Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

«Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» Кожухарь Вячеслав Юрьевич

«Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность»
<
«Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность» «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность»
>

Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Кожухарь Вячеслав Юрьевич. «Синтез производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот на основе 3-имино-3Н-фуран-2-онов и их биологическая активность»: диссертация ... кандидата Фармацевтических наук: 14.04.02 / Кожухарь Вячеслав Юрьевич;[Место защиты: ФГБОУ высшего образования Самарский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России)], 2017

Содержание к диссертации

Введение

ГЛАВА 1. Синтез, строение, химические свойства и биологическая активность n-замещенных 2-амино-4 (гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных (литературный обзор) 14

1.1. Методы синтеза N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2 еновых кислот и их производных 15

1.1.1. Получение на основе 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных 15

1.1.2. Дециклизация 3-имино-3Н-фуран-2-онов под действием OH- и NH-нуклеофилов

1.2. Спектральные характеристики N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных 29

1.3. Химические свойства N-замещенных 2-амино-4-гет(арил)-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных

1.3.1. Гидролиз N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их эфиров 33

1.3.2. Взаимодействие N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных с галогенами и оксалилхлоридом 34

1.3.3. Синтез 3-имино-3Н-фуран-2-онов 37

1.4. Биологическая активность N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4 оксобут-2-еновых кислот и их производных 39

1.5. Заключение 45

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 46

2.1. Объекты исследования, аналитические методы, оборудование и реактивы 46

2.2. Исследование биологической активности 47

2.2.1. Метод определения острой токсичности 48

2.2.2. Метод определения анальгетической активности 49

2.2.3. Метод определения противовоспалительного действия 50

2.2.4. Метод определения гипогликемической активности 50

2.2.5. Метод определения влияния соединений на ориентировочно-исследовательское поведение животных при индуцированном сахарном диабете 51

2.2.6. Метод определения влияния веществ на фагоцитоз 51

2.2.7. Метод определения гемостатической активности 53

2.2.8. Метод определения противомикробной активности 53

2.2.9. Метод определения инсектицидного действия 53

2.3. Методы установления качества 2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)амида 2-(4-бромфениламино)-4-оксо-4-фенил-2-бутеновой кислоты и 4-(2,4-диметилфенил)-2-(4-метоксифениламино)-1-[пиперазин-1 ил]бут-2-ен-1,4-диона гидрохлорида 54

2.3.1. Установление подлинности 54

2.3.2. Определение чистоты 55

2.4. Методы статистической обработки данных 57

ГЛАВА 3. Обсуждение экспериментальных результатов 58

3.1. Постановка задачи 58

3.2. Компьютерное прогнозирование биологической активности 59

3.3. Получение 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот 60

3.4. Синтез 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов 64

3.5. Взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с одно-, двух- и трехатомными спиртами 67

3.6. Взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов

с алифатическими и ароматическими тиолами 74

3.7. Взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с гетероциклическими аминами и их производными 82

3.7.1. Реакции 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с 2-аминотиофенами Гевальда 82 3.7.2. Взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с 2-амино-1,3-тиазолом, 2-аминобензо[d]тиазолом, 2-амино-5-R-1,3,4-тиадиазолом 87

3.7.3. Реакции 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с 3-аминотиено[2,3b]пиридинами и 4-R-1,2,5-оксадиазол-3-аминами 3.8. Синтез 2-(4-ариламино)-1-[пиперазин(морфолин)-1-ил]-4-арилбут-2-ен-1,4-дионов 102

3.9. Получение 2-ариламино-1-(пиперазин-1-ил)-4-фенилбут-2-ен-1,4-диона гидрохлоридов 107

3.10. Взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с ароилгидразидами 110

ГЛАВА 4. Экспериментальная химическая часть 116

4.1. Методики синтеза полученных веществ 116

4.2. Методы определения подлинности и чистоты 2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)амида 2-(4-бромфениламино)-4-оксо-4-фенил-2-бутеновой кислоты и 4-(2,4-диметилфенил)-2-(4-метоксифениламино)-1-[пиперазин-1-ил]бут-2-ен-1,4-диона гидрохлорида

4.2.1. Разработка стандартного образца 126

4.2.2. Установление подлинности 127

4.2.3. Определение чистоты методом тонкослойной хроматографии 129

ГЛАВА 5. Изучение полученных данных по биологической активности производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот

5.1. Острая токсичность 132

5.2. Анальгетическая активность 135

5.3. Противовоспалительное действие 141

5.4. Гипогликемическая активность 145 5.5. Влияние соединений на ориентировочно-исследовательское поведение животных при индуцированном сахарном диабете 148

5.6. Влияние соединений на фагоцитоз 150

5.7. Гемостатическая активность 151

5.8. Противомикробная активность 153

5.9. Инсектицидное действие 160

Заключение 162

Список литературы

Введение к работе

Актуальность темы. В настоящее время получено значительное количество N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных различного строения, а также определена некоторая перспективность поиска среди них новых отечественных фармацевтических субстанций с противовоспалительным, анальгетическим, противомикробным, местноанестезирующим и др. действием [Залесов В.В., 2004; Козьминых В.О., 2004; Пулина Н.А., 2007]. Однако имеется практическая возможность расширения данных рядов соединений за счет реализации следующих подходов: а) использование в качестве исходных соединений 3-иминофуран-2-онов в реакциях с различными нуклеофильными реагентами, что позволяет получать химические соединения, трудно- или недоступные для синтеза другими методами; б) введение в структуру N-замещенных 2-амино-4-арил-4-оксобут-2-еновых кислот, их производных потенциальных фармакофорных фрагментов и функционализированных групп за счет расширения набора OH-, SH- и NH-нуклеофилов, ранее не используемых в данном исследовании; в) модификация структуры полученных производных, в частности, получение водорастворимых соединений, для расширения спектра фармакологических испытаний и выхода на новые виды биологического действия.

