Введение к работе
Актуальность темы. В последние десятилетия значительно возросла потребность медицинской практики в использовании лекарственных растений и препаратов на их основе. Их востребованность связана с рядом положительных свойств фитопрепаратов. Растительные препараты, как правило, обладают низкой токсичностью при достаточно высокой эффективности, широким спектром терапевтического действия, комплексным органопротекторным действием на организм больного. В настоящее время хорошо себя зарекомендовали растительные препараты, обладающие мочегонным, противовоспалительным, антисептическим действием. Одним из признанных сырьевых источников для получения препаратов данных фармакотерапевтических групп являются листья и почки березы (Betula verrucosa Ehrh.). Проблематичной в отношении обсуждаемых объектов представляется состояние нормативной документации (НД) (ФС 41 ГФ XI «Почки березы», ФС 42-2487-95 «Листья березы»), особенно в части решения вопросов химической стандартизации. Разработка объективных и унифицированных методов анализа сырья и препаратов основывается на результатах изучения химического состава, выделении ведущей и анализируемой групп биологически активных соединений (БАС). Фотохимические аспекты оценки показателей качества в обсуждаемом случае нуждаются в дальнейшем изучении, поскольку в ФС 42-2487-95 на листья березы в разделе «Качественные реакции» используется только цианидиновая проба, которая характерна для многих лекарственных растений, содержащих соответствующие группы флавоноидных соединений и не является достаточно специфичной. В ФС 41 ГФ XI на почки березы раздел «Качественные реакции» отсутствует. Кроме того, использование в спектофотометрической методике (раздел "Количественное определение" в фармакопейной статье "Листья березы") Государственного стандартного образца (ГСО) рутина, на наш взгляд, не является оптимальным. В случае оценки качества почек й|ріт,м в соответствии с действующей НД определяется содержание эфирного масла, ^хИйИМЛМШб шля разрабатываемых
,4
суммарных препаратов на основе водно-спиртовых экстрактов. Результаты современных исследований химического состава, взаимосвязи «структура вещества - биологическая активность» и «химический состав - фармакологическое действие» обусловливают необходимость изучения других фармакологических эффектов данного лекарственного растительного сырья. Кроме того, в настоящее время почки и листья березы применяются в основном в виде настоев. При этом не учитывается в полной мере природа БАС в плане их растворимости в различных экстрагентах.
Таким образом, представляется актуальным дальнейшее фитохимическое исследование сырья березы бородавчатой, разработка новых подходов к решению проблемы химической стандартизации, а также поиск новых путей в области применения препаратов березы в медицинской практике.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является фитохимическое исследование листьев и почек березы как перспективных сырьевых источников для получения новых препаратов.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
-
Изучение химического состава листьев и почек березы бородавчатой.
-
Разработка подходов к стандартизации сырья и препаратов листьев и почек березы бородавчатой с позиций определения ведущей группы БАС и с учетом принципа унификации методик в ряду лекарственное растительное сырье -субстанция - лекарственная форма.
-
Разработка методик качественного анализа листьев и почек березы бородавчатой.
-
Разработка методик количественного анализа листьев и почек березы бородавчатой.
-
Разработка методик качественного и количественного анализа препаратов «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка».
-
Разработка и изучение числовых показателей препаратов: «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка».
-
Разработка проектов и изменении |ЇД на дистья и почки березы.
Научная новизна. В результате изучения химического состава березы бородавчатой (Betula verrucosa Ehrh.) выделено и идентифицировано 10 индивидуальных веществ фенольной природы. Для установления структуры и изучения физико-химических свойств выделенных соединений были использованы УФ-, 'Н-ЯМР-спектроскопия и масс-спектрометрия, а также результаты различных химических превращений. Из листьев березы выделен салидрозид, которых впервые описан для видов рода Betula.
Научно обоснована целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов березы бородавчатой по флавоноидам, и, в частности, по содержанию гиперозида - в случае листьев березы, и лютеолина, пиностробина - в случае почек березы. Обоснована целесообразность использования тонкослойной хроматографии (ТСХ) для определения подлинности листьев (гиперозид) и почек (пиностробин).
На основе изучения химического состава сырья и с учетом методологических подходов по выделению целевой группы действующих веществ выполнены фитохимические и аналитические исследования по разработке лекарственных средств «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка».
Практическая значимость.
1 Разработаны методики качественного и количественного анализа почек и листьев березы бородавчатой: в ФС 42-2487-95 предложено ввести новый раздел «Качественные реакции» и числовой показатель «Сумма флавоноидов в пересчете на гиперозид не менее 2,0 %».
-
Разработаны методики качественного и количественного анализа препаратов «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка» с использованием ТСХ-анализа и спектрофотометрии.
-
Разработаны показатели качества препаратов «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка», в том числе «Содержание суммы флавоноидов», «Сухой остаток», «Концентрация спирта», а также установлены сроки годности.
-
Показана целесообразность использования разработанных препаратов березы бородавчатой «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка» в медицинской практике в качестве антисептических, противовоспалительных, а также нейротропных и адаптогенных лекарственных средств.
-
Оформлены проекты ФС "Березы почки" (письмо № 125 от 27.01.05 г.) и Изменения № 1 к ВФС 42-2487-95 "Березы листья" (письмо № 129 от 27.01.05 г.), которые приняты к рассмотрению Фармакопейным государственным комитетом Министерства здравоохранения и социального развития РФ.
6 Результаты исследований используются в научных изысканиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (акты внедрения от 17.02.05 г.).
Положения, выносимые на защиту:
-
Результаты изучения химического состава листьев и почек березы бородавчатой.
-
Результаты исследований по разработке методов стандартизации сырья и препаратов березы бородавчатой.
-
Методики качественного и количественного анализа ЛРС «Березы листья», «Березы почки» и препаратов «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка».
-
Результаты разработки и определения показателей качества ЛРС и соответствующих препаратов.
-
Способы получения препаратов «Березы почек настойка», «Березы листьев настойка».
Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и
социальному развитию" (№ Государственной регистрации 01200105332) и Республиканских программ:
-
«Совершенствование лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений в рыночных условиях» по теме: «Создание лекарственных средств природного происхождения антимикробного, адаптоген-ного и гепатопротекторного действия» (№ Государственной регистрации 01990005277).
-
«Разработка методик качественного и количественного анализа сырья и препаратов лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды и флаво-ноиды» (№ Государственной регистрации 01990007536).
Апробация работы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на Международной научной конференции «Поиск, разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности» (Томск, 2000); на Международной научной конференции молодых ученых «Актуальные проблемы современной науки» (Самара 2000, 2001); на VII, VIII и IX Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, 2001, 2002, 2004); на межрегиональной конференции «Аспирантские чтения (Самара 2002, 2003); на IX и X Российских национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва, 2002; 2003); на VI Симпозиуме по фенольним соединениям (Москва, 2004); на XXI (Marrakech-Morocco, 2002) и XXII (Helsinki-Finland, 2004) International Conference on Polyphenols.
Основное содержание диссертации опубликовано в 15 научных работах.
Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 130 страницах машинописного текста, содержит 25 таблицы, 14 рисунков. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, описания объектов и методов исследования, 3-х глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований и их обсуждение, общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 221 источников, из которых 73 - на иностранных языках.
