Введение к работе
1.1. Актуальность проблемы. настоящее время иммуногенетике
отводится ванная роль при изучении практических и теоретических
вопросов воспроизводства животных.прогнозирования продуктивных
качеств и естественной резистентности.
Особое практическое значение имеют иммунные факторы крови, антигены эритроцитов и белковые системы, которые успешно используются в селекционно-племенной работе во взаимосвязи с интерьер-кьши к экстерьерныыл показателями животных.Эритроцитарные антигены, благодаря кодоминангному типу наследования без доминантно-то и рецессивного типов, представляют удобную генетическую модель для изучения наследственных структур организма, популяций и пород.
Группы крови используются при изучении инбридинга и межпородного спаривания, а такие при совершенствовании линейного разведения (Тихонов В.Н., 196?* Ата-Курбанов 3#А** 1978, 1986; Сухова И.О., 1980; Казановский С*А* и Анфиногенова Т.А.,1984,1988, 1989;.Глазко B.li., 1985).
Антигенные факторы эритроцитов удобны для- экспертизы достоверности происхождения, контроля племенной документации,а такке для иммуногенетического контроля при купле-продаже, ввозе и вывозе животных. Кроме того иммуногенетические особенности животных учитываются при разработке биотехнологических методов, при создании вакцин и сывороток.-
1.2. Цель и задачи исследований. Цель наших исследований за
ключалась в обнаружении и определении корреляций основных про
дуктивных и биохимических показателей аиропота с различным ан
тигенными факторами эритроцитов у бвец Ставропольской породы.
Использование антигенных факторов эритроцитов как генетических
маркеров затруднено из^за недостатка моноспецифических сывороток.
Для достижения цели- были- поставлены следующие конкретные за-
4 дачи:
усовершенствовать негода иммунизации овец, используя одновременно внугрикокнуи) и вкугришшечну^ инъекции;
испытать стиыулирудщее действие препарата АСД-2 на анти-тедообразоваше;
получать ионоспецифические сыворотки дли определения групп крови;
определить антигенную характеристику по группам крови у овец итазропольской тонкорунной порода и сравнить ее с. характеристиками других тонкорунных пород, используя коноспецифические сыворотки к 16 эрмтроцитарным факторам: Аа, Ati , Ъё , Бс, hd ,Ве, В.. ., Bf , В? , Са, Си , Ма, ив , Da ,Л?, О;
изучить продуктивные и биохимические признаки жиропота у овец Г.Ц.З. "Советское руно"; . .
выявить у овец Ставропольской тонкорунной породы' возыовные связи между антигенными факторами эритроцитов и основными продуктивными и биохимическими показателями жиропота, характеризующими ' его защитный свойства. _.".' ч-. ._..
1.3. Научная новизна. Впервые .изучены внутрикокный и .одно-
временно внутриксжный и внутришшечныи.ие|оды:11«ьекц)1йлэритроц^-'
тарных антигенов для иммунизации' овёц^ ' ".'.:'';-'; :
Установлена взаимосвязь между зритроциїарнніщ'фенотйпаші и
качеством жиропота у баранов и.йвцеиаток'Ставропольской тонко -
рунной порода. .': ';['[ "'.';''.''./" -'..'-.'
Впервые дана характеристика основный баракам и овцематкам
плеьшдра Ставропольской тонкорунной породы Г^П.З. ^"Советское ру
но" по 16 антигенный факторам: Аа, А в , В в , Be, Brf , Be, Bt ,
В/ , В , Са, йб , Ма, Мб ,0а , /? и 0. 1 ;
1.4. Научно-практическое значение. Разработанный способ им
мунизации дает возможность путем одновременной внугрикожной и
внутримышечной инъекций суспензии эритроцитов получить более вы-сокогитражные сыворотки.
Установленные взаимосвязи некоторых эритроцигарных фенотипов . с лучшими защитными свойствами жиропота, а также выявленные факторы эритроцитов', .характерные для овец Ставропольской тонкорунной породы,-позволят в дальнейшей вести более направленную селекцион-но-пле ценную работу. ' .
1.5. Реализация результатов исследований. Но результатам исследовании выпущены 2 информационных листка (Ставропольским ЦН'Д.) и 2 -печатных работы" для внедрения новых методов и«\.;«униз-ации и использования антигенной характеристик!» по группам крови овец Ставропольской породы, с це"льв оказания помощи зооветеринарным специалистам,^ цолузеиш: внрокотйградных сывороток крови овец.
' Полученные..'результаты'исследовании были внедрены в госплеыза-водо -"Советское руно1,1-итавроиольсяого края.
\ --1.6. Апробация; исследование.. Материалы исследовании сбсувдены и одобрены на расширенном"заседании лаборатории иыьуногенетикк, биохииии.и обідей хиіши ВНШЖ (I9SI г.)ч на ученой совете Ставропольской 'Ш.аИ._'('і99І'г.,).-;
1,7; публикация'. '-По ыагеркадаы диссертационной работы опубликован о '.2 информационных листка и 3-статьи.