Интерес к химии 3-иминофуран-2-онов обусловлен наличием в молекуле нескольких электрофильных и нуклеофильных центров в гетероядре и заместителях, что позволяет вовлекать их в реакции дециклизации с образованием соответствующих производных 2,4-диоксобутановых кислот [Залесов В.В., Рубцов А.Е., 2001-2007], а также рециклизации и во взаимодействие по функциональным группам с сохранением гетероцикла. Вместе с тем, отмечается незначительное количество работ в данном направлении. Важным основанием дальнейшего изучения этого класса соединений служат имеющиеся сведения об их низкой токсичности, ввиду образования продуктов метаболизма, близких по строению к естественным метаболитам живого организма.

Таким образом, работа в области синтеза биологически активных производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот, а также изучение связи «структура-биологическое действие» полученных соединений является актуальной.

Степень разработанности темы исследования. К настоящему времени имеется ограниченное количество публикаций по химии 3-иминофуран-2-онов, а также отсутствует систематическое фармакологическое изучение продуктов их известных химических превращений. В данной работе осуществлены исследования по синтезу производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот, где в качестве базовых соединений выступают 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-оны и нуклеофильные реагенты, содержащие потенциальные фармакофоры. Это позволяет на основе имеющихся литературных данных предвидеть и подтвердить направление протекающих реакций, структуру целевых продуктов, а также получать биологически активные вещества с различным спектром фармакологического действия.

Цель и задачи исследования. Целью данного исследования является синтез новых
фармакологически активных производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых

кислот, полученных на основе химических превращений 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с OH-, SH- и NH-нуклеофилами.

Для достижения поставленной цели планируется решить следующие задачи:

1. Осуществить синтез 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот с введением
потенциальных фармакофорных фрагментов.

  1. Усовершенствовать препаративный метод циклизации 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот в 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-оны.

  2. Изучить взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с OH- и SH-нуклеофильными реагентами (одно-, двух- и трехатомными спиртами, алифатическими и ароматическими тиолами).

4. Исследовать взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с
NH-нуклеофильными реагентами (4,5-замещенными этил-2-аминотиофен-3-
карбоксилатами, 2-амино-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрилом, 2-амино-
5,6-дигидро-4Н-циклопента[b]тио-фен-3-карбоксамидом, 2-амино-1,3-тиазолом, 2-
аминобензо[d]тиазолом, 2-амино-5-R-1,3,4-тиадиазолом, 3-аминотиено[2,3b]пиридинами,
4-R-1,2,5-оксадиазол-3-аминами, морфолином, пиперазином и ароилгидразидами).

5. Получить водорастворимые соединения на основе 2-ариламино-1-[пиперазин-1-ил]-
4-арилбут-2-ен-1,4-дионов.

6. На основании полученных результатов исследования фармакологической
активности синтезированных веществ выявить соединения, обладающие анальгетической,
гемостатической, противовоспалительной, инсектицидной, противомикробной,
гипогликемической активностью, а также изучить взаимосвязь «строение-биологическое
действие».

Научная новизна. Установлена возможность замены уксусного ангидрида на
пропионовый для оптимизации циклизации 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых
кислот в 3-иминофуран-2-оны. Впервые изучено взаимодействие 5-арил-3-арилимино-3Н-
фуран-2-онов с алифатическими и ароматическими тиолами, приводящее к тиоэфирам 4-
арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот. Впервые установлено, что этан-1,2-диол и
пропан-1,2,3-триол раскрывают цикл 3-иминофуран-2-онов с образованием

соответствующих эфиров 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот, находящихся в
растворе в виде Z-, E-енаминокетонных форм. Получены неописанные ранее производные
4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот, содержащие в структуре биологически
активные фрагменты 2-(1,3-тиазолила), 2-(бензо[d]тиазолила), 2-(5-R-1,3,4-тиадиазолила),
3-(тиено[2,3b]пиридила), 3-(4-R-1,2,5-оксадиазолила). Показано, что направление реакции
не меняется при взаимодействии с морфолином и пиперазином, в результате чего
выделены соответствующие 2-(4-ариламино)-1-[пиперазин(морфолин)-1-ил]-4-арилбут-2-
ен-1,4-дионы, а также получены водорастворимые соли, содержащие фрагмент
пиперазина. Установлено, что выраженную анальгетическую и противовоспалительную
активность проявляют 2-(5-R-1,3,4-тиадиазолил)амиды и пиперазиды 4-арил-2-ариламино-
4-оксобут-2-еновых кислот, содержащие в пара-положении ариламинного фрагмента

электроноакцепторный заместитель. Выявлено, что введение двух электронодоноров в арильный радикал при атоме С4 и одного электронодонорного заместителя в пара-положение ариламинного фрагмента 2-ариламино-1-(пиперазин-1-ил)-4-фенилбут-2-ен-1,4-диона гидрохлоридов, способствует существенному увеличению гемостатического действия, в то же время, введение электроноакцептора в ариламинный фрагмент, при наличии фенила в положении С4, приводит к усилению их инсектицидных свойств.

Научная новизна исследования подтверждена 1 патентом РФ, а также поданы 2 заявки на патент РФ на изобретение.

