Введение к работе
Продукция антител, основных эффекторов иммунной системы, является важнейшей иммунологической реакцией и главным звеном гуморального иммунного ответа. Его величину н продолжительность определяет баланс множества регулирующих влияний к взаимодействий различных компонентов иммунной системы. При этом, доминирующая роль в регуляции гуморального ответа отводится Т-лимфоцитам, способным как усиливать., так и полавлять иммунный ответ на антиген (Vitetta е.а.,1989). В настоящее время обнаружены к В-клеточкые регуляторные механизмы. Так, например, известно, что проявляющие себя а коде нормального иммунного ответа антииднотилическис антитела к клетки- с антшииоткпическн-нн рецепторами способны влиять иа реакцию антитслопродук-цин, усиливая или угнетая экспрессию соответствующего иднетипа (Eichmann е.а., 1978; Shcnk е.а.,1984).
Традиционно, в осі іве экспериментальных методов изучения иммунных явлений лежит вычленение отдельных составляющих иммунной системы к их последующий анализ. Неоспоримы преимущества такого подхода при фекотипи-рованни субпопуляций лимфоцитоз, исследовании генетических основ строения и разнообразия рчтатсл и рецепторов лимфоцитов, изучении биохимических и молекулярных аспектов функционирования иммунохомпетентных клеток в различных состояниях иммунной системы. Однако, применечие такого редукционистского подхода неизбежно сопровождается потерей
информации о системе в целом. Альтернативные подходы, учитывающие взаимодействия всех компонентов системы, необходимы при анализе комплексных регуляторних явлений. Представление об иммунной системе как о едином целом обеспечивает на сегодняшний день сетевая теория, предложенная Jernc в 1974 г. и получившая в последние годы свое дальнейшее развитие (Paul, Bona, 1982; Couiinho, 1989). Основное положение этой теории сводится к существованию сети взаимоотношений между клеточными компонентами иммунной системы, опосредованных идиотип-антиидиотипнческими взаимодействиями. Сетевая организация в большей или меньшей степени проявляется в основных иммунологических явлениях, таких как установление и развитие В-клсточного репертуара, толерантность, аутореактивность, нормальный иммунный ответ (Siskind, 1982; Kearney є а., 1989). Однако, для характеристики ее вклада необходимо дальнейшее накопление экспериментальных данных, что является одним из аспектов данного исследования.
Используемый в нашей работе метод лимитирующих разведений также обеспечивает системный подход к выявлению и изучению функциональных взаимосвязей клеток иммунной системы, участвующих в формировании нормального иммунного ответа.
цпль а злдлчп псслвдовлпия
Цель исследования: используя метод лимитирующих раз-ведений (далее - J1P), охарактеризовать гуморальный иммунный ответ на антиген белковой природы — овальбумин у мышей C57D1/6 и выявить взаимодействия различных клеточных звеньев, регулирующих продукцию антител, на клональном уровне; исследовать природу и конкретный механизм этих взаимодействий.
Задачи исследования: I. Получить и проанализировать ЛР-зависимости продукции специфичных к овальбумину антител для популяции неразделенных иммунных спленошпт» с учетом ' изотипа тестируемых антител, проведения рестимуляции и др.
2. Используя возможности метода ЛР, исследовать
характер влияния Т-клеток на процесс антителопродукцни в
иммунном ответе на овальбумин.
3. Охарактеризовать взаимодействия различных клеточных
участников гуморального ответа в популяции лишенных Т-
димфоцнтов иммунных спленошггов.
4. Получить коллекцию гибридом, отражающую спектр
антителопродуциругошня клеток в ответе на овальбумин,
используя при слиянии иммунные спленошпы. Использовать
гнбридомы . при исследовании механизмов клеточных
взаимодействий, обуславливающих нелинейный характер
зависимостей, полученных п ЛР-андлиэс.
ИЛУЧEftЯ ПОВИЗПА рлвояы
Впервые с помощью метода лимитирующих разведений была показана функциональная гетерогенность популяция продуцентов OA-IgG и охарактеризованы клеточные субпопуляцнн, способные лимитировать процесс антнтелопро-дукцни в качестве эффекторного или регуляторного звена.
На основе проведенного исследования антнтслопродукшш в иммунном ответе мв антиген белкового происхождения, пищевой аллерген — ооальбумнн, получено наглядное представление об этом процессе как о совокупности множественных регуляторних взаимодействий различных клеточных компонентов, в том числе в составе В-популяшш, определяющих конечную зффекторную величину Показана возможность влияния на продукцию антнгенспецифическлд антител In viiro с помощью моноклональких антител, полученных как составляющая гуморального ответа на оеальбумин. Результаты данной работы могут быть использованы для характеристики регуляторного воздействия о случаях различных нарушений иммунного ответа и целенаправленного поиска средств, корректирующих актив-ыость определенного регулирующего звена.
Материалы диссертация представлены на 8 Международном иммунологическом конгрессе (Будапешт,
1992), ІЗ Международном конгрессе по аллергологии и клинической иммунологии (Стокгольм, 1994), 12 Европейской иммунологической конференции (Барселона, 1994), конференции отдела иммунологии Института бноорганнческой химии РАН.
По теме диссертации опубликовано 4 работы. ОВЪВИ П СТРУКТУРА ДПССВРТЛЦПП
Диссертация состоит из «ведение, обзора литературы,
описании материалов н методов, 2-х глав собственных исследо
ваний, обсуждения полученных результатов, выводов и списка
литературы. Диссертация изложена на страницах маши-
нописного текста, иллюстрирована таблицами и
рпсуикаші. Список литературы включает источннкоа.