Введение к работе
Актуальность проблемы. Эпилепсия- огромная медико-биологическая и социальная проблема, значение которой с развитием наших знаний о работе головного мозга, психофармакологии и нейрохирургии не уменьшается а возрастает!
Эпилепсия - тяжелое психоневрологическое расстройство, включающее собственно эпилепсию, эпилептические синдромы и заболевания, связанные с судорожной активностью (Сперанский,1932; Penfield, Jasper, 1958; Gastaut, Fischer-Williams, 1959; Gloor, 1982; Давнденков, 1960; Болдырев, 1984; Карлов, 1990; Avoli, Gloor, Kostopoulos, Naquet, 1990; Селицкнй, 1991). Особенно тяжело она протекает у летен (Поповиченко, 1969; Земскова, 1971; Бэдалян, 1984; Бадалян, Таболин, Вельтищев, 1971; Яцук, 1985; Скворцоа и др., 1986 Boenigk, 1987; Gross-Sclbeck, 1989,1991).
Помимо снижения работоспособности существенным является развивающееся нарушение когнитивных функций ( Reinolds, Trimb!e,1988; Lezak,1991; Morston, Bezag, Binnie,Fowler,1993), поэтолг/ сложнейшей проблемой остается соотношение эпилепсии с психиатрическими заболеваниями (MajkoTrski,1993; Owczarek, Majkowski. 1993).
Материалы последних конгрессов Международной Протиеоэпнлептической
Лиги в Индии (1989) и в Норвегии (1993) показывают необходимость
фундаментальных физиологических исследований механизмов генеза этого
заболевания, разработку новых средств лечения.
40 миллионов больных эпилепсией в Мире нетрудоспособны, несмотря на проводимое медикаментозное лечение. По данным Лит ежегодно днагносцируется 30.000 новых больных эпилепсией, причем в 20 /о случаев приступы не удается контролировать, а 60 /о больных испытывают осложнения от ряда побочных эффектов лекарственной терапии. Особенно трудны случаи (обычно 2 из 10!), когда припадки не контролируются и резистентны к медикаментозной терапии (Wolf, 1993).
По новейшим данным опроса (1993, ILAE, Oslo) ведущих специалистов Европы н Америки (на сегодня з Америке более 2,5 миллиона больных эпилепсией) - 77% и 59% (соответственно) видят перспективу борьбы с эпилепсией в углубленном физиологическом исследовании и понимании природы эпилепсии.
Применение и дальнейшая разработка новых протиеосудорожных средств основывается в основном на представлениях о классических тормозных ГАМК-ергнческих медиаторных системах и природе возбуждающих медиаторов. Вместе с тем 2, 0 новые данные о трансмиттерной функции
неиропептидов и "континууме" их физиологических функций (Ашмарии, 1982,1987) открывают новую возможность в изучении и регуляции судорожной активности мозга (Крыжановский, 1980, Шандра ,1985; Крыжа- иовский, Луценхо, Карганов, Хлебникова, 1990; Чепурнов, Чепурнова, 1985, 1993; Чепурнов, 1988; Шакдра, Годлевский, Мазарати, 1989. 1993; Вастьяноа 1993). Иммунно-ферментный анализ пептидов в крови больных позволил открыть принципиально новый метод диагностики эпилепсии (Дамбинова,1992).
Применение пептидов, как противосудорожных средств, является частью общей проблемы подавления судорожной активности и моторных припадков с помощью веществ эндогенного происхождения, а также"вклк>чения" (активации) пептидами противосудорожных систем мозга.
Известно, что именно лнквор содержит "защитные" вещества, выделяющиеся мозгом при экспериментальном судорожном припадке (Tortefla, Long, 1985; Snead,1986; Draganov, 1986, Kryzhanovsky et al., 1989) и эпилепсии (Джанелидзе, 1982; Хачатрян, 1989; Скворцов, 1990). В этой связи важно подчеркнуть неослабевающий интерес медиков и экспериментаторов к изучению спинномозговой жидкости здорового и больного человека и ликворотерапии ( Фридман,1971; Макар з 1989; Einstein, 1982; Хачатрян, Рогулов, Яцук и др. 1989;, Васильева и др., 1989). Поэтому остается актуальным биологическое тестирования СМЖ и ее компонентов, применение фракций ликвора с лечебными целями.
Тиролибернн является важнейшим нейропептидом с большой перспективой расширенного применения в клинике (Ашмарии и др.,1992). Впервые в 1991г. на кафедре физиологии человека и животных МГУ были получены данные о его противосудорожном действии при интраназалыюм введении в условиях экспериментально вызванного судорожного синдрома у крыс (Ашмарии, Чепурнова, Чепурнов, 1992). Что касается применения не СП, а пептидов семейства тахикинннов, то за исключением работ выполненных в МГУ по нейрокинину и кассинину (Чепурнова, Аббасова, Кабанова, 1992; Кабанова, 1993), и данных по галанину (Mazaratty, 1993) в литературе сведений не имеется. Поэтому было актуальным изучить возможность применена пептидо данного семейства в качестве противосудорожного фактора.
