Введение к работе
Актуальность
Необходимость дифференцированной, индивидуально направленной фармакотерапии алкоголизма не вызывает сомнений (Майский А.И.,1990; Анохина И.П., 1997; Витлинская И.В., 1997; Gatch М.В. et Lai Н., 1998). Генетическая предрасположенность к потреблению алкоголя доказана в экспериментах на инбредных животных ( Li Т.-К., 2000), селекционированием многих линий мышей и крыс, отличающихся по разнообразным параметрам алкогольного поведения (Eriksson C.J.P., 1990; Colombo G. et al., 1995), близнецовыми (Heath AC. et al., 1999) и семейными исследованиями (Gorwood P., 2000).
Важнейшим фактором алкогольной мотивации является эмоциотропное действие этанола, что концептуально обусловило применение психотропных средств для лечения алкоголизма (Schaffer A. et 1., 1998). Вместе с тем, эмоциональность также является генетически контролируемым признаком (Беляев, 1979). Работами НИЛ фармакогенетики 2-го ММИ им. И.ИЛирогова - ГУ НИИ фармакологии РАМН в 1975-2001 гг. доказано, что реакции на психотропные средства, включая бензодиазепиновые транквилизаторы, психостимуляторы, антидепрессанты качественно отличаются в зависимости от фенотипа эмоционально-стрессового воздействия (Seredenm et al, 1986, 1994). Многочисленные данные указывают и на зависимость эффектов алкоголя от фенотипа эмоциональности ( Pohorecky, 1990, 1991; Crabbe, 1991; Little H.J. et al., 1999). Таким образом, очевидно, что разработка средств и методов фармакотерапии алкогольных расстройств требует обязательного учета наследственно контролируемых индивидуально-типологических особенностей личности, характеризующих эмоционально-стрессовое реагирование. Поэтому поиск антиалкогольных средств целесообразно уже в эксперименте начинать с использованием моделей, имитирующих эволюционно закрепленные типы ответа на стресс.
Удобным объектом таких исследований являются инбредные мыши С57В1/6 и Balb/c, крысы MNRA и MR, демонстрирующие активную и пассивную реакцию на эмоциональные стимулы ( Broadhurst P.L., 1975; Seredenin S.B. et al., 1986) и резко отличающиеся по алкогольной мотивации (Adams et al., 1991; Le A.D. et al., 1994).
В качестве средств лечения алкоголизма с разной эффективностью применяются препараты всех психофармакологических групп (Schaffer А, 1998). Наиболее очевидные результаты достигаются при назначении бензодиазепиновых транквилизаторов, однако, данный подход представляется тупиковым вследствие возникновения бензодиазепиновой
зависимости, сменяющей алкогольную ( Gatch М.В. et ai., 1998; Lejoyeux M, 2000). Эти клинически подтвержденные факты находят свое объяснение в вовлеченности ГАМК-А -бензодиазепинового рецепторного комплекса в механизме формирования алкогольной зависимости (Rassnick S. et al., 1993). Поэтому в целях психофармакологической регуляции эмоционального состояния для лечения алкоголизма могут оказаться полезными средства с анксиолитическим действием, не являющиеся лигандами к данному рецепторному комплексу.
Два нейрохимических решения последних лет определяют область поиска подобных препаратов.
К первому следует отнести выявление мембрано-зависимового падения уровня рецепции в бензодиазепиновом сайте ГАМК-А рецепторного комплекса, обусловливающего анксиогенез (Бледнов Ю.А. и соавт., 1990; Seredenin S.B. et al., 1995). Его предотвращение позволило получить селективное анксиолитическое действие (Seredenin S.B. et al., 1995; Яркова M.A., 1996). На основе этого открытия разработан препарат афобазол (Середешш СБ., 1998), успешно апробированный в клинике в качестве селективного анксиолитика (Незнамов ГГ., 2001).
