Введение к работе
Актуальность темы. Среди почвенных мицелиальных грибов ільзое хозяйственное значение имеют-виды вызывающие заболева-:я культивируемых растений. Серьезный экономические ущерб на-ісят штаммы вида Vertlcillium dahliae Kleb. Этот патоген вы-шает трахеомик.оэное увядание,, известное как вилт или верти-іллез, у примерно 800 видов древесных, кустарниковых и травя-істьіх раотений, среди которых много ценных сельскохозяйствен-dc культур (Филиппов.Андреев , Базилинская, 1980). Основной !рой борьбы с заболеванием является селекция им; ;нных сотэтов чтений. Для этого требуется детальное знание биологии и ге-ітиіси возбудителя вилта.
v. dahliae относится к классу Несовершенных грибов утрати-[их d процессе эволюции половую.стадию раьлножения. Их единс-іенньш источником комбинативной изменчивости служит парасек-'альный цикл. Первая- стадия цикла - г.етерокариоз ограничивает-[ существованием групп вегетативной совместимости (ГВС). 06-!Н генетической информацией возможен только между вегетативно івместимими штаммами, которые входят в одну ГВС. Вегетатиь .о ^совместимые штаммы н*> способны формировать жизнеспособный ге-ірокарион при совместном росте и входят в разные ГВС. Анализ «знака вегетативной совместимости проводится у многих видов целиальных грибов (Дьяков, Долгова, 1995). Главным методом 'наружения различных ГВС в настоящее время стал метод основа-ій на использовании мутантов, не способных утилизировать нит-т ( nit-мутантов), являющийся нетрудоемким и позволяющим одевать больаие выборки популяций (Поргенко, 1992.' .
Изучение вегетативной совместимости у возбудителя вертици-;езного вилта позволит оценить вклад парасексуального цикла в. 'щую гёнотипическую изменчивость патогена, в том числе его іль з возникновении новых физиологических рас; расширит знание генетической гетерогенности природных популяций и внутривидо-»й дифференциации; прояснит ряд микроэволвционньк процессов ютекооцих п поп; іяциях, поскольку отсутствие вегетативной со-«стимости препятствует интеграции кланов в популяции, а полиций в виды. Полученные даніше послужат хорошим инструментом я ьцработки мер борьбы с патогеном и рязр?.бвгке теоретических но:) селекции растиний на внлтоустейчнпость.
Цели и задачи исследования. Цели нашей работы заключались . в разработке метода применения пі* -мутантов в исследованиях вегетативной совместимости у штаммов .V.dahlias и изучента отим мет дом вегетативной совместимости у штаммов V.dahliae изолированных из различных растений-хозяев в разных странах и принадлежащих ко всем физиологическим расам вызывающих вилт хлопчатника в Средней Азии.
В работе ставились следующий основные задачи:
подобрать оптимальные условия для выделения nit -мутантов; -
идентифицировать спектр фенотипических классов nit -мутантов.и выделить у исследуемых штаммов мутанты пригодные для тестов на вегетативную совместимость; ,
оценить вегетативную совместимость физиологических рас возбудителя вилта распространенных в Средней Азии;
- оценить вегетативную совместимость штаммов V.dahliae вц-
зывающих вилт хлопчатника в Средней Азии с штаммами из разных
растений-хозяев и стран;
- изучать особенности гетерокариоза и диплоидизации у веге
тативно совместимых nit-мутантов разных штаммов.
Научная новизна работы. Впервые составлен фенотипический спектр nit-мутаций у ..dahliae,' изучена вирулентность nit-мута-нтов к хлопчатнику, проанализированы гетерокариоз и диплоидиэа-ция nit -мутантов вегетативно совместимых штаммов. Показана перспективность применения nit -мутантов для изучения вегетативной совместимости у v.dahliae. Установлено, что все тестированные .штаммы возбудителя вертициллезного вил-ы хлопчатника из Таданки стана и Узбекистана, принадлежащие кп воем известным в настояще :время физиологическим расам распространенным в Средней Азии, ве . гэтатпвно совместимы. Среди 60-ти изучавшихся штаммов пз семи растений-хозяев и одиннадцати стран идентифицировано 4 ГВС. Абсолютное большинство штаммов (57) вошло в ГВС-І, что указывает на низкий уровень гетерогенности по признаку вегетативной совме отимости у V.dahliae и возможность практически неограниченного обмена генами із природных популяциях этого фитопатогена.
Практическая ценность работы. Отсутствие генетической изоляции между раз точными физиологическими расами возбудителя вертициллезного вк-та хлопчатника указывает на возможность их гибридизации в лрнрэдных условиях- и возникновении новых рас в ре-
.".''' з '
>ультате осуществления парасексуального цикла. Новые расы мо-'ут вызывать поражения культивируемых устойчивых сортов. Зная' Расовый состав 'штаммов патогена на хлопковых полях и генетн-іеокий механизм процесса' раоообраэования, который происходит .' і ходе комбинатиппой изменчивости; можно прогнозировать возмо-сные эпифитотии. ^чет этого положения при-сортосмене позвдлит ізбежать вспышки заболевания. Необходимо вести направлены^ по-іск или создание цитоплазматичеоких агентов, таких как вирусы і вирусоподобные частицы, снижающие общую жизнеспособность па-огена. Возможность их передачи в природных популяциях латоге-іа в результате горизонтального переноса; который происходит іри слиянии гиф разных'штампов, может существенно повлиять на лучиение фитосанитарного состояния'полей.
Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на:
асширенных заседаниях лаборатории генетики микроорганизмов
тдела генетики АН' Республики Таданкиотан (Душанбе, 1992,1993);
торой Научной конференции биохимического общества.Республики
'абжнкистан (Душанбе, 1996); научной конференции поовгзденной
0-летию со дня рождения доктора биологических наук, профессо
ра А.Л. Прокофьева (Душанбе,' I99G). /,
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 работ.
Структура, и объём работы.' Диссертация изложена на 116
траницах машинописного тедста и.состоит из введения, обзора
и.тературных данных (I глава), описание использованных в рабсь- '
е материалов и методов (I глаза), экспериментальной части (3
лави); заключения, выводов и-списка использованной литерату-
ы. Работа содержит 23 таблицы и 10 рисунков (фото). Перечень
нтнрооанной литературы включает Г7Б названий, из них 43 на
усоком языке. ..".'. . , . . "