. 1.3. Объем'к структура работы. Диссертация изложена на 115 .страницах машинописного текста. Состоит из следующих разделов:. обзор литература, собственные исследования, обсуждение получелньх результатов, выводы, предложения производству и список использованной литературы, вклачающии 201 источник, из них 107 источников иностранных авторов.
Работа содержит 25 таблиц.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДІІКА ИССЩОВНлі;..<
Работа выполнена в лаборатории ишуког-енєтики jtfU'iGK в 1Ь*8 -3-I9SI годах, а также на базе госплеизавода (Гнй) "Советское руно" Ставропольского края, огштного хозяйства "Теїлнолессккй" Всесоюзного научно-исследовательского института овцеводства и козоводства с использованием донорского стада.
В эксперименте использованы овцы Ставропольской тонкорунной породы с нивой кассой 45-50 кг в количестве 172. голов,
Вначале были испытаны различные способы инъекций антигенов эритроцитов.
На сорока реципиентах испытали влияние на антителооо'разова-пііс таких способов введений антигена, как внутримышечный, знут-рпкохшші к одновременно инъекции 50;&-ной суспензии эритроцитов внутримышечно к внутрикожно. Параллельно изучено влияние на ан-тктелообразование антисептика биостимулятора А.Дорогова (АСД-2 фракция). Кровь брали от сеяи доноров.
все нквотние-реципиенгы <5ыли разделены на 4- группы по 10 го--лов в каждой.
На первой группе испытывали влияние на антигелообразовашіе комбинированного метода иммунизации (одновременная инъекция 50^-' ной суспензии эритроцитов знутришшечно и внутрикожно).
иммунизацию второй группы эритроцитами доноров проводили с лСд-фракция 2 (внутренней), которую вводили внутрикожно в дозе
І ІІЛ.
Третьа группу реципиентов иммунизировали эритроцитами доноров внутрикожно в дозе I мл.
Четвертуя группу использовали в качестве контроля и иммунизировали Енугришшечно.
і.і.'.ьулііксцПіО 50/і-ной взвесью эритроцитов осуществляли в следуй-
?
цих дозах: внутримышечно - 10 мл, внугрикожно - І мл.
Пары для иммунизации подбирали по антигенному составу.иммунизация реципиентов осуществлялась эритроцитами,трижды отмытыми изотопическим раствором натрия хлорида в количестве 10 мл в виде 50^-ной взвеси, четырехкратно а шестидневным интервалом.
Для приготовления суспензий эритроцитов,проверки наличия в сыворотке естественных и иммунных антител,а также их гатра,кровь из яремной вены (8-Ю мл) собирали в обычные бактериологические пробирки с консервантом.описанным в методач.указ. ВНИИОК, 198% г. (если кровь предназначалась для приготовления суспензий) и без него (при изготовлении сыворотки). Соотношение крови с консервантом 4:1.
От реципиентов,у которых подтвердилось наличие антител высокого титра (1:32 и выше),брали кровь в объеме 0,5-1/» от-массы тела.Полученную сыворотку.после инактивации при 5бС в течение 30 мин,сохраняли в низкотемпературных холодильниках при -20С.
Анализ нативных сывороток осуществлялся двумя серологическими методами: реакцией гемолиза по/І4''/уіяп-Soi&)4*n (1957) в модификации F Хи х. (1977) и агглютинации -/-Х»\ (1977). Абсорбция проводилась согласно методическим указаниям по изготовлению и контролю реагентов для определения групп крови у овец (1984).
Сыворотку для абсорбции и эритроциты подбирали по разнице в антигенных факторах.
Оценку генетической близости исследуемых популяций проводили по формулам расчета генетических дистанций по/^/, (1971), AfaJzicA (1971, 1976),Х$. Додегб 41972), Кизотовский (1973), В.Я.Мещеряков (1983).
От каждого из исследуемых животных Ставрогольской тонкорунной породы во время стрижки с бока отбирали образцы шерсти в количестве 100 г и после доставки в лаборатория,не позже чем через иеде-
8 лю исследовали по следущим показателяу: количество шерстного жиропота; соотношение лир/пот; числа: йодное, кислотное, перекис-ное, число омыления, эфирное число", рН пота; температура плавления; температура застывания; степень вымытости и загрязненности спины и бока.
Каждый показатель определяли согласно методическим рекомендациям по изучении биохимического состава и физико-химических констант шерстного жира (воска) и пота овец (ВНИМОК, 1987). Поскольку каждое животное было аттестовано по группам крови, это дало возможность осуществить корреляционный анализ между антигенными факторами крови и основными биохимическими показателями шерстной продуктивности, для чего был применен метод парных корреляций с вычислением коэффициентов корреляций на ЭВМ ЕС-І036.