Цель я задачи исследования. Исходя из вышеизложенного целями работы были:
выяснение противосудорожного действия неиропептидов тиролиберина и кассинина при экспериментально вызванной эпилепсии у живо г-
ных (пентилентетразоловая судорожная активность),
исследование противосудорожных свойств спинномозговой жидкости детен.больных эпилепсией, при ее внутрижелудочковом введении животным в условиях экспериментально вызванного судорожного синдромаЭто осуществлялось путем решения следующих задач:
-
Исследовать модификацию фармакологического шиллинга при дробном трехкратном введении пентнлентетразола.
-
Исследовать противосудорожные свойства тахикииина - кассинина при его системном зведений.
-
Исследовать противосудорожные эффекты тиролиберина при введении его интраиазалыю и при применении его в ультра малых дозах.
-
Исследовать возможность применения спинномозговой жидкости больных эпилепсией при ее внтурнжелудочковом введении в мозг как противосудорожного фактора.
Научная новизна исследования.
Впервые выявлены противосудорожные свойства кассинина - пептида семейства тахикининов, обладающего широким спектром действия на висцеральные функции. Эффект проявляется при системном введении.
Доказано, что интраназальное введение тиролиберина в ультра малых дозах до введения эпнлептогена оказывает протективное действий в отношении развития судорожной активности в ЭГ - гиппокампа и неокортехса. Оба нейропептида вызывают повышение судорожного порога у экспериментальных крыс, достоверно понижают выраженность моторной судорожной активности (в баллах по шкале П.Мареша).
Показано, что противосудорожные свойства ликвора больного эпилепсией человека сохраняются при достаточно длительном хранении и тестировании на животных с экспериментальным судорожным синдромом (пентилентетразоловые судорога). Эффект ликвора (при его интравептрнкулярлом введении) углубляется при сочетанном действии с противосудорожными средствами карбамазепинового' ряда.
Теоретическое н практическое значение.
В экспериментах на крысах предложена новая модель дробного последовательного введения эпилептогена (пентнлентетразола) в подпороговых дозах. Применение данной модификации фармакологического киндлинга позволило более дифференцированно оценивать судорожные пороги у экспериментальных животных и получить новые показатели протнво судорожной активности при сочетании эпилептогена н нейропептида.
Впервые показано, что касенннн (иейропептид семейства тахикининов - не
млекопитающих животных) обладает протнвосудорожным эффек
том при его системном введеіши; определены минимальные дозы его действия при внутрибрюшинном введении( < 100 mkg ).
Эти собственные данные по кассинину и известный, впервые полученный Г.Н.Крыжановским и соав. (1988) противосудорожный эффект СП, позволяют считать тахикинины новой группой нейропептидов перспективной для дальнейшего исследования и последующего клинического применения при эпилепсии.
Впервые показано, что тиролиберин может оказывать противосудорожное
действие на экспериментально вызванный судорожный синдром при
интраназальном введении. ТРГ оказывает эффективное противосудорожное действие, определяемое как по судорожным моторным припадкам, так и по предшествующим им эпилептиформной ЭГ-активности гиппокампа и неокортекса у крыс
Полученные данные, подтверждают принципиально новую концепцию академика И.П.Ашмарина об эндогенных регуляторах пептидной природы в организме, действующих в ультрамалых дозах. Впервые получены доказательства в отношении блокирования тиролибершюм вызванной судорожной активности.
Исс- дованы в условиях экспериментальной эпилепсии роль карбамазепина в разные периоды его накопления и выведения из организма. Получены первые обоснования перспективы применения карбамазепина при ликворотрансфузни.
Апробация работы.
Предварительные результаты исследования были доложены на Учредительном
Международном Конгрессе Патофизиологического общества в Москве (1991) и на
Психофармакологической конференции Чешского и Словацкого
Фармакологических обществ в Есениках, Чехия (1992).
Материалы диссертации докладывались на Международном симпозиуме по
эпилепсии: "Эпилептический Очаг" в Канаде (1991); на Международной
конференции по фармакологии памяти ОА-Апичкова "Фармакология на границе
двух тысячелетий", Санкт-Петербург, (1992); Международном Конгрессе
Пртнвозпилелтической Лиги в Норвегии, Осло (1993); на Международном Конгрессе по ультрамалым дозам во Франции, Бордо,1993 и на Европейской Конф. Невропатол. Наук в Германии, Берлин, 1993.
Объем и структура диссертации.