Введение к работе
Актуальность темы. До 2—3 % новорожденных имеют врожденные пороки развития /ВПР/. Они являются основным контингентом, в котором определяются хромосомные больные. Наиболее частой аутосомной болезнью является синдром Дауна. Однако, у младенцев больные иногда „скрываются" в графе ВПР, в старших возрастах — среди олигофренов. Из-за недостаточного объема цитогенетического обследования в Литве часть больных остается нераспознанными. Хромосомное исследование позволило уточнить диагноз, провести медико-генетическое консультирование, определить прогноз и тактику лечения. Исследование атавистических признаков позволяет объяснить причины фенотипичес-кого полиморфизма и соответственно — причины не всегда точного клинического диагноза.
Работа проводилась в соответствии с республиканскими и вузовскими планами. В 1986-90 г. она включена в НИР „Исследовать фенотипичес-кую экспрессию хромосомных болезней в контингенте больных синдромом Дауна", № гос. регистрации 01860051922. Тема научного исследования в аспирантуре за 1977 — 1991 г. — „Пороки развития хромосомных больных как следствие блокады онтогенеза."
Цель и задачи исследовании. Мы исходили из рабочей гипотезы, что фенотипический полиморфизм больных определяется неспецифической, блокадой онтогенеза: любой вредный фактор /в том числе и хромосомный дисбаланс/ может блокировать эмбриогенез, обуславливая атавистические признаки. У больных с клиническим диагнозом синдро-
/га Дауна проводилось кариологическое исследование, чтобы опреде-[ить частоту несоответствия клинического и цитологического диагноза. Г>енотипический полиморфизм, определяющий неправильный клинически диагноз, мы объясняли замедлением эмбрионального развития, из-;а которого увеличивается вариабельность микропризнаков, проявляючая в первую очередь там, где имеется семейное нарушение онтогенети-іеской канализации.
В исследовании ставились следующие задачи:
-
Зарегистрировать в Литве всех больных синдромом Дауна и ис-;ледовать у них кариотип. Исследовать кариотип у больных, направля-:мых на медико-генетическое консультирование.
-
Определить частоту эпиканта у больных синдромом Дауна и у (доровых детей, и динамику его инволюции с возрастом.
-
Изучить динамику физического развития у больных синдромом цауна.
-
В рентгенограммах зубов определить частоту тауродонтизма.
-
В рентгенограммах стопы исследовать аномалии развития скелета стопы у больных синдромом Дауна, их родственников и в контрольной группе.
Объем и методы исследования. Хромосомы исследовались полу-\іикрометодом в культуре лейкоцитов периферической крови /венозной, сапиллярной либо пуповинной/. Митозы индуцировались фитогемагглю-гинином производства Болгарии либо США. После трехсуточной индукции при 37 С и гипотонической обработки хлористым калием клетей фиксировались фиксатором Карнуа. Хромосомы красились на (7-ис-іерченность /иногда — на Q, С исчерченность и на импрегнацию серебром/. Для анализа подбиралось не менее 20 клеток с оптимальной степенью спиралнзации хромосом. В каждой культуре две метафазные тластинки зарисовывались. При обнаружении /либо подозрении/ аномалий кариотипа хромосомы микрофотографировались и кариотипи-зовались.
Основным объектом исследования были 543 больных синдромом цауна, у которых диагноз верифицирован определением добавочной '1-й хромосомы. Из них 191 выявлен в контингенте, направленном на ледико-генетическое консультирование, и 352 во время командировок jo все районные больницы, куда созывались больные с этим диагнозом. Физическое и интеллектуальное состояние пациентов исследовалось вра-іами клиницистами. Нами определялись часть физических признаков 'рост, эпикант, поперечные кожные складки на ладонях/ и некоторые іризнаки на рентгенограммах, сделанных в районных больницах.
Тауродонтизм исследовался на рентгенограммах зубов, сделанных тля 117 больных. В качестве контроля использованы 292 ортопантомо-раммы, сделанные для пациентов стоматологической клиники нашей ікадемии. Четыре признака — симфаланпш, брахимезофалангия, уве-шчеиие количества сезамовидных костей и укорочение IV метатарзаль-
ной кости — исследовались на рентгенограммах 140 больных синдромом Дауна и 368 их родственников. Контрольную группу составили 200 рентгенограмм стопы в травматологических отделениях Каунасских больниц.
При определении эпиканта, кожных складок на ладонях контрольные группы составляли студенты Академии, новорожденные нашей академической клиники, воспитанники Каунасских детсадов. Статистический анализ экспериментальных данных проводился в вычислительном центре Каунасской медицинской академии.
Научная новизна. Фенотипический полиморфизм хромосомных больных мы объясняли исходя из гипотезы, что хромосомный дисбаланс замедляет эмбриогенез и является неспецифическим фактором, способствующим манифестации атавистических признаков. Она подтверждена исследованием т. н. параклинических микроаномалий на рентгенограммах зубов и стопы. Фенотипический полиморфизм также может быть следствием провокации семейной мультифакториальной патологии, это подтверждается исследованием аномалий скелета стопы у родственников пробанда. Блокада онтогенеза хромосомным дисбалансом сказывается и в постнатальном развитии: на это указывает и замедленная резорбция эпиканта, и отставание в росте.
Научно практическая значимость. Окончательный диагноз синдрома Дауна ставится только после хромосомного исследования. Уточнение клинического диагноза цитогенетическим позволило оказать больным медико-генетическую консультацию. Частота неточных диагнозов при исследовании всех литовских больных была близка и таковой, определяемой в других странах. Однако, при регистрации больных оказалось, что только у 12 % имелись данные кариологического обследования — это указывает на недостаточный охват больных, нуждающихся в хромосомном анализе. Выявленные семьи с транслокационными вариантами представляют собой контингент для будущей пренатальной диагностики.
В обследованном контингенте встречались редкие и уникальные хромосомные конституции, которые важны не только для уточнения диагноза, но и для теоретических дискуссий о механизмах происхождения хромосомных аномалий. Комплексные и семейные хромосомные аномалии позволяют полагать, что риск повторения хромосомной болезни в 10 раз превышает популяционную частоту.
Накопленный в диссертации материал используется в педагогической работе со студентами Каунасской медицинской академии: для IV курса в цикле „Медицинская генетика"1, для I курса — „Общая генетика и медицинская биология".
Апробация работы и публикации. Основные положения работы докладывались и обсуждались на республиканской конференции Литовского общества генетиков и селекционеров /Вильнюс, 1988/, на 2-й республиканской школе, по генетике человека /Паневежис, 1989/, на 2-м Всесоюзном съезде медицинских генетиков /Алма-Ата, 1990/, на 6-м съезде
Литовского общества генетиков и селекционеров /Вильнюс, 1991/, принят доклад на 1-й съезд обществ генетиков и селекционеров Балтийских стран /Вильнюс, 1992/. Всего имеется 5 научных публикаций: три в тезисах конференций и съездов, одна — в сборнике статей, одна — в журнале „Свяйкатос апсауга".
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 130 страницах машинописного текста, включая рисунки, таблицы и список литературы. После введения и общей характеристики работы следуют две главы с описанием собственных исследований и заключения к ним, а также выводы. Библиография включает 229 источников литературы — 188 на английском языке, 21 — на русском, 6 — на литовском, 14 — на других языках.