).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 печатных работ, из гегх 8 патентов и 1 рационализаторское предложение.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа вьтолнена в соответствии с планом НИР БГМУ по проблеме «Изыскание и изучение новых лекарственных средств» (№ гос. регистрации 01200507996).
Объем и структура диссертации.
