Содержание к диссертации
Введение
1 Обзор литературы 17
1.1 Биологически активные вещества - регуляторы гомеостаза 17
1.1.1 Биологически активные вещества как компоненты биологически активных добавок 17
1.1.2 Роль биологически активных соединений в коррекции гомеостаза 20
1.1.3 Природные источники биологически активных соединений 23
1.1.3.1 Биомасса сине-зеленой микроводоросли Spirulina platensis 23
1.1.3.2 Шрот семян винограда 27
1.1.3.3 Шрот семян кунжута 29
1.1.3.4 Гуминовые вещества. Гумат калия 32
1.2 Концепция гоместаза 34
2 Собственные исследования 53
2.1 Материал и методы исследования 53
2.2 Краткая характеристика, использованных в экспериментах биологически активных добавок 66
2.3 Морфобиохимический состав крови крыс как физиологический критерий функционального состояния организма
2.3.1 Реактивные приспособления морфологического состава крови крыс к нагрузке биологически активными добавками 71
2.3.2 Реактивные приспособления биохимического состава крови крыс к нагрузке биологически активными добавками з Биохимический состав крови цыплят-бройлеров как один
из физиологических критериев функционального состояния организма 76
Исследование системы ПОЛ-АО печени крыс 82
2.5.1 Система ПОЛ-АО печени на фоне нагрузки биологически активными добавками 82
2.5.2 Ответная реакция системы ПО Л-АО печени половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном 88
2.5.3 Ответная реакция системы ПОЛ-АО печени здоровых половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в организм биологически активных добавок 90
2.5.3.1 Ответная реакция системы ПО Л-АО печени половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в организм биомассы спирулины 90
2.5.3.2 Ответная реакция системы ПОЛ-АО печени половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в организм шрота семян винограда 91
2.5.3.3 Ответная реакция системы ПО Л-АО печени половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в организм шрота семян кунжута 93
2.5.3.4 Ответная реакция системы ПОЛ-АО печени половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в рацион гумата калия 94
2.5.4 Сравнение гепатопротекторного эффекта биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия с эффектом эталонного антиоксиданта гепатопротектора Р-каротина 95
Реактивные изменения ткани печени крыс в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки БАД 100
2.6.1 Гистоструктурный анализ ткани печени крыс контрольной группы 100
2.6.2 Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки суспензией биомассы спирулины 104
2.6.3 Реактивные изменения ткани печени крыс
в результате нагрузки суспензией шрота семян кунжута 109
2.6.4 Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки раствором гумата калия 113
2.6.5 Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки суспензией шрота семян винограда 120
Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и развития их потомства в антенатальный и ранний постнатальныи периоды онтогенеза на фоне нагрузки биологически активными добавками 126
2.7.1 Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и развитие их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки биологически активными добавками 126
2.7.1.1 Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки шротом семян кунжута 127
2.7.1.2 Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки гуматом калия 134
2.7.1.3 Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки шротом семян винограда 141
2.7.1.4 Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины 148
2.7.2 Изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов потомства крыс в ранний постнатальныи период онтогенеза 154
2.7.2.1 Развитие и становление нервной системы крыс на фоне нагрузки шротом семян кунжута 155
2.7.2.2 Развитие и становление нервной системы крыс на фоне нагрузки гуматом калия 164
2.7.2.3 Развитие и становление нервной системы крыс на фоне нагрузки шротом семян винограда 172
2.7.2.4 Развитие и становление нервной системы крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины 181
2.8 Научно-хозяйственный опыт использования Б АД
при выращивании цыплят бройлеров и кур-несушек 191
2.8.1 Исследование влияния Б АД на изменение живой массы, степень накопления тяжелых металлов и микроэлементов в мясе, а также витаминов группы В в печени цыплят-бройлеров 191
2.8.2 Биохимический состав крови и яичная продуктивность кур-несушек на фоне нагрузки биологически активными добавками 196
3 Обсуждение результатов 201
Заключение 215
Практические рекомендации 219
Список использованных сокращений 220
Список литературы
- Биологически активные вещества как компоненты биологически активных добавок
- Краткая характеристика, использованных в экспериментах биологически активных добавок
- Ответная реакция системы ПОЛ-АО печени здоровых половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в организм биологически активных добавок
- Развитие и становление нервной системы крыс на фоне нагрузки шротом семян винограда
Введение к работе
Актуальность исследования. В связи с ухудшением экологической ситуации организм человека и животных, подвергаясь воздействию вредных факторов, вынужден постоянно мобилизовывать свои компенсаторно-приспособительные механизмы, резервы которых ограничены и со временем могут истощаться. Интенсивное и длительное воздействие экологически неблагоприятных факторов окружающей среды может вызывать перенапряжение и срыв адаптационных процессов организма. Гарантом выполнения жизненных процессов является гомеостаз включая механизмы регуляции. По современным представлениям (Вапняр В.В. Структура иерархической двухуровневой модели гомеостаза человека в определении роли неравновесной термодинамики и синергетики при инфекционном процессе // Успехи современного естествознания. - 2007. - № 7. - С. 43-45; Кулаев Б.С. Эволюция гомеостазиса в биологическом пространстве - времени. - М.: Научный мир, 2006. - 229 с), гомеостаз целостного организма определяется деятельностью различных функциональных систем, результатом которых являются гомеостатические константы. Перестройка систем гомеостаза может осуществляться двумя путями: как изменением структуры включенных механизмов систем регулирования, так и изменением допустимого диапазона регулируемых констант.
Использование биологически активных добавок (БАД) открывает широкие возможности для модуляции физиологических процессов в организме. Использование БАД из природного сырья повышает резистентность организма, облегчает клиническое течение многих экологически обусловленных заболеваний и практически не имеет негативных побочных эффектов. В настоящее время ведется интенсивный поиск новых биологически активных веществ - ан-тиоксидантов, способных поддерживать гомеостаз. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия - субстанции природного происхождения, которые нашли достаточно широкое применение в животноводстве и птицеводстве в качестве премиксов и кормовых добавок, а также в ветеринарии в качестве средств профилактики и лечения экологически обусловленных заболеваний домашних животных. Имеются данные об их использовании в качестве БАД и компонентов лекарственных препаратов, применяемых для человека, однако весь спектр биологической активности их компонентов не раскрыт. В связи с этим необходимы исследования, дополняющие и вносящие новые сведения о потенциальных положительных эффектах биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции гомеостаза организма.