Теоретическая и практическая значимость работы. В ходе исследования
усовершенствован удобный метод циклизации N-замещенных 2-амино-4-арил-4-оксобут-2-
еновых кислот под действием пропионового ангидрида для замены ангидрида уксусной
кислоты (входит в «Список IV прекурсоров...» в ред. Постановления Правительства РФ от
02.07.2015 № 665). Разработаны или усовершенствованы препаративные методы синтеза
неописанных ранее бутил-, изопропил-, 2-гидроксиэтил-, 2,3-дигидроксипропил-4-арил-2-
ариламино-4-оксобут-2-еноатов; S-R-4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-ентиоатов; этил-2-
[2-(4-ариламино)-4-арилбут-4-оксо-2-енамидо]-R-бензо[b]тиофен-3-карбоксилатов, 2-[4-
ариламино]-4-(4-арил)-N-(3-циано-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-ил)-4-оксобут-2-
енамидов, 2-[2-[(4-бромфенил)амиино]-4-(4-хлорфенил)-4-оксобут-2-енамидо]-4H,5H,6H-
циклопен-та[b]тиофен-3-карбоксамида; 4-арил-2-ариламино-4-оксо-N-(тиазол-2-ил)бут-2-
енамидов; 2-ариламино-N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-4-оксо-4-фенилбут-2-енамидов; 4-арил-2-
ариламино-4-оксо-N-(5-R-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бут-2-енамидов; 2-[4-ариламино]-4-(4-
арил)-N-(2-R-4,6-диметилтиено[2,3b]пиридин-3-ил)-4-оксобут-2-енамидов; 2-ариламино-4-
оксо-N-(4-R-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-фенилбут-2-енамидов; N'-[4-арил-2-ариламино-4-
оксобут-2-еноил]бензогидразидов; 2-(4-ариламино)-1-[пиперазин(морфолин)-1-ил]-4-
арилбут-2-ен-1,4-дионов; 4-арил-2-(4-ариламино)-1-[пиперазин-1-ил]бут-2-ен-1,4-диона
гидрохлоридов, которые просты по выполнению, легко воспроизводимы и могут быть
использованы при синтезе новых биологически активных веществ. Предложено
устанавливать подлинность соединений-лидеров: 2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)амида 2-(4-
бромфениламино)-4-оксо-4-фенил-2-бутеновой кислоты и 4-(2,4-диметилфенил)-2-(4-
метоксифениламино)-1-[пиперазин-1-ил]бут-2-ен-1,4-диона гидрохлорида - методом ИК-
спектроскопии; чистоту - методом тонкослойной хроматографии.

В процессе научной работы синтезировано 122 неописанных в литературе соединения, из них фармакологическому скринингу подвергнуто 74 вещества. Выявлены соединения-лидеры, проявляющие высокую анальгетическую, противовоспалительную, гемостатическую, инсектицидную активность при низкой острой токсичности. Установлены определенные закономерности биологического действия от химической структуры веществ, которые могут быть использованы в дальнейшем поиске биологически активных соединений в ряду производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот.

Внедрение результатов исследования. Результаты научных исследований внедрены в научно-исследовательский и учебный процесс кафедры общей и органической химии государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального

образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, а также кафедры природных и биологически активных соединений и научно-исследовательской лаборатории биологически активных веществ федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Пермский государственный национальный исследовательский университет».

Методология и методы исследования. В научном исследовании был использован
широкий набор классических методов органического синтеза и выделения продуктов
реакции. Строение полученных соединений доказано современными методами анализа
структуры, состава и чистоты: ИК-, ЯМР 1Н-, ЯМР 13С-спектроскопии, масс-
спектрометрии, элементным анализом, тонкослойной хроматографией.
Фармакологическое действие полученных веществ изучено согласно «Руководству по
проведению доклинических исследований лекарственных средств» (Москва, 2013),
обработка полученных результатов проводилась с использованием лицензионных
прикладных статистических программ Statistica 8.0, Microsoft Office Excel.
Прогнозирование возможного спектра биологического действия синтезированных
соединений in silico осуществлялось с использованием программы PASS, включающей
молекулярные механизмы действия фармакологически активных веществ.

Степень достоверности. Обоснованность и достоверность полученных данных подтверждена с помощью использования современных приборов для определения структуры и контроля чистоты синтезированных соединений. Для проведения фармакологического скрининга использовались стандартные утвержденные методики.

Апробация результатов. Основные результаты диссертационной работы

представлены на итоговых научных конференциях ФГБОУ ВПО ПГФА Минздрава России (Пермь, 2010-2015); на региональной научной конференции «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2011); на Всероссийских конференциях: «Университетская наука: взгляд в будущее» (Курск, 2013), «Актуальные вопросы медицинской науки» (Ярославль, 2013), «XVI Молодежная Всероссийская школа-конференция по органической химии» (Пятигорск, 2013), «VI Молоджная конференция ИОХ РАН» (Москва, 2014), «Молодая фармация – потенциал будущего» (Санкт-Петербург, 2014); на международных конгрессах и конференциях: International Congress on Organic Chemistry dedicated to the 150-th anniversary of the Butlerov’s Theory of Chemical Structure of Organic Compounds (Казань, 2011); «Фармация и общественное здоровье» (Екатеринбург, 2012), «Инновации молодых ученых» (Ставрополь, 2012), «Topical areas of fundamental and applied research II» (North Charleston, SC, USA, 2013), «Техническая химия. От теории к практике» (Пермь, 2010, 2014, 2016), «Развитие науки в XXI веке» (Харьков, 2015); на XXIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2016).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Синтез и строение новых производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот, содержащих биологически активные группировки.

  1. Результаты исследования химического поведения 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов с одно-, двух- и трехатомными спиртами, алифатическими и ароматическими тиолами, 4,5-замещенными этил-2-аминотиофен-3-карбоксилатами, 2-амино-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-3-карбонитрилом, 2-амино-5,6-дигидро-4Н-циклопента[b]тио-фен-3-карбоксамидом, 2-амино-1,3-тиазолом, 2-аминобензо[d]тиазолом, 2-амино-1,3,4-тиадиазолом, 3-аминотиено[2,3b]пиридином, 4-R-1,2,5-оксадиазол-3-амином, морфолином, пиперазином и ароилгидразидами.

  2. Установленные взаимосвязи строения и биологической активности синтезированных веществ, а также выбор перспективных соединений для дальнейших фармакологических испытаний.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (№ государственной регистрации 01.9.50 007419) и в рамках выполнения проектов РФФИ № 08-03-00488, 11-03-00882-а, 14-03-96016 р_урал_а.

