Введение к работе
Актуальность проблемы. Известно, что наиболее часто зричиной сенсибилизации при полллнозах является пыльца трав семейства злаковых - тимофеевки, овсяницы, ежи, райграсса, ржи, полевицы, мятлика, пырея и лисохвоста ( Пылкий В.И. с соавт., 1991, Ад А.Д., 1978, Зисельсон А.Д., 1989, Потемкина A.M., 1990, Новиков Д.К., 1991, йзгер Д., 1991 ). В течение 80 лег эффективным методом лечения данной патологии остается специфическая гипосенсибилизирующая иммунотерапия.
Эффективность такой терапии определяется, в основном, подбором оптимального спектра и адекватной дозы аллергена, введенного при лечении ( Горячкина Л.А., с соавт., 1985, Бойко А.Н., Щербак Л.С.,' 1982, Райкис Б.Н., Воронкин Н.И., 1987, Куценко 3., I990,lowe.nsieinef , l9Q4,Voorhorst ,Uoofi , I9QO, bousaue'f ei «/. , 1987 ). Применение с этой целью экстрактов из смеси пыльцы наиболее распространенных аллергенно-значимых видов трав злаковых, выпускаемых а условиях производства, предпочтительнее, чей смесей моно-аллергоидов из пыльцы таких трав, которые готовятся в условиях аллергологического кабинета, так как исклпча-ется риск бактериального загрязнения й является более удобным для медицинского персонала.
Кроме того, используемые до настоящего времени коммерческие аллергены, представляющие собой водно-солевые экстракты пыльцы, имеют существенные недостатки { аллергенность и слабую иымуногекность ), что значительно увеличивает продолжительность лечешш I до 4 - 5 месяцев ) а препятствует введению высоких, максимально переносимых доз аллергена. Это обстоятельство стимулировало исследователей на поиск путей создания новых более эффективных форм лечебных аллергенов - химически модифицирован-
2.
ных глвтарадьдагидои и формальдегидом ( Marsh etal , 1970, 1982, Райкис Б.П., Ворошит Н.И., 1937 ). Наиболее удачными і них явились исследования по модификации экстрактов пыльцы фо] мальдегидом, которые завершились созданием препаратов нового поколения - адлвргоидов, обладающих низкой адлергенностью и высокой имиуногенностью ( Marsh ei at. , 1981 ).
В налей стране соответствующей нормативно-технической ^ куыентации на производство аллергенов не было. В связи с эти* были проведены исследования, которые позволили путем соответ ствувдей модификации одноэтапного метода фориалинизации полу чить, экспериментально обосновать и клинически изучить аллер гоид из пыльцы амброзии ( Райкис Б.Н., I974-I99I ).
Это и послужило предпосылкой к разработке аллергоидов и пыльцы злаковых трав с целью расширения номенклатуры таких пр паратов.
Цель исследования - научно обосновать применение отечес венной одноэташой технологии фориалинизации для изготовления аллергоидов из пыльцы злаковых трав.
Для достижения указанной цели намечено было изготовить моно-аллергоиды из пыльцы тимофеевки, овсяницы, ежи сборной; ыикст-адлергоиды из смеси пыльцы трех V тимофеевки, овсяницы, ежи сборной ) и пяти видов ( тимофеевки, овсяницы, ежи сборно: ржи и райграсса ) растений, к которым наиболее часто встречав' ся сенсибилизация, и изучить их по :
физико-химическим свойствам;
антигенности;
перекрестной антигенной реактивности;
3.
степени снижения аллергенности в кожных пробах на больных;
эффективности применения для специфическое иммунотерапии.
Научная новизна.
-
В процессе одноэтапной формалиниэацки аллергенов мз пыльцы трав семейства злаковых ( тимофеевка, овсяница, ежа сборная ) формируется аллергоиды, имеющие сходные физико-химические, антигенные и аллергенные свойства. Это относится как к моно-ал-лергоидам, так и к аллэргоидам, приготовленным из смеси пыльцы трех и пяти видов трав.