Степень разработанности проблемы. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия являются достаточно известными субстанциями и нашли широкое применение в различных отраслях птицеводства и животноводства (Белова Н.Ф. Использование биологически активных веществ в кормлении цыплят-бройлеров // Материалы международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов. - Воронеж, 2008. - С. 111-112; Влияние препаратов спирулины на качественные показатели мяса бройлеров / С.А. Тимофеевская // Пищевая и перерабатывающая промышленность. Реферативный журнал. - 2007. - № 4. - С. 1257; Майорова Ж.С. Гумат калия в рационах цыплят-бройлеров / Инновационные направления и методы реализации научных исследований в АПК // Сборник научных трудов преподавателей и аспирантов Рязанского государственного агротехнического университета имени П.А. Костычева. - Рязань, 2012. - С. 222-225). Они не токсичны, не обладают аллергизирующими и тератогенными свойствами. В литературе имеются данные об использовании биомассы спирулины в качестве средства повышения выносливости при физических нагрузках, доказано, что она обладает выраженной противоопухолевой и противовирусной активностью (Первушкин СВ. Биомасса спирулины: исследования и перспективы использования : монография / СВ. Первушкин, А.В. Воронин, А.А. Со-хина. - Самара : СамГМУ, 2004. - 100 с). Гумат калия является средством активации обмена веществ и проявляет высокую сорбционную способность, препятствует накоплению тяжелых металлов и токсинов в организме (Механизм действия гуминовых кислот /B.C. Бузлама, В.Н. Долгополов, А.В. Сафонов, СВ. Бузлама // Итоги и перспективы применения гумино-
вых препаратов в продуктивном животноводстве, коневодстве и птицеводстве: всероссийская конференция, Москва, 21 декабря 2006 г.: сб. науч. тр. - М., 2006. - С. 24-35.). Гумат калия обладает высокой антибактериальной и противовирусной активность, обладает иммуностимулирующим эффектом за счет активации фагоцитоза и выраженным эрготропным эффектом. Установлено, что шрот семян винограда обладает выраженным антиоксидантным действием, является гипотензивным средством, кардиопротектором и онкопротектором (Биологически активные соединения винограда: перспективы производства и применения в медицине и питании / В.М. Монченко [и др.] // Мат. международной, научно- практической конференции. - Симферополь, 2001. - С. 7-15). Шрот семян кунжута является желчегонным средством, улучшает свертываемость крови (Большакова И.В. Антиоксидантные свойства ряда экстрактов лекарственных растений / И.В. Большакова, Е.Л. Лозовская, ИИ. Сапежин-ский // Биофизика. - 1997. - Т. 42. - Вып. 2. - С. 480-483).
Биомассу спирулины и гумат калия используют в качестве средств повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, но без учета особенностей их влияния на организм. Известно, что богатый минеральный состав и ценный набор биологически активных соединений, содержащихся в биомассе спирулины, шротах семян винограда и кунжута, а также гумат калия, способен обеспечивать более глубокое и равновесное воздействие на функциональную активность организма, и вследствие этого сочетать высокий терапевтический эффект с минимальным спектром противопоказаний к применению. В литературе отсутствуют данные об изменениях морфологического и биохимического состава крови крыс и цыплят-бройлеров на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гумата калия в сравнительном аспекте. Несмотря на важную роль системы перекисного окисления липидов - антиоксидантов (ПОЛ-АО) в регуляции гомеостаза в организме не изучена ее ответная реакция на нагрузку биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия в норме и при оксидативном стрессе. Нет сведений о сравнительном анализе с эталонными гепатопротекторами эффективности применения изучаемых субстанций в коррекции оксидативного стресса. Отсутствует гистологическая оценка изменений ткани печени животных в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза, возникающих в результате внутрижелудочной нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия. Не изучены ответные реакции репродуктивной системы животных и особенности развития их потомства в антенатальном периоде онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия. Не изучены процессы становления сенсорно-двигательных рефлексов у животных в ранний постнатальный период онтогенеза, родившихся от самок, получавших внутрижелудочно указанные субстанции природного происхождения. Отсутствуют исследования по применению шротов семян винограда и кунжута при выращивании цыплят-бройлеров и кур- несушек. Все это сдерживает широкое использование указанных субстанций в качестве биологически активных добавок в ветеринарии и при откорме животных. Поэтому, данная проблема требует более глубоких научных исследований, раскрывающих благотворное действие биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия на организм животных.
Цель и задачи исследования. Цель - изучение роли биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции гомеостаза организма животного.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
-
изучить изменения морфобиохимического состава крови животных на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гумата калия;
-
исследовать ответную реакцию системы ПОЛ-АО печени крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия и сравнить их эффективность с эталонным антиоксидантом Р-каротином;
-
выявить реактивные изменения ткани печени крыс в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия;
-
изучить ответную реакцию репродуктивной системы крыс и развитие их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия;
-
исследовать процесс становления сенсорно-двигательных рефлексов в ранний постна-тальный период онтогенеза у крысят, рожденных от самок, получавших биомассу спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия;
-
изучить возможности применения БАД для выращивания цыплят-бройлеров и повышения качества яиц кур-несушек.
Научная новизна результатов исследования. Впервые в сравнительном аспекте изучены основные морфологические и биохимические составляющие крови крыс и цыплят-бройлеров на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия. Установлено, что при длительном внутрижелудочном поступлении в организм крыс биомассы спирулины в дозе 10 мг/100 г массы тела животного в крови увеличивается количество эритроцитов на 21,1 %, концентрация гемоглобина - на 21,9 %, количество лейкоцитов - на 13,1 %, палочкоядерных нейтрофилов - на 27,1 % и снижается количество эозинофилов - на 9,5 % по сравнению с контролем. Биохимический состав крови крыс на поступление биомассы спирулины отвечает достоверным увеличением концентрации общего белка на 12,9 %, альбуминов - на 10,6 %, аг-глобулинов - на 20,0 % и снижением концентрации у-глобулинов - на 15,8 % (р < 0,05).