Личный вклад автора в проведенное исследование и получение научных результатов. Все этапы исследовательской работы по поиску, анализу и обобщению научной литературы по синтезу и химическим свойствам производных N-замещенных 4-арил-2-амино-4-оксобут-2-еновых кислот, выполнению химических экспериментов, анализу и интерпретации экспериментальных и спектральных данных, обработке и обобщении полученных результатов биологических испытаний, апробации работ на научных конференциях проведены лично автором.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Диссертационная работа соответствует паспорту научной специальности 14.04.02 – «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», а именно пункту 1 – исследование и получение биологически активных веществ на основе направленного изменения структуры синтетического и природного происхождения и выявление связей и закономерностей между строением и свойствами веществ.

Публикации материалов исследования. По теме диссертации опубликованы 24 научных работы, из них: 5 статей в изданиях, входящих в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК при Минобрнауки России, получен 1 патент РФ, поданы 2 заявки на патент РФ на изобретение.

Структура и объем работы. Материалы диссертационного исследования изложены на 199 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, литературного обзора (гл. 1), материалов и методов исследования (гл. 2), обсуждения собственных исследований (гл. 3), экспериментальной химической части (гл. 4), изучения результатов исследования биологической активности синтезированных соединений (гл. 5), заключения, списка литературы, приложений. Диссертация содержит 55 схем, 43 таблицы и 11 рисунков. Библиография включает 199 работ, из которых 54 – на иностранных языках.

Спектральные характеристики N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных

4-(Гет)арил-2,4-диоксобутановые [(гет)арилпировиноградные] кислоты (далее ГПК) и их производные (гетарилпируваты) были открыты еще в конце XIX – начале XX веков [150,152,153]. Неутихающий интерес к химии производных ГПК связан, в первую очередь, с наличием нескольких реакционных центров в структуре соединений, что позволяет проводить направленную химическую модификацию молекул с введением фармакофоров и получать биологически активные продукты с заданными свойствами [2,19,41,44,88].

Научные исследования, в том числе, традиционно выполняемые в Пермской государственной фармацевтической академии и Пермском государственном национальном исследовательском университете, свидетельствуют, что для данного класса соединений присущи выраженное фармакологическое действие и низкая токсичность. Так, среди производных ГПК обнаружены малотоксичные и нетоксичные вещества с антибактериальной, местноанестезирующей, противотуберкулезной, противовоспалительной, гипогликемической, анальгетической активностью, нейропротекторным и другим действием [3,20,48, 57-59,61,63,64,79,93,116,124,146,162,184,188,191,194]. Широко исследуются противовирусные свойства данного класса соединений. За рубежом установлено, что производные (гет)арилпировиноградных кислот являются селективными обратимыми ингибиторами ДНК-полимеразы вируса гепатита С, высокоселективными ингибиторами репликации вируса ВИЧ-1 [146,158,168,185]. Кроме того, установлено, что данные производные, благодаря своей способности выступать в качестве ингибиторов глюколатоксидазы, могут применяться для лечения почечного оксалат-кальцевого литиаза (мочекаменной болезни) и первичной гипероксалурии [196]. Также выявлено, что некоторые гетарилпируваты улучшают работу регулятора трансмембранной проводимости, мутирующего при муковисцидозе (кистозном фиброзе) [197]. Настоящий обзор посвящен рассмотрению методов синтеза, химических свойств и результатов исследования биологической активности N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных.

Известны два основных метода получения N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных. Это взаимодействие 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановых кислот и их производных с N-замещенными аминосоединениями, а также дециклизация 3-имино-3Н-фуран-2-онов под действием ОН- и NH-нуклеофилов.

Впервые 4-оксо-2-фениламино-4-фенилбут-2-еновая кислота была получена еще в XIX веке при длительном нагревании бензоилпировиноградной кислоты с анилином [152]. Систематическое исследование взаимодействия аминов с 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановыми кислотами проводилось с 1965 года. За это время были получены ряды N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот (II-XXXIX) взаимодействием соответствующих 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновых кислот (I) с аллил-, ароил-, гетариламинами, гидразонами кетонов, 2,4-динитрофенилгидразином, трифенилфосфазинами на основе диазосоединений.

