Введение к работе
Одним из наиболее ярких проявлений внедрения иммунологии и, в частности, такого ее направления как иммуногенетика, является разработка методов подбора тканесовместимых доноров и реципиентов. Именно это в первую очередь обеспечило развитие клинической трансплантологии практически во всех странах мира. Так в наиболее массовом виде трансплантации — пересадке почки сегодня участвуют почти 600 центров, которыми на сегодняшний день выполнено более 400 тысяч трансплантаций (J.M.Cecka, P.J.Terasaki, 1997).
При этом следует отметить, что годовая выживаемость трансплантатов почки уже в конце 80-х годов в передовых трансплантационных центрах мира, входящих в международные программы по обмену тканесовместимыми трансплантатами, приблизилась к 90%, а десятилетняя выживаемость — к 60%.
Достижения фундаментальной иммуногенетики человека последнего десятилетия, в первую очередь, в области молекулярной генетики главного комплекса тканевой совместимости человека — (системы HLA) и в частности, разработка и совершенствование метода HLA-DNA генотипирования не только кардинально расширили представления о системе HLA, но и открыли совершенно новые возможности в практическом использовании этих достижений в трансплантологии.
К настоящему времени это особенно ярко проявилось при пересадке костного мозга «не родственного происхождения», где благодаря внедрению метода HLA-DNA генотипирования, эффективность трансплантации возросла почти в 8 раз (J.Hansen, 1997).
Однако, в клинике пересадки почки метод HLA-DNA генотипирования до настоящего времени еще не нашел широкого
использования в России, и для этого существует целый ряд объяснений.
Во-первых, время HLA-DNA генотипирования должно быть, во всяком случае, не больше чем время «классического» серотипирования, а это возможно при использовании отнюдь не всех распространенных до настоящего времени методов HLA-DNA генотипирования.
Во-вторых, важным обстоятельством явилась значительно более высокая себестоимость нового метода, включая стоимость наборов коммерческих диагностикумов и принципиально нового оборудования для постановки реакции полимеразной цепной реакции (ПЦР) - основы HLA-ДНК-типирования.
И, наконец, для клиницистов-трансплантологов имел значение тот факт, что до настоящего времени абсолютное большинство работ, доказывающих более высокую, по сравнению с серологическими методами, эффективность HLA-DNA-селекции, были выполнены на ретроспективном материале, что традиционно имеет более низкую доказательность для клиницистов.
Все вышесказанное, естественно, относится и к нашей стране, где до настоящего исследования не было проведено ни одной работы, посвященной использованию HLA-DNA-генотипирования, как при ретроспективной, так и перспективной селекции органных доноров.
Таким образом, можно сказать, что к моменту настоящего исследования как в отечественной, так и зарубежной клинической трансплантологии сложился «определенный замкнутый круг», при котором отсутствие клинических данных, в первую очередь, при перспективной селекции доноров приводило к отсутствию должного внимания к методу HLA-DNA-генотипирования, уже зарекомендовавшему себя при трансплантации костного мозга и открывающему принципиально новые возможности в трансплантации солидных органов..
Исходя из вышесказанных соображений, являлось целесообразным провести исследование, посвященное изучению возможностей использования метода HLA-DNA-генотипирования в условиях работы трансплантологической службы г.Москвы, являющейся крупнейшей в России. Данная трансплантологическая служба с 1995 года в соответствии с законом РФ о трансплантации органов и/или тканей, принятом в 1993 году, работает на принципиально новой структурной основе, которая включает в себя независимый координационный центр органного донорства, осуществляющий не только забор органов и HLA-типирование доноров, но и их селекцию и распределение, на основе последнего, по 9 трансплантологическим центрам г.Москвы, где находятся HLA-типированные реципиенты, входящие в лист ожидания г.Москвы и Московской области.