На внутрижелудочную нагрузку шротом семян винограда в течение 35 суток в дозе 10 мг/100 г массы тела организм крыс отвечает увеличением количества эритроцитов в крови на 24,0 %, концентрации гемоглобина - на 32,4 %, палочкоядерных нейтрофилов - на 31,2 % и сегментоядерных нейтрофилов - на 12,0 %, а также снижением количества моноцитов - на 20,4 % по сравнению с контролем. Эффект воздействия шрота семян винограда на биохимический состав крови крыс наиболее ярко проявляется увеличением количества альбуминов на 13,9 % и снижением концентрации у-глобулинов на 11,8 % (р < 0,05).
Нагрузка шрот семян кунжута при равных условиях увеличивает количество эритроцитов в крови на 13,3 %, концентрацию гемоглобина - на 15,2 %, а в лейкоцитарной формуле, по сравнению с контролем, снижет количество моноцитов на 9,6 %, при этом биохимический состав крови крыс не претерпевает существенных изменений (р < 0,05).
Организм крыс на длительное поступление гумата калия в дозе 10 мг/100 г массы тела животного отвечает увеличением в крови количества лейкоцитов на 15,3 %, палочкоядерных нейтрофилов - на 18,2 %, снижением количества эозинофилов на 20,4 % и количества моноцитов - на 15,0 %, повышает концентрацию общего белка на 14,1 %, альбуминов - на 16,6 %, аг-глобулинов - на 12,7 % и снижает количество у - глобулинов на 30,3 % (р < 0,05).
Нагрузка биомассой спирулины цыплят-бройлеров в течение 35 суток вызывает увеличение в сыворотке крови количества а - глобулинов на 17,6 % и у-глобулинов на 32,9 %, снижает количество Р-глобулинов на 18,3 % и концентрацию Р-липопротеидов на 25,96 %, увеличивает концентрацию холестерина на 88,02 %, аспартатаминотрансферазы (АсАТ) - на 29,54 %, аланинаминотрансферазы (АлАТ) - на 41,79 %, кальция - на 50,96 % и фосфора -на 25,33 %(р< 0,05).
Длительная нагрузка гуматом калия способствует увеличению количества а-глобулинов на 22,3 % и у-глобулинов на 20,7 %, снижает концентрацию Р-липопротеидов на 31,99 % и пировиноградной кислоты (ПВК) на 14,79 %, увеличивает концентрацию холестерина на 63,02 %, АлАТ - на 16,49 %, кальция - на 38,22 % и фосфора - на 19,21 % (р < 0,05).
Организм цыплят-бройлеров на поступление шрота семян винограда в течение 35 суток отвечает увеличением количества у-глобулинов на 16,7 %, снижением концентрации Р-липопротеидов на 38,19 % и ПВК на 37,24 %, увеличением концентрации холестерина на 57,80 %, АсАТ - на 18,62 %, кальция - на 72,58 % и фосфора - на 27,94 % (р < 0,05).
Шрот семян кунжута при равных условиях поступления в организм способствует увеличению в сыворотке крови цыплят-бройлеров концентрации общего белка на 13,3 %, количества а-глобулинов на 15,5 % и у-глобулинов на 33,9 %, снижает количество Р-глобулинов на
19,4 %, концентрацию Р-липопротеидов на 34,64 % и ПВК на 30,07 %, увеличивает концентрацию холестерина на 54,17 %, АсАТ - на 13,16 %, АлАТ - на 27,47 %, кальция -на 61,77 % и фосфора - на 15,22 % (р < 0,05).
Впервые проведена оценка системы ПОЛ-АО на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия в норме в различных дозах и на модели оксидативного стресса в сравнении с эталонным антиоксидантом Р-каротином. Установлено, что нагрузка организма крыс биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия в дозе 5, 10, 15 и 20 мг/100 г массы тела не вызывает негативных изменений в системе ПОЛ-АО печени. Определена оптимальная дозировка 10 мг/100 г массы тела для применения биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия. Выявлено, что данные природные субстанции обладают противотокси-ческими свойствами, способствуя нормализации гомеостаза в системе ПО-АО в состоянии оксидативного стресса.
Впервые на гистологическом уровне изучено становление структуры печени, явления апоптоза и пролиферации на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия. Установлено, что на фоне нагрузки биомассой спирулины у эмбрионов печень более продолжительное время сохраняет роль органа кроветворения, увеличивается число митотически делящихся гепатоцитов и количество слоев клеток наружной терминальной пластинки. На фоне нагрузки шротом семян кунжута на 21 сутки эмбриогенеза в ткани печени отмечается усиленная пролиферация клеток желчевыводящих протоков и их расширение, удлиняются сроки эритропоэза у плодов до момента рождения.
На длительную нагрузку гуматом калия ткань печени эмбрионов отвечает ускоренным формированием печеночных балок и угнетением эритропоэза, отмечено наличие двуядерных и полиплоидных гепатоцитов, особенно выраженное в центральной части долек печени.
На нагрузку суспензией шрота семян винограда, ткань печени крыс отвечает отсутствием ингибиторов апоптоза в гепатоцитах периферической части долек печени, что проявляется повышением синтетической активности клеток, синтезирующих альбумины и другие белки плазмы крови, усиливается пролиферация клеток центральной части органа.
Впервые доказано отсутствие патологического действия биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия на репродуктивную систему самцов и самок и на развитие их потомства в антенатальном периоде. Доказано отсутствие отрицательного действия биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия на становление сенсорно-двигательных рефлексов у крыс в ранний постнатальный период онтогенеза. Биологически активные добавки в организме крыс приводят к увеличению среднего количества крысят в помете; снижению общей смертности эмбрионов, увеличению массы и кранио-каудального размера плодов, а также средней массы плаценты, изменяют динамику созревания сенсорно-двигательных рефлексов и уровень предметного действия, связанный с мелкой моторикой и эмоциональной сферой.