Так, в результате реакции 4-(гет)арил-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновых кислот (Iа-и) с алифатическими аминами при эквимолекулярном соотношении реагентов в среде этанола при кратковременном кипячении с высоким выходом образуются соответствующие N-замещенные 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновые кислоты (II) и 2-(2-тиоэтиламино)-4-оксо-4-арилбут-2-еновые кислоты (III) (схема 1) [41,43,137]. о При взаимодействии кислот Іа-т с ароматическими аминами в среде этанола при нагревании в течение 0,5-2,5 ч образуются 2-ариламино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновые кислоты (IV-XXVII) (схема 2). Исходя из имеющихся данных, авторами определена наиболее вероятная структура переходного состояния (IД когда реакция осуществляется по согласованному механизму, а карбоксильная группа проявляет свойства внутримолекулярного бифункционального катализатора [15,19,23,25,32,38,44,74,95,125,133,147,163,178,193]. I: R=(CH3)3C (к), 3-ClСбН4 (л), 2,4-(СН3)2СбН3 (м), 4-СН3ОС6Н4 (н), 2,4-(СН3О)2С6Н4 (о), 4-С2Н5ОС6Н4 (п), 4-1С6Н4 (р), 2-С4Н30 (с), 2-C4H3S (т). IV: Ar=C6H5, R=C6H5 (а), 4-СН3С6Н4 (б), 4-СН3ОСбН4 (в), 4-С2Н5ОС6Н4 (г), 4-С2Н5ОСОС6Н4 (д), CeFs (е). V: Ar=4-CH3С6Н4, R=С6Н5 (а), 4-СН3С6Н4 (б), 4-СН3ОСбН4 (в), 3,4-(СН3О)2С6Н4 (г), 4-ClС6Н4 (д). VI: Аг=2,4-(СН3)2С6Н3, R=(CH3)3C (а), С6Н5 (б), 2,4-(СН3)2С6Н3 (в). VII: Ar=2,6-(CH3)2С6Н3, R=С6Н5 (а). VIII: Аг=2,4,6-(СН3)3С6Н2, R=С6Н5 (а). IX: Ar=4-CH3OС6Н4, R=(CH3)3C (а), С6Н5 (б), 4-СН3С6Н4 (в), 4-СН3ОС6Н4 (г), 3,4-(СН3О)2СбН4 (д), 4-С2Н5ОС6Н4 (е), 4-ClС6Н4 (ж). X: Ar=2-CH2OHС6Н4, R=С6Н5 (а), 4-ClС6Н4 (б). XI: Аг=4-С2Н5ООСС6Н4, R=(CH3)3C (а), СбН5 (б), 4-СН3С6Н4 (в), 4-СН3ОС6Н4 (г), 4-С2Н5ОС6Н4 (д), 2,4-(СН3)2С6Н3 (е), 4-BrС6Н4 (ж), 4-ClС6Н4 (з), 4-FС6Н4 (и). XII: Ar=2-BrС6Н4, R=(CH3)3C (а); XIII: Ar=4-BrС6Н4, R=(CH3)3C (б), СбН5 (в); XIV: Аг=2,4-Вг2СбН3, R=(CH3)3C (г). XV: Ar=4-C1С6Н4, R=С6Н5 (а), 4-СН3СбН4 (б), 4-СН3ОС6Н4 (в), 4-С2Н5ОСОС6Н4 (г), 2,4-(N02)2C6H3 (д), 4-BrСeН4 (е); XVI: Аг=2,4-С12СбН3, R=(CH3)3C (ж). XVII: Ar=4-N02С6Н4, R=С6Н5 (а). XVIII: Ar=2,4-(N02)2С6Н3, R=С6Н5 (а), 4-СН3С6Н4 (б), 4-BrС6Н4 (в), 4-ClС6Н4 (г), 4-FС6Н4 (д); XIX: Ar=2,4-(N02)2NHС6Н3, R=(CH3)3C (е), С6Н5 (ж), 4-СН3С6Н4 (з), 2,4,6-(СН3)3СбН2 (и), 3,4-(СН3О)2С6Н4 (к), С10Н7 (л), 4-BrСбН4 (м), 4-ClСбН4 (н), 4-FС6Н4 (о). XX: Ar=2-CH3-5-N02С6Н3, R=(CH3)3C (а), СбН5 (б), 4-СН3СбН4 (в), 4-FСвН4 (г). XXI: Ar=3-CF3С6Н4, R=(CH3)3C (а), С6Н5 (б). XXII: Ar=С10Н7, R=С6Н5 (а). XXIII: Ar=C2H4NHС6Н5, R=С6Н5 (а), 4-СН3С6Н4 (б), 4-СН3ОС6Н4 (в), 2,4-(СН3)2С6Н3 (г), 4-BrСeН4 (д), 4-ClС6Н4 (е), 4-N02С6Н4 (ж); XXIV: Ar=(C6H5)2C=N, R=С6Н5 (з), 4-СН3СбН4 (и), 4-СН3ОС6Н4 (к), 4-BrСeН4 (л), 4-ClС6Н4 (м). XXV: Аг=2 17 (C(C6H5)2OH)C6H4, R=С6Н5 (а), 4-СН3С6Н4 (б), 4-ClС6Н4 (в). XXVI: Ar=4-(C2H5)2N(CH2)2OCOC6H4, R=(CH3)3C (а), С6Н5 (б), 4-СН3ОС6Н4 (в), 4-BrС6Н4 (г). XXVII: Аг=2-ОН-3-С3Н7-6-СН3СбН2, R=(CH3)3C (а), СбН5 (б), 4-СН3СбН4 (в), 2,4-(СН3)2СбН3 (г), 4-ClС6Н4 (д), 4-FСвН4 (е). Где: іГ-Д ГА— 2-С4Н30 о , 2-C4H3S s . Кислоты I реагируют с ариламинами с высокой скоростью. Повышенную реакционную способность их -карбонильной группы невозможно объяснить различием в электронных эффектах карбоксильной, карбалкоксильной или карбамоильной групп. Исследования кинетики этой реакции в среде этанола показывают, что одной из причин данного явления является межмолекулярный катализ свободными карбоксильными группами, о чем свидетельствует увеличение значений наблюдаемых констант скорости при возрастании концентрации субстратов. При этом карбоксильная группа может, в зависимости от стадии, выполнять различные функции, т.е. быть кислотным, основным, нуклеофильным или бинуклеофильным катализатором [32,38].

Метод определения анальгетической активности

Структура N-замещенных 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот (II-XXXVII), эфиров XLI-LVI, LXXVIII, амидов LVIII-LXXIV, LXXIX-LXXX и гидразидов LXXVI, LXXXI-LXXXII была подтверждена данными ИК-, ЯМР 1Н-, УФ-, масс-спектрометрии, а также данными элементного анализа. ИК-спектры кислот II-XXXVII, снятые в виде пасты в вазелиновом масле, характеризуются отсутствием валентных колебаний карбоксильной группы, ввиду значительного ее уширения, и наличием уширенной полосы поглощения валентных колебаний аминогруппы в области 3172-3310 см-1, положение которой в спектре зависит от характера заместителей при атоме азота [23,179]. Напротив, как отмечают авторы в работах [95,178], в ИК-спектрах кислот XXXVI присутствует две уширенные полосы поглощения в области 3458-3468 см-1 и 3414–3417 см-1 (у соединений XXXVIа,д) или площадка в области 3417-3467 см-1 (у соединений XXXVIб-г), характерные для NH-группы, полоса поглощения в области 1730-1735 см-1, ввследствие валентных колебаний COOH-группы, и группа полос поглощения в области 1587-1669 см-1, характерных для лактамного карбонила гетероцикла, карбонильной группы С4=O, вовлеченной во ВВС, С=С, С=N связей. Наличие полосы поглощения карбоксильной группы в ИК-спектрах и высокочастотное поглощение группы NH может свидетельствовать о возможном существовании соединений XXXVIа-д в форме C с аминогруппой, не вовлеченной в ВВС (схема 21) [32,38,95,178].

