Введение к работе
Актуальность проблемы. Изучение природи адаптации организмов ' к разнообразным факторам среди является одной из основних проблем современной биологии. Эта проблема не" может бить решена без учета генетических особенностей организма. Показано, что организмы с разнили генотипами обладают различной устойчивостью к стрессовым факторам (Шахбазов, I960 ; Шерешевская и др., 1977 ; Шахбазов и др. 1978; BuLderetaL., 1989).
Важную роль в механизмах адаптации играет клеточные мембраны. Особую актуальность приобретает изучение роли липидов в адаптивных реакциях клетки, так как они являются важнейшими структурными компонентами биологических мембран. В настоящее время интенсивно изучается фосфшшидний "состав биологических мембран (Дят-ловицкая и др., 1973; Іеменовская и др., 1976 ;Loni et aL, 1983 ; Sinqh et at., 1988 j j&aranslca, 1988). йиесте с тем, нейтральные-липиды, принимакщие участие в йормировакии. структуры мембран, изучены недостаточно, Не выяснены механизмы липицного обмена, в частности, внутриклеточный транспорт липидов при различных функциональных нагрузках..'
Обмен липидов в организме подвержен влиянию различных экзогенных факторов (Hutson et aL, 1985 ; Иванов и др., 1986; Hazel et d., 1986 ; Tij burg ef dl.,1988 ; Коломийцева, 1989, Ми-рахмедов и др.,1993). Влесте с тем,в литературе есть данные, которые указывают на го,что содержание липидных компонентов в организме обусловлено,как средовыми так и генетическими факторами (Кучияскене и др.,1986 j Ooucet etaL, 1987).
Исследование механизмов-гетерозиса позволило накопить большее количество данных по метаболизму многих веществ у гибридов и их родительских форм (Чечеткин, 1968 ( Карелина, 1974 ; Сарсенов и др., 1976 ;Бояков, 1981; Юерешевская и др., 1984). Однако, генетические аспекты липидаого обмена, особенно у животных организмов, остаются одной из наименее изученных генетических проблем.
Цели и задачи исследования. Целью работы явилось исследование генетических особенностей липицного обмена в клетках печени и зависимости обмена липидов от функционального состояния исследуемых клеток.
Исходя из цели, были определены слецуюдие задачи:
-
Изучить синтез и транспорт липидных компонентов клеток печени крно линии Вистар при регенерации и после локальной гипертермии печени.
-
Исследовать особенности липидного обмена в клетках печени крыс о разними генотипами.
-
Исследовать влияние ксенобиотика (препарат агляиоцеи) на липидный обмен в клетках печени крцс с разными генотипами.
-
Изучить связь липиднс_,о обмена микросом с активностью мембраносвязанного фермента глюкозо-6-фосфатазы клеток печени с учетом генотипа организма и функционального состояния органа.
Научная новизна. Установлено, что такие функциональные нагрузки как частичная гелагэктомяя и локальная гипертермия печени приводят к увеличению содержания общих липидов и изменению соотношений мевду различными фракциями липидов микросомальных мембран. При этих функциональных нагрузках происходит накопление липидов во фракции цитозодя.где содержание общих липидов в 2,3 раза больше в клетках регенарируищей печени и в 1,4 раза больше в клетках печени после локальной гипертермии по сравнению с таковым интактной печени. Показано, что липвдпереносящиа белки при данных функциональных нагрузках связывай в 2 раза больше липидов по сравнению с нормой.
Обнаружено, что изменение содержания липидов в микросомах регенерирупцей печени и печени после локальной гипертермии сопровождается изменением функциональной активности мембран эндо-плазмагаческого ретикулума, выраяаюцемся, в частности, в различной активности мембраносвязанного фермента глюкозо-6-фоофатаэы.
Выявлено, что микросомальные мембраны печени крыс с разными генотипами характеризуется различным уровнем содержания и удельной радиоактивности липидов» йбриды содержат меньшее количество общих липидов микросом по сравнению с крысами линии Август и не отличаются по этому показателю от крыс Линии Вистар. Обнаружены генетические различия в изменении липидного обмена микро-сом в ответ на действие ксенобиотика (препарат амнлоцен).
Основные положения* виносимые на защиту;
I. Функциональные нагрузки, такие как частичная гепатэкто-мия (13 часов после операции) и локальная гипертермия (45С, 10 минут) приводят к значительным изменениям липидного обмена в клетках печени крнс.
2. Генотип оказывает влияние на липиднцй обмен макросом клеток пэчени крыс.
Теоретическая я практическая значимость. Результати проведенных исследований имеет значение для раскрытия механизмов адаптации организма к разнообразным факторрм среды и, в частности, пониманию адаптивных возможностей организмов с разными генотипами.
Обнаруженнне изменения липидного обмена в клетках печени при функциональных нагрузках используются при испытании новых медицинских препаратов и могут бить учтены при оценке липидного обмена в случав патологии организма.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсукдены на Всесоюзной научное конференция по вспомогательным лекарственным препаратам (Харьков, 1982), на конференциях молодых ученых Харьковского госуниверситета (1984, 1986), на УІ съезде Украинского общества генетиков и селекционеров им,Н.И.Вавилова (Полтава, 1992).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ и одно изобретение.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит иэ введе-' ния, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, трех глав экспериментальной части, заключения, выводов, списка литературы, содержащего 204 наименования. Работа изложена на 138 страницах, включает 9 рисунков и 22 таблицы.