Доказано, что БАД в организме цыплят-бройлеров способствуют в разной степени увеличению массы тела и снижению накопления тяжелых металлов в мышцах, повышению концентрацию каротина в сыворотке крови и накоплению витаминов А и В 2 в тканях печени. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута в организме кур-несушек способствуют повышению содержания общего белка в сыворотке крови и концентрации кальция и фосфора в зависимости от длительности поступления в организм. На фоне нагрузки БАД отмечается увеличение массы кур-несушек, массы и плотности яиц, содержания питательных веществ в яйце, а также утолщение скорлупы.
Теоретическая значимость работы. Установлена роль биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции функциональных составляющих гомеостаза животных. Результаты нашего исследования обогащают информацию о роли биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в регуляции процессов в организме, дополняют известную и вносят новое в теорию влияния БАД на организм животных, раскрывают возможности использования их в производстве животновод-
ческой продукции. Полученная информация может быть использована в учебном процессе при изучении таких дисциплин, как физиология, этология и экология, а также в практических целях в ветеринарии и птицеводстве.
Практическая значимость. Результаты исследований физиологически обосновывают возможность применения биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в регуляции гомеостаза и целесообразность их использования при откорме цыплят-бройлеров и выращивании кур-несушек.
Методология и методы исследования. Изучение роли биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции гомеостаза проведено стандартными общепринятыми гематологическими, биохимическими, гистологическими и физиологическими методами.
Предметом исследования служила ответная реакция организма крыс, цыплят-бройлеров и кур-несушек на введение биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия. Объектами исследования служили белые беспородные крысы, цыплята-бройлеры и куры-несушки.
Цифровой материал экспериментов подвергали статистической обработке с определением критерия Стьюдента с использованием программы Sigma Stat 6.0.
Основные положения, выносимые на защиту:
биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия, как биологически активные добавки являются активными регуляторами гомеостаза.
биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия при внутреннем введении в организм восстанавливают нарушенное равновесие в системе ПОЛ-АО печени.
реактивные изменения структуры ткани печени крыс в антенатальном и раннем пост-натальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки БАД характеризуются разнообразными проявлениями, зависящими от биологической активности биомассы спирулины, шрота семян винограда, шрота семян кунжута и гумата калия.
потомство крыс, получавших биологически активные добавки, по сравнению с контролем, отличается большим количеством и массой тела, размерами и ускоренным проявлением сенсорно-двигательных рефлексов.
биологически активные добавки в организме цыплят-бройлеров способствуют в разной степени увеличению массы тела и снижению накопления тяжелых металлов в мышцах, повышению концентрацию каротина в сыворотке крови и накоплению витаминов А и Вг в тканях печени. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута и гумат калия у кур-несушек способствуют, в разной степени, повышению содержания общего белка и концентрации кальция и фосфора в сыворотке крови, увеличению веса и плотности яиц, повышению содержания питательных веществ в яйце и утолщению скорлупы.
Степень достоверности и апробация результатов научных исследований. Цифровой материал экспериментов подвергали статистической обработке с определением критерия Стьюдента с использованием программы Sigma Stat 6.0.
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на XXXIV научной конференции студентов и аспирантов (Самара 2007); Медико-фармацевтическом конгрессе, 14-й Международной фармацевтической выставке «Аптека 2007» (Москва, 2007); Всероссийской научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы развития пищевой промышленности и общественного питания» (Челябинск 2007); Всероссийской научно-технической конференции «Современные сервисные технологии» (Самара 2007); «IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы развития транспортного комплекса» (Самара, 2008); «III Всероссийской научно-практической конференций «Процессы, технологии, оборудование и опыт переработки отходов и вторичного сырья» (Самара 2008); «XIII конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, 2008); «IV Всероссийской конференции с международным участием «Медико-физиологические проблемы экологии человека» (Ульяновск, 2011); «Российской научно-практической конференции
«Наука, образование, медицина» «Самара, 2011); «Региональной научно-практической межвузовской конференции «Актуальные задачи ветеринарии, медицины и биотехнологии в современных условиях и способы их решения»» (Самара, 2013); «Шестой международной научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине»» (Санкт-Петербург, 2014); «VII Международной научно-практической конференции «Теория и практика актуальных исследований» (Краснодар, 2014); «Proceedings of the 2n European Conference on Biology and Medical Sciences» (August, 2014); «Международной конференции, посвященной 85-летию Самарской научно-исследовательской ветеринарной станции Российской академии сельскохозяйственных наук «Актуальные проблемы развития ветеринарной науки» (Самара, 2014).
Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедре физиологии и патофизиологии ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия имени Н.Э. Баумана», кафедре ботаники, общей биологии, экологии и биоэкологического образования ФГБОУ ВПО «Поволжская государственная социально-гуманитарная академия», на кафедре биоэкологи и физиологии сельскохозяйственных животных ФГБОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия», на кафедрах медико-биологических дисциплин и естественнонаучных дисциплин ЧУООВО «Медицинский университет «РЕАВИЗ». Результаты исследования и методические рекомендации по выращиванию сельскохозяйственной птицы внедрены в производство в компаниях ООО «Эмульсионные технологии» и ООО «Доминант».
По теме диссертации опубликовано 56 научных работ, из которых 26 - в рекомендуемых ВАК изданиях.
Биологически активные вещества как компоненты биологически активных добавок
С развитием человеческого общества меняются не только потребности в широком спектре, от материальных до тенденции фактического изменения сроков биологического существования индивидуума, изменяется доступность ресурсов и куль-туральные особенности их использования. При видимом расширении спектра доступных ресурсов, по факту в целом ряде случаев мы имеем сужение их применения. В первую очередь мы говорим об элементах питания, которые с каждым годом исчезают из употребления, так официально в России используется 41 пищевая культура, а реально потребляется всего лишь 27 видов пищевых растений [7, 13, 29, 46,49].
Таким образом, факт, что современное общество стало индустриальным и высоко урбанизированным, отнюдь не снизил уровень дефицита и необходимость потребления биологически активных соединений, удовлетворяющих основные потребности организма.