Вторая группа препаратов возникла в связи с выявлением рецепторов холецистокинина в ЦНС, обозначенных как ССК-2. Установлено, что агонистические воздействия на ССК-2 рецепторы ведут к анксиогенному эффекту, в то время как антагонистические - к анксиолитическому. Среди антагонистов ССК-2 рецепторов наиболее активным представляется препарат GV150013 (Corsi М. Et al., 1995; Reggjani A. et al., 1995), синтезированный итальянскими учеными и фармакологически изученный научным центром компании GLAXO-WELLCOME (Верона) совместно с ГУ НИИ фармакологии РАМН (Kolik L.G. et al., 2001). В ГУ НИИ фармакологии РАМН осуществлен синтез ряда пептидных атагонистов ССК-2 рецепторов, анксиолитическая активность которых выявлена в скринивговых исследованиях.
Обнаружение антиалкогольных свойств вновь созданных анксиолитиков может дополнить арсенал психофармакологических средств для лечения алкоголизма.
Делыо настоящей работы является комплексное изучение анксиолитических и антиалкогольных свойств афобазола, GV150013 и вновь синтезированных соединений ГБ-101 и ГБ-115 у животных с активной и freezing реакциями на эмоциональный стресс. Задачи исследования:
1. В опытах на мышах С57В1/6 и Balb/c, крысах MNRA и MR изучиті анксиолитические свойства препаратов по тестам «открытое поле», «приподнять» крестообразный лабиринт» и «конфликтная ситуация».
-
Исследовать влияние ГБ-101 и ГБ-115 на спонтанную двигательную активность мышей Balb/c.
-
Изучить эффекты ГБ-101 и ГБ-115 на фоне введения агониста ССК-2 рецепторов.
-
Изучить влияние этанола на крыс MNRA и MR в психофармакологических тестах оценки транквилизаторов.
-
Исследовать межлинейные различия в динамике формирования алкогольной зависимости у крыс MR и MNRA.
-
Изучить антиалкогольные свойства исследуемых препаратов.
Научная новизна исследования.
Установлено, что вновь синтезированные соединения, антагонисты ССК-2 рецепторов ГБ-101 в дозах 0.05-0.5 мг/кг и ГБ-115 в дозах 0.006-0.1 мг/кг, обладают селективным шксиолитическим действием, не сопровождающимся гипноседативным, миорелаксирующим и амнезирующим эффектами. С использованием фармакологического шализатора доказана зависимость анксиолитического эффекта ГБ-101 и ГБ-115 от маимодействия с ССК-2 рецепторами.
Выявлена антиалкогольная активность афобазола (1.0 мг/кг), ГБ-101 (0.2 и 0.4 мг/кг) и ГБ-115 ( 0.0125 и 0.025 мг/кг) на стадии развившейся физической зависимости. Показано, тго изученные препараты не потенцируют действие этанола.
Впервые охарактеризованы особенности формирования алкогольной зависимости крыс-самцов линий MR и MNRA при 12-ти месячной алкоголизации.
Сформулированы научные положения о возможном применении афобазола, ГБ-101 и "Б-115 в качестве антиалкогольного средства.
Научно-практическая ценность.
Данные об анксиолигических и антиалкогольных свойствах ГБ-101, ГБ-115 и
фобазола включены в комплекты документов для представления новых
>армакологических препаратов в регистрационную палату Минздрава РФ.
На препараты ГБ-101 и ГБ-115 подана заявка на патент Российской Федерации, егастрационный №2001130750 от 15.11.2001. лробапия работы.
Результаты работы докладывались на 4-й Европейской конференции по биохимии, армакологии и поведению (Морзин, Франция, 2000), на 3-й Международной энференции ((Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным эепаратам» (Суздаль, Россия, 2001), на 1-й Американской конференции Фармакогенетика в психиатрии» (Нью-Йорк, США, 2002)
Структура и объем диссертации.