По данным спектров ЯМР 1Н, снятых в растворе ДМСО-d6, установлено, что кислоты II-XXXVII существуют в растворах как равновесные смеси енаминокетонных форм A и C, т.е. в форме Z-,E-изомеров с преобладанием Z-изомера, содержание которого составляет от 80 до 91%. Форма А (Z-енаминоформа) характеризуется наличием уширенного сигнала протона СООН-группы при 13.0-13.7 м.д., синглета протона NH-группы, вовлеченного в прочную ВВС, при 9.12-12.63 м.д. и синглета протона СН-группы при 5.77-6.85 м.д. Сигнал протона NH- и протона СН-группы формы C (Е-енаминоформы) наблюдается в более сильном поле, соответственно, при 8.63-10.30 и 5.88-6.85 м.д. Сигнал протона СООН-группы данной формы обнаружить в спектре не удается, по-видимому, вследствие его значительного уширения. Иначе выглядят спектры соединений XXXVIIб-г,ж,з, в которых присутствуют сигналы протонов енаминокетонной формы А (Z-) и –кетоиминной формы D. Форма А (Z-) характеризуется наличием синглета протона NH-группы, вовлеченного в ВВС, при 12.54-12.93 м.д. и синглета метиленового протона при 5.89-6.04 м.д., а форма D – наличием синглета протонов метиленовой группы при 4.38-4.42 м.д. Содержание формы D в соответствии с интегральной интенсивностью сигналов составляет от 9 до 23% [15,19,41,44,95,178,179,193].

В спектрах ЯМР 13С кислот XXIX-XXXVI присутствуют характерные сигналы ядер углерода для С4=О при 188.254, 185.720 м.д., группы СOO при 163.58, 160.409 м.д., группы С-N при 150.117, 146.362 м.д., сигналы ароматических атомов углерода при 113.672-141.701 м.д., С3Н двух таутомерных форм при 96.906, 91.598 м.д., группы C-N при 59.619, 59.102 м.д., группы С-С при 12.429 м.д. [181].

В ИК-спектрах эфиров LVу-ц, LXXVIIIб-и наблюдаются полосы поглощения в области 1732-1744 см-1, обусловленной валентными колебаниями сложноэфирного карбонила, и полосы в области 1590-1626 см-1, характерной для групп С4=О, С=С, С=N. Четкого сигнала аминогруппы в ИК-спектрах не наблюдается, по-видимому, в результате вовлечения аминогруппы во ВВС с С4=О группой [36,37,39,95,136,141].

По данным спектров ЯМР 1Н, эфиры LVу-ц, LXXVIIIб-и в среде ДМСО-d6 существуют как равновесные енаминокетонные смеси в форме Z-,E-изомеров с преобладанием Z-енаминоизомера (форма E), содержание которого составляет от 75 до 84%. Z-енаминоформа характеризуется наличием синглета протона NH-группы, вовлеченного в прочную ВВС, при 10.87-12.31 м.д. и синглета протона СН-группы при 5.90-6.60 м.д. Сигналы протонов NH- и СН-групп Е-изомера (форма F) наблюдается в более сильном поле соответственно при 8.74-9.05 и 5.77-5.79 м.д. Для спектров -кетоиминной формы (форма G) характерно присутствие синглета протонов метиленовой группы при 3.96-4.39 м.д. (схема 22) [36,37,39,95,136,141,145,165,176]. Схема 22 R2 тт т н О N. В ИК-спектрах амидов LXIIIа, LXIVа,и, LXVIIIо-ф присутствуют полосы поглощения в области 3250-3280 и 3144-3195 см"1, характерные для NH-групп, полоса в области 1660-1696 см"1, вследствие валентных колебаний амидного карбонила. В ИК-спектрах соединений LXXIXа-ж присутствуют две полосы поглощения в области 3250-3280 и 3114-3130 см"1, характерные для NH-группы, а также полоса поглощения амидного карбонила в области 1667-1680 см"1 [5-7,95,126,135,149].

Согласно данным спектров ЯМР !Н, записанных в растворе ДМСО-ёе, амиды LXIIIа, LXIVа,и, LXVIIIо-ф существуют в растворах как равновесные смеси двух г-,Е-изомерных енаминокетонных форм с преобладанием Z-изомера (форма Н), содержание которого составляет от 88 до 99%. Z-Изомер характеризуется наличием синглетов протонов NH-групп при 11.43-11.52 и 10.18-10.63 м.д., синглета протона CH-группы при 6.27-6.31 м.д. Сигналы протонов NH-и CH-групп Е-изомера (форма I) наблюдаются в более сильном поле, соответственно, при 9.51-10.32, 8.81-8.98 и 5.79-6.10 м.д. Енгидразинная форма (форма І) в спектрах соединений LXXIXа-ж характеризуется наличием в спектре синглетов протонов NH-групп при 12.75-12.92 и 10.19-10.51 м.д. и синглета протона СН-группы при 6.12-6.61 м.д. В гидразоноформе (форма J) присутствует синглет протона NH-группы при 9.19-10.23 м.д. и сигнал протонов СН2-группы при 4.51-4.52 м.д. (схема 23) [5-7,74,95,124,126,135,149,176,181].