Данная работа ставила перед собой следующие цели: осуществить выбор из числа существующих в настоящее время методов HLA-DNA генотипирования наиболее полно соответствующий условиям клиники трансплантации солидных органов с учетом особенностей развития клинической трансплантологии в России; установить степень эффективности селекции пар донор-реципиент по специфичностям HLA-DRBI гена, выявляемым с помощью HLA-DNA генотипирования; на основании полученных данных предпринять попытку оптимизации программы, применяемой в компътерной практике, практической селекции тканесовместимых доноров.
Для достижения поставленных целей предполагалось решение
следующих задач:
1. Исходя из современного состояния трансплантологической
службы России, провести выбор метода HLA-DNA
генотипирования, адекватного для клинической
трансплантологии по своей эффективности, технической
доступности, себестоимости при наличии официального лицензирования МЗ РФ.
-
Провести сравнительное исследование (технической эффективности ДНК и серологического HLA-DR типирования).
-
Осуществить HLA-DRB1 генотипирование реципиентов, входящих в лист ожидания Московского координационного центра органного донорства (700 чел).
-
Исследовать распределение HLA-DRB1 специфичностей в контрольной группе — здоровой московской популяции.
-
Провести ретроспективный анализ для установления эффективности трансплантаций в HLA-DRB1-несовместимой группе донор-реципиент.
-
Провести анализ эффективности трансплантации почки в группах с различной степенью HLA-DRB1 совместимости при перспективной селекции на основе HLA-DNA генотипирования.
7. Создать и апробировать новую структуру
- трансплантологической службы — лабораторию HLA-DNA
селекции тканесовместимых доноров, перспективную как для использования в других трансплантационных центрах России, так и при создании национальной трансплантационной программы.
8. Разработать организационные мероприятия,
способствующие эффективному использованию
возможностей HLA-DNA генотипирования в практической
трансплантологии.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА Впервые установлена возможность для повышения выживаемости аллогенных трансплантатов почки использования в селекции донора эффекта HLA DRB1 гомозиготности реципиентов и доноров трансплантата.
Разработана принципиально новая компьютерная программа для более эффективной селекции пар донор-реципиент на основе HLA DNA-DRB1 генотипирования.
Установлено двукратное увеличение количества HLA DRB1 гомозигот среди реципиентов аллотрансплантата почки, что открывает принципиально новые возможности для клинической трансплантологии и разработки проблемы «HLA и болезни».
Выбрана, апробирована и внедрена оптимальная для условий Москвы и России система HLA DNA —DRB1 генотипирования (фирма ДНК-технология, лицензированная МЗ РФ). ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
Впервые в клинике трансплантации почки.установлен уровень преимущества в эффективности выявления HLA специфичностей методом HLA-DNA генотипирования, по сравнению с серологическим HLA типированием.
Впервые, благодаря использованию HLA-DNA
генотипирования, в России достигнута эффективность трансплантации почки, превышающая таковую в передовых трансплантологических центрах мира.
Разработана новая организационная структура HLA типирующей лаборатории, использующей различные методы HLA селекции донора в трансплантационном центре.
Впервые получены данные об абсолютном приоритете специфичностей HLA класса II, по сравнению с классом I, при селекции донора в трансплантационных центрах с "коротким" листом ожидания.
Материалы диссертации опубликованы в 8 печатных работах,
изданных в России и за рубежом, а также доложены на: 11th European
Congress of Histocompatibility, 2-5 April 1997, Budapest; The 4Ih
International Society for Organ Sharing Congress, Washington DC, July 8-
13. 1997; I Всероссийский съезд по трансплантологии и искусственным органам, 8-Ю октября 1998 года, г.Москва.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ Диссертация изложена на полстраницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, характеристика материалов и методов исследования, результаты собственных исследований и их обсуждение, выводы, указатель цитируемой литературы. Содержит 12 таблиц и 8 рисунков. Библиография состоит из 105 наименований.
![Клинико-функциональные и гемодинамические аспекты единственной почки у детей [Электронный ресурс]](/i/i/4450/190887.png "Клинико-функциональные и гемодинамические аспекты единственной почки у детей [Электронный ресурс] Макарова Юлия Вячеславовна")