Эмпирический и культовый поиск различных природных компонентов растительного, животного и минерального происхождения и их применение с профилактическими и лечебными целями известны с глубокой древности. Еще во II в. н. э. древнеримским врачом Клавдием Галеном были впервые разработаны технологические приемы изготовления лекарств (настоев, экстрактов, порошков) из природного сырья [29, 113]. По мнению нутрициологов, удовлетворить основные потребности организма в биологически активных веществах можно с помощью биологически активных добавок [29, 49, 64, 99, 173, 231].
Биологически активные добавки к пище - это природные или идентичные природным биологически активные вещества, предназначенные для употребления с пищей или введения в состав пищевых продуктов [29, 164, 205, 243].
По одной из классификаций биологически активные добавки подразделяются на нутрицевтики, парафармацевтики и эубиотики [148, 164].
Нутрицевтики - это БАД, применяемые для коррекции химического состава пищи человека и животных. Они представляют собой эссенциальные нутриен-ты - природные ингредиенты пищи: витамины и их близкие предшественники (например, бета-каротин и другие каротиноиды); полиненасыщенные жирные кислоты, омега-3 и другие ПНЖК; макро- и микроэлементы (кальций, железо, селен, цинк, йод, фтор и др.); отдельные аминокислоты; некоторые моно- и дисахариды; пищевые волокна (целлюлоза, пектин и т.п.).
Использование БАД данного вида позволяет: легко и быстро ликвидировать дефицит эссенциальных пищевых веществ; индивидуализировать питание конкретного человека или животного в зависимости от потребностей организма, существенно отличающихся не только по полу, возрасту, интенсивности физической нагрузки, но и в связи с генетически обусловленными особенностями биохимической конституции отдельного индивидуума, его биоритмами, физиологическим состоянием (беременность, лактация, эмоциональный стресс и т. п.), а также экологическими условиями зоны обитания; удовлетворить измененные физиологические потребности в пищевых веществах больного и по принципу метаболического шунтирования - обойти поврежденное патологией звено метаболического конвейера; повысить, за счет усиления элементов ферментной защиты клетки, неспе цифическую резистентность организма к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды; усилить и ускорить связывание и выведение ксенобиотиков из организма; направленно изменить путем воздействия, прежде всего, на ферментные системы метаболизма ксенобиотиков промежуточный обмен отдельных веществ, в частности токсикантов.
Иными словами, применения БАД-нутрицевтиков является эффективной формой первичной и вторичной профилактики многих хронических заболеваний [164,205,243].
Парафармацевтики - это БАД к пище, применяемые для профилактики, вспомогательной терапии и поддержки в физиологических границах функциональной активности органов и систем. Они как правило, являются минорными компонентами пищи: органические кислоты, флавоноиды, кофеин, биогенные амины, регуляторные ди- и олигопептиды, некоторые олигосахариды и многие другие, так называемые, натурпродукты.
Использование парафармацевтиков открывает безопасный немедикаментозный путь регулирования, поддержания функций отдельных органов и систем организма, то есть поддержания гомеостаза организма.
Широкое применение БАД парафармацевтического ряда расширяет адаптационные возможности организма человека и животного в условиях постоянно нарастающего техногенного, физического, химического и эмоционального стресса [164,205,243].
Пробиотики (эубиотики) представляют собой живые микроорганизмы и (или) их метаболиты, оказывающие нормализующее действие на состав и биологическую активность микрофлоры желудочно-кишечного тракта.
Большинство специалистов и исследователей относят к пробиотикам - эу-биотикам представителей нормальной микрофлоры кишечника, бифодобактерии и молочнокислые микроорганизмы рода Lactobacillus.
Пробиотики оказывают нормализующее воздействие на состав и биологическую активность микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Концепция оздоровления организма при помощи кисломолочных продуктов впервые была выдвинута почти сто лет назад выдающимся русским ученым И. И. Мечниковым. По его мнению, молочнокислые микроорганизмы способны проявлять антагонистиче 20 ские свойства к гнилостной микрофлоре желудочно-кишечного тракта, выводить ее из организма, предупреждая всасывание в кровь токсических метаболитов. Эта концепция послужила толчком для практического применения микроорганизмов, входящих в состав нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта, с целью коррекции различных нарушений микробиоценоза человека и животных, вызванных чрезмерным применением антибиотиков, ухудшением экологической обстановки, неправильным питанием, стрессом и другими факторами [164, 205, 243].
Краткая характеристика, использованных в экспериментах биологически активных добавок
Исследование реактивных изменений гематологических показателей цыплят-бройлеров на фоне нагрузки биологически активными добавками проводили на базе ФГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия» на 5 суточных цыплятах кросса Иза s 15 в количестве 250 особей, которые были разделены поровну на 5 групп: 1 группа - интактные птицы, 2 группа - получала биомассу спирулины, третья - гумат калия, четвертая - шрот семян винограда, пятая - шрот семян кунжута. Материалы исследования на протяжении всего эксперимента добавляли в рацион в дозе 10 мг/100 г массы цыпленка. Из каждой группы на 35 день эксперимента методом случайной выборки отбирали по 10 цыплят, у которых брали кровь из подкрыльной вены для определения концентрации общего белка и его фракций, Р-липопротеидов, холестерина, АсАТ, АлАТ, глюкозы, ПВК, кальция и фосфора.
Общий белок определяли методом Козлова А.В., Слепышовой В.В. Содержание альбуминов и фракций глобулинов определяли рефрактометрически. Содержание Р-липопротеидов оценивали методом М. Буштейна. Холестерин определяли методом Ильке. Определение активности аланинаминотрансферазы и ас-партатаминотрансферазы проводили с использование стандартного набора реактивов унифицированным методом Райтмана - Френкеля. Глюкозу определяли колориметрически методом М. Самоджи. Определение ПВК проводили методом П.М.Бабаскина. Концентрацию кальция определяли по Де-Ваарду, концентрацию фосфора - по Бригсу [73, 74, 127, 238].