Получение 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот

Изучение литературных данных показывает, что N-замещенные 2-амино-4-(гет)арил-4-оксобут-2-еновые кислоты и их производные (эфиры, амиды, гидразиды) являются эффективными «строительными блоками» и успешно используются в органическом синтезе различных химических структур [2,19,41,44,88]. Их высокая реакционная способность и широкий диапазон фармакологической активности, в сочетании с низкой токсичностью, обусловленной образованием в организме метаболитов, сходных по строению с естественными, привлекают к себе значительное внимание. К настоящему времени в реакциях с 3-имино-3Н-фуран-2-онами с последующим раскрытием цикла апробирован определенный круг OH- и NH-нуклеофилов [1,14,23,94-96,98,124,136,146,169,176,182,183]. Однако, данное превращение изучено недостаточно и представляется перспективным исследование взаимодействия 3-иминофуранонов с более широким набором нуклеофильных реагентов. Неисследованной является область превращений 5-арил-3-ариламино-3Н-фуран-2-онов с SН-нуклеофилами, а также с двух- и трехатомными предельными спиртами.

В качестве объектов изучения нами выбраны 5-арил-3-ариламино-3Н фуран-2-оны, способные вступать в реакции рециклизации и дециклизации [23]. При этом возможность введения различных заместителей в арильные радикалы фуранового цикла имеет практическое значение в плане дальнейших биологических испытаний продуктов реакций. Определенную синтетическую ценность имеют реакции дециклизации 3-имино-3Н-фуран-2-онов, позволяющие в ряде случаев получать труднодоступные химические производные. Представляет интерес расширить набор фармакофорных фрагментов, вводимых в структуру амидов и эфиров 2-амино-4-арил-4-оксобут-2-еновых кислот, путем введения в реакцию исходных 3-имино-3Н-фуран-2-онов: одноатомных, двухатомных и трехатомных спиртов, алифатических и ароматических тиолов, 2 амино-4,5-R,R -тиофен-3-карбоксилатов, 2-амино-1,3-тиазола, 2-аминобен 59 зо[d]тиазола, 2-амино-5-R-1,3,4-тиадиазола, 3-аминотиено[2,3b]пиридина, 4-R-1,2,5-оксадиазол-3-амина, морфолина, пиперазина, ароилгидразидов. Для повышения биологической доступности химических веществ актуальным является синтез водорастворимых производных с сохранением их базовой фармакологически активной молекулярной матрицы, в частности, получение 4-арил-2-ариламино-1-[пиперазин-1-ил]бут-2-ен-1,4-диона гидрохло ридов. Следует отметить, что у известных ранее N-замещенных 2-амино-4 (гет)арил-4-оксобут-2-еновых кислот и их производных малоизученным является гипогликемическое действие, а также не исследовано их влияние на индивидуальное поведение животных в условиях индуцированного диабета, на свертывающую систему крови и фагоцитоз, не изучено инсектицидное действие. Это также было принято нами во внимание при планировании фармакологического скрининга новых производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот.

Нами осуществлен расчет предполагаемого биологического действия in silico с использованием отечественной оригинальной программы PASS (Prediction of Activity Spectra for Substances), позволяющей решить задачу многокритериального отбора в применении к биологическому эффекту с возможностью прогнозировать более 3000 молекулярных механизмов действия фармакологически активных веществ. В данном методе вклад фрагмента молекулы в проявление каждого вида биологической активности оценивается на основе усредненного вклада, рассчитанного для каждого атома в целостной структуре соединения с помощью дескрипторов многоуровневых атомных окрестностей (MNA-дескрипторов). В ходе генерирования осуществляется отбор структур на соответствие выбранным видам биологической активности. Компьютерные методы дизайна лекарств, основанные на структуре макромолекулы мишени (Target-Based Drug Design) и структуре лигандов (Ligand 60 Based Drug Design) позволяют во многих случаях ограничить пространство изучения сравнительно небольшим числом мишеней (видов фармакологической активности). Сочетание PASS и GUSAR методов (Россия) не уступает по точности и предсказательной способности QSAR-моделям (Германия, США) [102,130,173].

Для производных 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот рядов 4 19 отмечена высокая вероятность обнаружения анальгетической, противовоспалительной, антидиабетической, гемостатической, противовирусной (в том числе, против аденовируса, вирусов гриппа, ВИЧ), антибактериальной (Helicobacter pylori и др.), антигельминтной, ретинопротекторной, антиневротической, противоопухолевой и других видов активности [54,82,127]. Из побочных эффектов наиболее вероятно появление мышечной слабости, потере в весе, аллергического дерматита, цианоза, тремора конечностей. Полученные расчетные данные свидетельствуют о необходимости расширения фармакологических испытаний и, в первую очередь, проведение исследований на противовирусное действие. Таким образом, в дальнейшем был спланирован биологический эксперимент.

С целью синтеза исходных 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-онов нами первоначально получен ряд 4-арил-2-ариламино-4-оксобут-2-еновых кислот по известной методике, описанной в работе [178]. Для синтеза соединений, содержащих фармакофорные фрагменты, взаимодействием 4-арил-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновых кислот (1а-е) с ароматическими аминами были получены известные N-замещенные 2-ариламино-4-арил-4-оксобут-2-еновые кислоты (2а-у) [32,163,178,193]. Кроме того, нами синтезированы новые 4-арил-4-оксо-2-[(4-сульфамоилфенил)амино]бут-2-еновые кислоты (2ф-ч) при использовании биологически активного ароматического амина: 4-аминобензолсульфонамида. Реакция протекает в среде этанола при эквимолекулярном соотношении реагентов, температуре 60-80 С, давая с хорошим выходом целевые продукты (схема 36) [80,175].

Методы определения подлинности и чистоты 2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)амида 2-(4-бромфениламино)-4-оксо-4-фенил-2-бутеновой кислоты и 4-(2,4-диметилфенил)-2-(4-метоксифениламино)-1-[пиперазин-1-ил]бут-2-ен-1,4-диона гидрохлорида

В практическом здравоохранении в качестве антиагрегантов при лечении сердечнососудистых заболеваний, а также для профилактики и лечения инсультов успешно применяются лекарственные препараты, являющиеся производными, полученными на основе тиенопиридинов, например, клопидогрел (Плавикс, Зилт, и др.), тиклопидин (Тиклид, Аклотин и др.) [51]. Представляло интерес изучить взаимодействие 3-иминофуранонов с 3-аминотиено[2,3b]пиридинами и 4-R-1,2,5-оксадиазол-3-аминами для дальнейшего фармакологического скрининга новых соединений.