-
Экспериментально показана более высокая иммуногенная активность моно- и микст-аллергоидов из пыльцы злаковых трав в сравнении с гомологичными нативныыи аллергенами, что обусловлено особенностями физико-химического свойства пыльцы этих видов растений.
-
В аллергоидах из пыльцы злаковых трав ( тимофеевка, овсяница и ежа сборная ) сохранены антигены, перекрестно реагирующие между собой в исходных аллергенах, что связано с их устойчивостью к воздействия формалина.
-
Снижение аллергенной активности в прик-тесте аллергои-дов из пыльцы злаковых трав обнаруживается в большей степени при сопоставлении размеров волдырей на аллерген и алдергоид с учетом реакции-больных на стандартный раствор гнетамина ( метод
S1 ), чем при сравнении только размеров волдырей на аллерген и адлергоид, что является результатом индивидуальной чувства -тельности больных к гистамину.
і.
5. Механизм иммунотералевтического эффекта от применения аллергоидов в значительной мере объясняется приобретенными свойствами указанных препаратов - их низкой аллергенностыо и высокой иммуностимулирующей активностью, что позволяет вводить достаточно высокие дозы препарата без дополнительной сенсибилизации организма.
Практическая ценность работы.
-
Впервые на основе отечественной технологии получены аллергоиды из пыльцы тимофеевки, овсяницы, ежи и микст-аллергои ды из смеси пыльцы тимофеевки, овсяницы, ежи и из пыльцы тимофеевки, овсяницы, ежи, ржи и райграсса.
-
Дискриминантный анализ < в частности ДДФ ) является бо лее чувствительным методом сравнительного изучения свойств алле гоидов, чем анализ средних единичных показателей или степени их взаимосвязипо коэффициентам корреляции.
-
Лрик-тест является более стандартным, менее травматичным для оценки аллергенности и специфичности аллергоидов и по -зволяет проведение исследований одновременно большим количеством аллергенов, чем скарификационный тест.
-
Впервые для оценки аллергенной активности формалинизи-рованных аллергенов использован метод SI tstrin index. ) -определение реакции козш на аллерген, с учетом такой реакции
на гистамин, что позволяет повысить чувствительность и стандарт носгь прик-теота.
о. Аллергоидотерапия является более эффективным методом специфической иммунотерапии, чем аллергенотерапия.
5.
В соответствии с полученными результатами экспериментально-), лабораторного и клинического исследования на защиту выдвинутся следурдшэ положения;
-
Использование одноэтапной отечественной технологии фор-иганизации аллергена позволяет получить ыоно- и ыикст-аллергс-да из различных видов злаковых трав, обладающих сниженной ал -зргенностьв и высокой иммуногенностьп.
-
Объективным методом определения остаточной аллергенно-гн в аллергоидах является сравнительная оценка активности коа-эй реакции на аллергоид и аллерген с учетом такой активности
і стандартное количество гисгамина I метод S1 ).
3. Применение аллергондов из пыльцы злаковых трав для
іецифической гипосенсибилизации поллиноза вызывает терапевтичес-
ifl эффект при сокращении курса лечения, количества инъекций и
ісла осложнений, з сравнении с коммерческими аллергенами.
Апробация работы. Диссертация апробирована 23.11.93 года і заседании ыежкафедральной конференции лаборатории аллергенов Ї "Аллерген" и кафедры патологической физиологии Ставрополь -юго государственного медицинского института. По теме диссер -ации опубликовано 7 работ, список которых приводится в конца зтореферата.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из задания, обзора, литературы, 3 глав собственных исследований, истечения, выводов и списка литературы. Работа изложена на Ї5 страницах машинописи, иллюстрирована 41 рисунком и 14 таб-вдамн. Библиографический указатель содержит 89 отечественных 61 зарубежный источник литературы.