Изучение функциональной активности системы ПОЛ-АО печени крыс на фоне нагрузки биологически активными добавками в различной концентрации у клинически здоровых животных осуществляли на 170 белых беспородных крысах-самцах одного возраста, массой 190-210 г. Крыс содержали в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. Животные были разбиты на 17 групп, по 10 крыс в каждой (таблица 5). Эксперимент проведен в трех по-вторностях.
Образцы БАД вводили однократно в желудок с помощью зонда в виде суспензии (гумат калия в виде раствора), приготовленной на воде дистиллированной в соответствующей концентрации, объемом 1 мл ежедневно в течение 30 дней. На 31 день крыс убивали в соответствии с этическими нормами методом декапи-тации, затем проводили извлечение печени, промывали физиологическим раствором и замораживали. Гомогенат готовили механическим измельчением ткани печени массой 1 г с 9 мл трис-буфера (рН 7,4), со скоростью 5000 об/мин в сосуде с двойными стенками, постоянно охлаждаемым проточной водой [215]. В гомогенатах определяли активность АсАТ, АлАТ, СОД, каталазы, ГП и концентрацию малонового диальдегида [73, 74, 125, 127, 238].
Определение активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотранс-феразы проводили с использование стандартного набора реактивов унифицированным методом Райтмана - Френкеля. Определение активности каталазы проводили по стандартной методике Королюка М.А. [109]. Определение активности глутатионпероксидазы осуществляли по методу В.М. Мойн [125, 127]. Активность супероксиддисмутазы определяли по методу B.C. Гуревича и соавторов [238, 124]. Концентрацию малонового диальдегида определяли по методу Рогожина В.В. и соавторов [106, 127].
Изучение функциональной активности системы ПО Л-АО печени крыс на фоне нагрузки биологически активными добавками в состоянии оксидативного стресса в сравнении с эталонным антиоксидантом Р-каротином осуществляли на 70 белых беспородных крысах-самцах массой 190-210 г. Как и в предыдущем эксперименте все крысы были половозрелыми, одного месяца рождения. Крыс содержали в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и корму. Животные были разделены на 7 групп, по 10 крыс в каждой (таблица 6). Эксперимент проведен в трех повторностях.
Исследуемые образцы БАД вводили однократно в желудок с помощью зонда в виде суспензии, приготовленной на воде очищенной (гумат калия вводили в виде раствора, 3-каротин использовали в виде аптечного масляного раствора) в дозе 10 мг/100 г массы животного, объемом 1 мл ежедневно в течение 30 дней до инициации оксидативного стресса и в течение 6 дней параллельно с введением четыреххлористого углерода. На седьмой день крыс убивали в соответствии с этическими нормами методом декапитации, затем проводили извлечение печени, которую промывали, физиологическим раствором и сразу замораживали. Гомогенат готовили механическим измельчением ткани печени массой 1 г с 9 мл трис-буфера (рН 7,4), со скоростью 5000 об/мин в сосуде с двойными стенками, постоянно охлаждаемым проточной водой [215].
В гомогенатах определяли активность АсАТ, АлАТ, СОД, каталазы, ГП и концентрацию малонового диальдегида. Определение активности и концентрации ферментов определяли методами предыдущего эксперимента.
Исследование реактивных изменений ткани печени крыс в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки БАД проводили на 50 (35 самок, 15 самцов) белых беспородных крысах массой 190-210 г, которые были поделены поровну на 5 групп по 10 крыс в каждой (7 самок и 3 самца). Первая группа - интактные животные, вторая - получала биомассу спирулины, третья - шрот семян винограда, четвертая - шрот семян кунжута, пятая - гумат калия. Эксперимент проведен в трех повторностях.
Материалом для гистоструктурного анализа послужили ткани печени эмбрионов 15 и 21-суточного развития, полученные от крыс контрольной и экспериментальных групп, которые в течение 30 дней до наступления беременности и в период беременности в качестве нагрузки внутрижелудочно получали суспензии биомассы спирулины, шрота семян винограда, шрота семян кунжута и гумат калия в виде раствора в дозе 10 мг/100 г массы тела, объемом 1 мл. Суспензии и раствор готовили на дистиллированной воде [41,215]. Интактные животные получали воду аналогичного объема. Также мы исследовали печень взрослых половозрелых крыс, которые в течение 30 дней получали указанные БАД.
Контролем послужил материал от интактных крыс аналогичных сроков развития.
Для получения самок с датированным сроком беременности использовали 4-4,5 месячных крыс, которым, с учетом эстрального цикла, вечером подсаживали самцов, а утром брали влагалищные мазки. Так как у крыс оплодотворение происходит в 1-2 часа ночи, считали день обнаружения спермиев в мазке первым днем беременности.
По окончанию эксперимента животных подвергали декапитации после ночного голодания, а затем извлекали печень. Фиксацию печени взрослых крыс и эмбрионов проводили в 10 %-м забуференном формалине, затем осуществляли проводку гистологического материала с помощью аппарата гистологической проводки замкнутого типа Tissueek Vip 5 junior, а после заливали в парафиновые блоки, из которых готовили срезы толщиной 6-7 мкм. Срезы ткани печени окрашивали гематоксилином и эозином.
Также проведено иммуногистохимическое исследование печени с применением набора моноклональных антител к ингибитору апоптоза (Вс1-2) и антигену пролиферации (Ki-67). Типирование проводили с использованием антител фирмы DACO. Гистологические исследования проведены классическим методом свето-польной микроскопии. Фотографическую съемку образцов ткани печени проводили с помощью светового микроскопа «Микромед» при увеличении 40х, 100х, 200х и 400х. Визуализацию препаратов проводили при помощи светового микроскопа «Микромед» и цифровой фотовидеокамеры.
Ответная реакция системы ПОЛ-АО печени здоровых половозрелых крыс на нагрузку тетрахлорметаном, на фоне введения в организм биологически активных добавок
Таким образом, установлено что у эмбрионов печень более продолжительное время сохраняет роль органа кроветворения. В печени взрослых крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины формируются участки эритропоэза. Паренхиматозные клетки печени на нагрузку суспензией водоросли отвечают увеличением количества митотически делящихся гепатоцитов и увеличением слоев клеток наружной терминальной пластинки.