Нами установлено, что 5-арил-3-арилимино-3Н-фуран-2-оны (3р-т) взаимодействуют с 3-аминотиено[2,3b]пиридинами и 4-R-1,2,5-оксадиазол-3-аминами. Реакция протекает при эквимолекулярном соотношении реагентов в среде безводного толуола при температуре 110 С, давая 2-[4-ариламино]-4-(4-арил)-N-(2-R-4,6-диметилтиено[2,3b]пиридин-3-ил)-4-оксобут-2-енамиды (14а-д) и 2-ариламино-4-оксо-N-(4-R-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-фенилбут-2-енамиды (15а-ж) с хорошим выходом (схема 49) [27,117,171,175]. Соединения 14а-д – интенсивно окрашенные в желтый цвет кристаллические вещества, растворимые в хлороформе, диметилсульфоксиде, ацетонитриле, нерастворимые в алканах и воде. Производные 15а-ж –светло-желтые кристаллические вещества, растворимые в диметилсульфоксиде, ацетонитриле, нерастворимые в толуоле, алканах и воде. Индивидуальные физико-химические характеристики полученных соединений приведены в таблице 21, 23. Строение полученных соединений подтверждено данными ИК-, ЯМР 1Н-спектроскопии (табл. 22, 24), а также масс-спектрометрией и данными элементного анализа. В ИК-спектрах соединений 14а-д присутствуют одна-три полосы поглощения, которые зачастую уширены, в области 3140-3495 см-1, характерные для NH-групп, полоса поглощения в области 1690-1705 см-1, характерная для валентных колебаний амидного карбонила, а также полосы поглощения группы С4=О и С=С, С=N связей в области 1589-1645 см-1.

В ИК-спектрах соединений 15а-ж присутствуют полосы поглощения валентных колебаний NH-групп в области 3192-3470 см-1, амидной карбонильной группы в области 1694-1750 см-1, а также полосы поглощения группы С4=О и С=С, С=N связей в области 1585-1665 см-1. Таблица 21 Физико-химические характеристики 2-[4-ариламино]-4-(4-арил)-N-(2-R-4,6-диметилтиено[2,3b]пиридин-3-ил)-4-оксобут-2-енамидов (14а-д) сн3 nfQH, R Соединение R1 R2 R3 Выход, % Т. пл., С Мол. масса Брутто-формула Rf 14a Cl Br 4-CNC6H4 65 189-191 641,97 C32H22BrClN402S 0,17 146 Cl Br COCC6H5 74 196-198 644,97 C32H23BrClN303S 0,31 14в Cl Cl 4-CNC6H4 71 200-202 597,52 C32H22C12N402S 0,21 14г Cl Cl COCC6H5 69 192-194 600,52 C32H23C12N303S 0,28 14д Cl I 4-CNC6H4 64 179-181 688,97 C32H22C1IN402S 0,14

В спектрах ЯМР 1Н соединений 14-15, наряду с сигналами протонов соответствующих заместителей в гетероцикле и арильных радикалах, присутствуют синглет винильного протона при 6.31-6.65 м.д., группа сигналов ароматических протонов при 6.98-8.11 м.д., а также cинглет протона амидной группы при 8.36-8.98 м.д. и синглет протона NH-группы ариламинного фрагмента при 10.89-13.49 м.д. Представленные спектральные значения характеризуют Z-кетоенаминную форму (форму К) данных соединений. Кроме того, в спектрах соединений наблюдаются сигналы протонов C3H- и NH- групп Е-кетоенаминной формы Л, находящиеся в более сильном поле при 6.14-6.35 и 10.86-11.28 м.д., соответственно. Соединения 14-15 существуют как равновесные смеси двух кетоенаминных таутомеров с преобладанием Z-изомера, содержание которого составляет 80-95%. Выявлено, что соединения 15б-д,ж также существуют в -кетоиминной форме М, для которой характерен синглет двух протонов метиленовой группы при 4.21-4.49 м.д. и отсутствие сигнала протона группы NH. Содержание формы М составляет 5-10% (схема 50).

Образование соединений 8-15 происходит, по-видимому, по аналогичному механизму, предложенному для OH- и NH-нуклеофилов [176]. Первоначально, вследствие нуклеофильной атаки аминогруппой гетероциклического амина атома С2 иминофуран-2-она, происходит перенос протона от атома азота аминогруппы к атому кислорода группы С2=О, приводящий к образованию аминоспирта. Последний далее превращается в Z-енаминную форму амида, за счет переноса протона к атому О1 или к атому азота в иминофункции, с последующим разрывом связи С2-О1.

В масс-спектре соединения 15б присутствует пик молекулярного иона с m/z (Iотн., %) 470/468 (2.28), а также пики фрагментных ионов: 330/328 (18.55) [M H3C Известно, что соединения, имеющие в своей молекуле фрагменты морфолина и пиперазина, обладают фармакологической активностью. Данные фармакофоры присутствуют в структуре многих современных лекарственных средств, таких как, ципрофлоксацин, циннаризин, кетоконазол, ниморазол, триметазидин, цетиризин и др. [51]. Представляло интерес включить их в структуру производных 2,4-диоксобутановых кислот.

Для этого нами взаимодействием 5-арил-3-ариламино-3Н-фуран-2-онов (3) с эквимолекулярным количеством морфолина или пиперазина в среде безводного толуола в интервале температур от 50 до 110 С были получены с хорошим выходом 4-арил-2-(4-ариламино)-1-[морфолин-1-ил]бут-2-ен-1,4-дионы (16a-з) и 4-арил-2-(4-ариламино)-1-[пиперазин-1-ил]бут-2-ен-1,4-дионы (17a-м) (схема 51) [4,31,127,189].