Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время плодные ооолочки рассматривают как мощный адаптационный аппарат, обеспечивающий гомеостаз плода, наделенный способностью связывать, синтезировать и еы-сзобождагь биологически активные вещества. Большинство работ, посвященных этим проблемам, выполнено на амнионе млекопитающих. Амнион куриного эмбриона в последние годы не привлекал должного внимания, несмотря на то, что он обладает несомненными достоинствами для эспэркментальной работы в силу детальной изученности развития зародыша кур и легкости получения датированного материала. Кроме тоге, примечательно, что диффорекцировка его идет значительно быстрее, чем дифференцировка эмбриональных зачатков зародыша, период от закладки до начала дегенерации составляет менее двух недель.
В амниотической ткани на всем протяжения ее существования полностью отсутствуют нервные элементы (Pierce, 1932; Evans, Evans, 1964; Muller et al., 1983). Вместе с тем, известна чувствительность амниона куриного эмбриона к широкому спектру биологически активных веществ, в том числе к нейремедиаторам - аце'тилхолину, адреналину, серотонкну (Xangley, 1905; Baur, 1923; Ferguson, 1941, 1957; Ev-апз. Sohild, 1953;. Турпаев, Путинцева, 1957; Cuthbert, 1963, 1964; Bowers, 1989; Турпаев, Нечаева, 1990). Несшіапткческов физиологическое действие моноаминов и ацепиколина в безнервных тканях опосредуется взаимодействием их со специфичеегчми рецепторними структурами, во многом аналогичными по своим характеристикам рецепторам иннервироранных тканей. Однако особенности несинапти-чеоких функций нейротрансмиттершх систм и механизмов рєгуля.ди в ненервных тканях еще далеки от окончательной расшифровки.
Цель и задачи исследования. Учитывая вышесказанное, можно заключить, что амнион куриного эмбриона является перспективным объектом исследования медиатор-рецепторных взаимодействий в процессе развития неиннервированной провизорной ткани, представляющим возможность сопоставления характеристик функциональной активности медиаторных систем с изученной морфологической структурой гладко-мышечной ткани амниона при ее дифференцировкэ, созревании и дегенерации, а также с сократительной активностью амниона. В соответ-
ствии с гтим основная цель нашей работы заключалась в описании и характеристике холино- и моноаминергических систем амниона, а также изучения динамики их активности в ходе эмбриогенеза. Были поставлены следующие задачи:
I). исследовать действие ацвтилхолина, серотонина и катехоламинов ва изолированную полоску амниона куриного эмбриона, дать количественную оценку кинетических параметров этих реькций в процессе развитая амниона;
2). провести идентификацию к количественное определение катехоламинов в амнионе и амниотической жидкости;
3). дать количественную характеристику мускаряновым холинорецепто-рам амниона методом радиолигандного анализа по связыванию блокато-ра 3Н-»шуіслидиншібензилата;
4). долучить субстратно-ингибиторную характеристику холинэстеразь амниона, исследовать активность холинэстеразы.
Научная новизна и практическое значение работы. Впервые детально исследовано дейсгзие нейромедиаторов на амнион куриного гмбриона в процессе развития. Дана количественная оценка изменении в холино- и моноаминергических системах амниона в ходе эмбриогенеза. Полученный экспериментальный материал позволяет не только оценить функциональную роль каждой из исследованных нейротрансмиттер-ных систем в регуляции спонтанной сократительной активности амниона, но и предположить ее возможное значение в регуляции дифферен-цировки'и дегенерации амниотической ткани.
Выполненная работа может служить основой для развертывания практических исследований по изучений несинаптических регуляторних функций нейромедиаторов в процессе развития амниона, экспериментальные данные, полученные в результате проведения настоящей работы, .представляют интерес для физиологов, эмбриологов, гистохями-ков, фармакологов, исследующих медиаторные процессы.
Апробация работа и публикации. Основные материалы диссертации докладывались и обсувдались на Мевдународном совещании "Онтогёне-"'ічесі те и генеижо-эволюционнке аспекты нейроэндсфинной регуляции стресса" (Новосибирск, 1988); Всесоюзной конференции "Механизмы действия медиаторов и гормонов на эффекторные клетки" (Суздаль, ^989); ТІ Всесоюзной конференции ііо биохимии мыт- (Тбилиси, 1989); v Всесоюзной конференции "Физиология и биохимия медиаторных про-
цессоз" (Москва, 1930); Всесоюзном симпозиуме "Физиология медиаторов. Периферический синапс" (Казань, 1991).
По теме диссертации опубликовано 8 работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, изложения и обсуждения полученных результатов, заключения, выводов и списка цитированной литературы. Работа изложена на 145 страницах машинописного текста, содержит 9 таблиц и 29 рисунков. Список литературы включает 58 работ отечественных и 232 зарубежных авторов.