Исследование реакции ткани печени на нагрузку суспензией шрота семян кунжута показало, что в целом развитие органа в антенатальном и постнатальном периодах онтогенеза не нарушено. На 15 сутки эмбриогенеза балочное строение печени находится в стадии формирования (рисунок 17).
Гепатоциты хорошо выражены и крупнее ближе к капсуле, вглубь, к центру печеночной бухты, печеночные балки разветвляются. Дольчатое строение печени не развито. Капилляры синусоидного типа ветвящиеся с выраженными расширениями, заполненными эритробластами и другими дифференцирующимися клетками эритроцитарного ряда. Наблюдаются участки эритропоэза и лимфопоэза (рисунок 18).
Печеночные балки с расширенными капиллярами, заполненными дифференцирующимися клетками эритроцитарного ряда. Окраска гематоксилин эозин. Увеличение 400х В целом развитие печени в эмбриогенезе на 15 сутки у крыс, получавших суспензию шрота семян кунжута, не отличается от животных контрольной группы. Балочное строение печени полностью формируется к 21 суткам антенатального периода онтогенеза (рисунок 19).
Отмечается развитое радиальное строение органа, а также, по сравнению с животными контрольной группы, желчные протоки в печени экспериментальных крыс несколько крупнее, а желчные капилляры расширены (рисунок 20).
Рисунок 20 - Расширенные желчные протоки на 21 сутки эмбриогенеза. Окраска гематоксилин - эозин. Увеличение 100х
Также в печени крыс, получавших в качестве нагрузки шрот семян кунжута, отмечается мелковакуольная и мелко-, среднекапельная жировая дистрофия. Расширенные синусоидные капилляры содержат единичные эритробласты.
Структура печени взрослых 4-х месячных крыс экспериментальной группы не имеет нарушений. Отмечается сформированное балочное строение печени, некоторые гепатоциты двуядерные с просветленной цитоплазмой, морфологическая картина наиболее характерна для гепатоцитов, лишенных гликогена (рисунок 21).
Мелкокапельная и среднекапельная жировая дистрофия в ткани печени опытных крыс на 4 месяц онтогенеза. Окраска гематоксилин - эозин. Увеличение 100х
Иммуногистохимические исследования тканей печени крыс на 15 и 21 сутки антенатального периода онтогенеза и на 4 месяц постнатального периода с применением моноклональных антител к ингибитору апоптоза (Вс1-2) не выявили угнетения апоптоза, а с применением моноклональных антител к маркеру пролиферации (Ki-67) выявлено, что на 15 сутки эмбриогенеза наблюдается пролиферация в ядрах эндотелия пересинусоидальных пространств, в ядрах гепатоцитов и в ядрах клеток крови (рисунок 23).
Печень экспериментальной крысы на 15 сутки эмбриогенеза. Иммуногистохимическое исследование экспрессии антигена пролиферации Ki-67. пролиферация в ядрах эндотелия пересинусоидальных пространств, в ядрах гепатоцитов и в ядрах клеток крови. Увеличение 200х
На 21 сутки эмбриогенеза пролиферация в тканях печени наблюдается только в отдельных гепатоцитах и в эпителии желчевыводящих протоков, а в тканях печени 4-х месячных крыс отсутствует.
Следовательно, ткань печени эмбрионов и взрослых половозрелых крыс не отвечает патологическими изменениями на длительное внутрижелудочное введение шрота семян кунжута, но на 21 сутки эмбриогенеза отмечается усиленная пролиферация клеток желчевыводящих протоков.
Кунжут пролонгирует эритропоэз у эмбрионов до момента рождения (по сравнению с животными контрольной группы). На основании эксперимента достоверных данных о гепатопротекторном действии шрота семян кунжута не получено, но, вероятно, на фоне нагрузки шротом изменяется экзокринная функция печени, проявляющаяся в образовании желчи и синтезе альбуминов.
Исследование реакции ткани печени на нагрузку раствором гумата калия показало, что в целом развитие органа не нарушено. На 15 сутки эмбриогенеза балочное строение печени находится в стадии формирования (рисунок 24).
Дольчатое строение печени не развито, но печеночные балки более сформированы по сравнению с печенью животных контрольной группы. В формировании печеночных балок отмечается более плотное скопление клеток по периферии в подкапсулярной зоне и рыхлое расположение к центру, за счет расширенных си-нусоидных пространств (рисунок 25).
Печеночные балки с расширенными капиллярами, заполненными дифференцирующимися клетками эритроцитарного ряда (15 сутки эмбриогенеза). Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение Х40 Капилляры синусоидного типа имеют расширения, которые заполнены дифференцирующимися клетками эритроцитарного ряда, но в целом, эритропоэз выражен слабо, островков кроветворения мало, встречаются единичные эритробла-сты, по сравнению с эмбрионами, полученными от интактных крыс (рисунок 26).
Развитие и становление нервной системы крыс на фоне нагрузки шротом семян винограда
Установлено, что рефлекс переворачивания на плоскости у крысят опытной и экспериментальной групп был полностью сформирован к 8 дню жизни. Рефлекс «отрицательный геотаксис» у крысят экспериментальной группы был полностью сформирован к 10 дню жизни, а в контрольной - к 11 дню. Рефлекс «избегание обрыва» и «маятниковый рефлекс» у крысят экспериментальной группы были полностью сформированы к 10 и 8 дню жизни соответственно, а в контрольной группе - к 12 и 10 дню.
