Введение к работе
'.. ",,,.. .Актуальность темы. Из распространенных Фитопатогенов картофеля в Болгарии в последние несколько десятилетий особое значение приобрели вирусы. Их большое число - более 20 - и вегетативный способ размножения растения-хозяина являются важными предпосылками для увеличения пораженных вирусами растении и для резкого снижения урожаев. Потери достигают от 10-20 до 70-80% (Станков, Ковачевски и др. ,1980). в последние годы в литературе сообщаются новые данные о расширении ареала распространения и потерях, вызываемых А-вирусом картофеля (АБК). Вместе с тем в Болгарии до настоящего времени ке изучены биология, экология, эпидемиология и средства борьбы с ним.
Цель и задачи исследовании.
Цель исследований - изучить распространение, вредоносность, симптоматику и диагностику АЕК и разработать зффектИЕКыа методы борьбы с ним в Болгарии.
В задачу исследований входило изучение:
экологии АЕК и эпидемиологии болезни;
физических свойств Еируса и его биологических особенностей;
влияния АБК на некоторые метаболические процессы в больном растении картофеля;
действия биологически активных веществ с антивирусными свойствами на АВК в растениях;
разработка эффективных методов оздоровления картофеля и мер борьбы с АВК.
Научная новизна работы.
Впервые в Болгарии изучены ареал распространения, вредоносность, физические и биологические свойства изолятов АЕК, а таютэ экологические условия, способствующие накоплению вирусной инфекции на Т'"ргн;п-рйи Болгарии.
Установлены физколого-биохимические изменения ь растениях под влиянием АВК, характеризирущиеся подавлением фотосинтеза, нарушением бзлково-углеводного сібмена, индукцией защитных реакций, изменением активности ферментов. Впервые выявлены сопряженные изменения активности окислительно-восстановительных ферментов (пероксидаза, катала-за) и фитогормонов, связанные е количественными и качественными изменениями их компонентного, состава.
Показана высокая антивирусная активность новых синтетических регуляторов роста (о-фенилтиоуреидобензойная и алилтиоуреидобензойная кислоты),' полученных в Болгарской, академии наук.
Охарактеризованы распространенные и перспективные ' в Болгарии сорта картофеля по устойчивости к АВК.
Практическая ценность работы.
Результаты надах исследований дают основание отнести АВК к группе вредоносных вирусов. Данные по распространению, динамике накоплен ния АВК в растениях, симптоматике служат основой для разработки перспективных методов оздоровления и защиты семенного картофеля от АВК.
В целях повышения эффективности производства безвирусного исходного материала рекомендовано использование о-фенил- и алил- производных гиоуреидобензойной кислоты, обладающих высокой антивирусной активностью.
Выявлены сорта картофеля (Карина, Мондиал, Солара, Лизетта, Витал), обладающие высокой устойчивостью к АВК.
Апробация. Основные результаты диссертационной работы доложены на лаучно-методической конференции кафедры биохимии Болгарского аграрного университета (Шовд^ 1990) й на НТО Биотехнологического центра НИИ картофельного хозяйства Российской сельскохозяйственной академии (1991).
- Публикации. Основное содержание-работы отражено в Z публикациях.
Объем работы. Общий объем диссертация составляет '' страниц, включая ^о таблицы \\J. У рисунка. Список использованной литературы -196 наименований, в том числе /^"иностранных.
МАТЕРИАЛЫ И JCTOJTd
Исследования проводились в 1989-19 -1 гг. на базе Центральной опытной станции по сортоподдержанию и сортоиспытанию картофеля г. Пловдив, республика Болгария.
Основные эксперименты проведены на растениях картофеля сорта Вокал и табака сорта Самсун. Из всех этапах исследований определяли наличие вирусной инфекции методом иммуноферментного анализа (Й>А). Использовали "сэндвич" вариант ИФА (Clark, Adams,1976) с диагностическими наборами фирмы Boehringer Mannheim.
При проведении исследований использовали зараженные АШ растения картофеля, а в качестве контроля - элитные клубні!, полученные с использованием тканевых культур.
Схема посадки в поле - 70«30 см. Опыты закладывали в трехкратной позторности по сорок растений в каждой. Математическую обработку данных проводили при помощи персональной ЗВМ.
Изучение морфологических особенностей вируса проводили по методу BFandes (1957), Derrick (1973), Leseiran (І979), Кайтазова (1983), а физических свойств: точки температурной инйктизации, степени предельного разведения и стабильности инфекционного сока при комнатной температуре - по А. Е. Проценко (1966).
Содержание индольных ауксинов и гибберилішов определяли по Lang (1961) и Машеву (1977). Активность каталазы определяли по методу Баха и Опарина (Ермаков, 1972) и газометрически з аппарате Варбурга. Перок-сидазную активность устанавливали согласно метода, описанного Kami nek (1962), а также колориметрически с использованием субстрата р-диметил-фенилдиамин (Corvim, Giacomelli ,1960). ИзоферментныЯ сое-
- о -тав пероксидаз определяли с помощью диск-электрофореза по методике tlovasky, Hamton (1963), фотосинтетическую активность - в аппарате Еарбурга, а растворимый белок - по методу Lowry (1956).
Исследование количественного и качественного состава свободных и связанных аминокислот проведено согласно методике Stacrnan, Mur, Stoin (1958), Boason (1967) с помощью автоматического аминокислотного анализатора типа ЕАА 881.
Работу по оздоровлению картофеля in vitro проводили на питательной среде, по методике, предложенной Бинклер и Бутенко (1970) с добавлением синтетических регуляторов роста (о-ФГБ и АТБ) в концентрациях 1.0 и 1.5 мг/л.
Устойчивость распространенных и перспективных сортов к АВК картофеля проводили по методу de Bokx (1S76).
