Введение к работе
Настоящая работа посвящена исследованию области локализации гена, ответственного за возникновение атаксии Фридрейха.
Актуальность темы. Обнаружение и исследование Генов, мута- ции в которых приводят к возникновению наследственных заболеваний человека, позволяет не только понять молекулярно-генети-ческие и биохимические механизмы возникновения этих заболеваний, но и разработать эффективные методики их диагностики (в том числе пренатальной и пресимтоматической), а в перспективе и подойти к проблеме лечения этих заболеваний. Обнаружение новых полиморфных маркеров, сцепленных с патологическим геном, позволяет сделать более эффективной косвенную ДНК-диагностику заболевания.
Цель и задачи исследования. Целью работы являлось исследование области локализации гена, ответственного за возникновение атаксии Фридрейха. При этом ставились следующие задачи:
Обнаружить и исследовать новые полиморфные маркеры в области наиболее вероятной локализации гена FRDA.
Исследовать наличие неравновесия по сцеплению известных и вновь обнаруженных маркеров с патологическим геном в популяции России.
Определить нуклеотидную последовательность участка ДНК вблизи CpG-островка в области вероятной локализации гена FRDA и проанализировать ее на наличие возможных кодирующих последовательностей.
На основании вновь обнаруженных полиморфных маркеров р;я-работать процедуры косвенной ДИК-диагностики атаксии Фридрейха.
Научная новизна. В ходе данной работы обнаружены и исследованы четыре новых микросагеллитных повтора. Проведена оценка по-пуляционных частот аллелей обнаруженных микросателлитних повторов и повторов из локуса D9S15 для популяции России.
Впервые определена нуклеотидная последовательность участков ДНК, содержащих пять микросателлитных повторов, а также Фрагмента ДНК зонда 26Р, прилежащего к CpG-островку и содержащего про-моторную область одного из известных генов-кандидатов.
Практическая ценность работы. Данные, полученные в ходе работы, позволяют проводить эффективную косвенную ДНК-диагностику атаксии Фридрейха.
- A -
Положения, выдвигаемые на гашиту.
\. Обнаружены и секвенироганы 4 микросателлитных повтора в области вероятной локализации гена FRDA.
Z. Определены частоты аллелей двух известных и двух новых СА-повтороь в популяции России.
-
Разработаны процедуры ДНК-диагностики, основанные на не-радиоактиЕНсм определении аллелей СА-повторов.
-
Определена непрерывная нуклеотидная последовательность участка ДНУ. длиной 2ВЬ2 н. п., содержащего 5"-область одного из генсь-кандидатов.
Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на 2-ои Всесоюзном симпозиуму "Теоретические и прикладные аспекты молекулярной биологии" (Самарканд, 1991) и на VI-ом Съезде ВОГиС (Минск, 19).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 печатню кібот.
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, сбгора литературы, описания материалов и методов исследования, получииных результатов и их обсуждения, гаключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 98 страницах машинописного текста, содержит 7 таблиц и 22 рисунка. Список литературы включает 60 работ.