При исследовании скорости созревания рефлексов по методу «открытое поле» было зафиксировано, что крысята экспериментальной группы несколько чаще осуществляли поднятие головы и лап, по сравнению с крысятами контрольной группы. Ползать все крысята экспериментальной группы начали к 12 дню жизни, а контрольной группы - к 13 дню. Опора на задние конечности и подъем всего тела осуществлялись крысятами экспериментальной группы достоверно чаще, чем крысятами контрольной группы. Число пересеченных квадратов у крысят экспериментальной группы на 17 день эксперимента было меньше на 32,6 % по сравнению с контролем, а к 20 дню жизни было одинаковым в обеих группах. Время гру-минга у крысят обеих групп на 17 день эксперимента было почти одинаковым, однако при исследовании с 18 по 20 дни жизни было зафиксировано, что в экспериментальной группе время груминга было достоверно ниже и на 20 день ниже на 59,4 % по сравнению с контролем. Число вертикальных стоек у крысят обеих групп было примерно одинаковым во все дни наблюдений. Карабканье на стенки было зафиксировано у крысят экспериментальной группы на 17 и 18 сутки наблюдений, при этом крысята контрольной группы подобной активности не проявляли. На 19 сутки эксперимента крысята экспериментальной группы карабкались реже, чем крысята контрольной, а на 20 сутки - одинаково. Прыжки были зафиксированы только у крысят экспериментальной группы только на 18 день наблюдений. Время отсутствия активности у крысят экспериментальной группы на протяжении заданного периода наблюдений было достоверно ниже, по сравнению с крысятами контрольной группы и на 20 день эксперимента было ниже на 45,6 %. Аномалий походки не наблюдалось. Реакция на акустический стимул у всех крысят экспериментальной группы была полностью сформирована к 13 дню жизни, а к контрольной - к 15 дню.
«Зрачковый» рефлекс у крысят экспериментальной группы был полностью сформировался к 14 дню, а в контрольной группе - к 15. Рефлекс «избегания обрыва, вызванного визуальным стимулом» у крысят обеих групп полностью сформировался к 16 дню жизни. Обонятельная реакция у крысят экспериментальной группы была более выражена, чем в контроле. Мышечная сила у крысят экспериментальной группы на протяжении заданного периода наблюдений была больше чем в контроле и на 20 сутки эксперимента больше на 53,8
При исследовании эмоционально-двигательного поведения и способности к тонкой координации движений было зафиксировано, что переворачивание в свободном падении все крысята экспериментальной группы осуществляли с 17 дня жизни, а крысята контрольной группы только с 19 дня. Время удержания на вращающемся цилиндре у крысят экспериментальной группы на протяжении всего периода наблюдений было достоверно больше, чем у крысят контрольной группы и к 27 дню жизни было на 13,8 % больше, по сравнению с контролем.
При исследовании созревания рефлексов по методу «открытое поле 2» на 45 день жизни нами были зафиксированные следующие показатели: латентный период выхода из центра у крысят экспериментальной группы был меньше на 51,9 % по сравнению с контролем. Число пересеченных квадратов у крысят экспериментальной группы больше на 68,0 % по сравнению с контролем, число вертикальных стоек больше на 104,3 %, а число умываний несущественно меньше относительно контрольной группы.
Время груминга у крысят экспериментальной группы на 50,5 % меньше, чем у крысят контрольной группы; время замирания меньше на 52,1 %, число дефекаций меньше на 78,9 %, число уринаций меньше на 54,0 %, при этом число загля-дываний в норки больше на 55,0 % по сравнению с контролем.
Результаты исследований говорят о высокой функциональной активности организма крысят и повышении всех показателей жизнедеятельности на фоне нагрузки биомассой спирулины.
Таким образом, введение биологически активных добавок в организм крыс приводит к увеличению среднего количества крысят в помете и мест имплантации из расчета на самку; снижению общей смертности эмбрионов, увеличению массы и кранио-каудального размера плодов, а также средней массы плаценты, а также стабилизирует психическое состояние животных, изменяет динамику созревания сенсорно-двигательных рефлексов, уровень предметного действия или теменно-премоторный, связанный с мелкой моторикой и эмоциональной сферой.
Содержание меди в мясе цыплят бройлеров всех опытных групп находится в пределах допустимой концентрации. Наибольшая концентрация меди 3,91 ±0,160 мг/кг наблюдалась у цыплят, употреблявших в качестве дополнительного премикса к корму шрот семян кунжута, наименьшая концентрация 3,01 ±0,126 -наблюдалась у цыплят контрольной группы.
Концентрация меди в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, была выше, чем в контрольной группе на 11 %, в группе, употреблявшей гумат калия - выше на 17 %, в группе, употреблявшей шрот семян винограда - выше на 24 %, а в группе, употреблявшей шрот семян кунжута -выше на 30 % по сравнению с контролем.
Концентрация кобальта у цыплят контрольной группы и группы, получавшей шрот семян кунжута, несколько превышала предельно допустимую норму. У цыплят получавших биомассу спирулины и гумат калия концентрация кобальта была почти на одном уровне (различия не превышали 3 %) и лежала в пределах допустимой нормы. У цыплят получавших шрот семян винограда концентрация кобальта была достоверно ниже, чем у цыплят контрольной группы на 15 %.
Содержание свинца в тканях цыплят всех групп также находилось в пределах нормы, но наиболее высокая концентрация, не превышающая ПДК, 0,298±0,010 мг/кг наблюдалась у цыплят, получавших шрот семян кунжута, а наименьшая - 0,255±0,008 мг/кг, в группе, употреблявшей шрот семян винограда.
Концентрация свинца в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, была ниже, чем в контрольной группе на 11,5 %, в группе, употреблявшей гумат калия - ниже на 7,2 %, а в группе, употреблявшей шрот семян винограда - ниже на 13,5 %.
При этом в группе, получавшей шрот семян кунжута концентрация свинца была незначительно выше, чем у цыплят контрольной группы. Концентрация цинка в мясе бройлеров контрольной группы существенно превышала предельно допустимую. В опытных группах цыплят, получавших биомассу спирулины и шрот семян винограда, содержание цинка было в пределах нормы. Концентрация цинка в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, была ниже, чем в контрольной группе на 31,3 %, в группе, употреблявшей гумат калия - ниже на 20,7 %, в группе, употреблявшей шрот семян винограда - ниже на 27,6 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута -ниже на 17,4 %.
Концентрация железа в мясе цыплят контрольной группы и группы, получавшей шрот семян винограда, была ниже предельно допустимой концентрации, а в остальных группах наблюдалась обратная тенденция.
Таким образом, концентрация железа в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, была выше, чем в контрольной группе на 64,5 %, в группе, употреблявшей гумат калия - выше на 49,9 %, в группе, употреблявшей шрот семян винограда - выше на 30,4 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута - выше на 76,7 %.