Введение к работе
Актуальность проблемы.в последние годы большое внимание исследователи уделяют изучению влияния межклеточного матрикса на различные процессы в клетках.Было обнаруїено, что полимеры межклеточного матрикса играют важную роль в регуляции метаболизма, а также в пролиферации и дифферениировке клеток. Однако при моделировании различных этапов иммунного ответа в системе їм. vitro из рассмотрения исследователей долгое время выпадал тот факт, что в организме иммунные реакции развертываются в окружении межклеточного (экстраиеллюларно-го) матрикса.Он состоит из трех компонентов : коллагена, лро-теогликанов и гликопротеидов. Основным его компонентом являются протеогликаны, содержащие, сульфатированные молекулы глюкозаминогликанов: хондроитин-сульфат (ХС), гепаран-сульфат (ГС), кератан-сульфат, гепарин и гиалуроновую кислоту. Многочисленными работами было показано (Петров Р.В., Хаитов P.M. 1981; Laura L.S, Pfc6dvi*lvR. 1986), что искусственные полиэлектролиты (ПЭ), введенные в организм, влияют на разные стадии иммунного ответа.Вполне закономерно было предположить, что и эндогенные полиэлектролиты межклеточного матрикса также могут модифицировать реакции иммунокомпетентных клеток.В пользу такого предположения свидетельствуют также сообщения об активном влиянии полиионов матрикса на метаболизм, пролиферацию и дифферениировку нелимфоидных клеток (Levitt D- et a*
В качестве системы для определения механизма действия и основных клеточных эффектов ПЭ, была ЕЫбрана суспензия клеток селезенки мьшей и некоторые Сыстропролиферируюние линии клеток лимбом человека.
Остаются невыясненными молекулярные механизмы влияния ПЭ матрикса на плазматическую мембрану.Неизвестно, каким образом эти процессы елияют на синтез новых ПЭ в ходе иммунного отЕета.Эти проблемы затрагивают ключевые моменты ак-ваиии лимфоцитов (Ли) и их рекение поможет ответить на вопоос,
что обеспечивает иммуностимулирующую активность естестьеных По матрикса.
Цель и задачи исследования.Целью работы было изучение иммуномодулирующего действия ПЭ межклеточного матрикса на ликфоидные клетки и на процессы взаимодействия между ними. Задачи исследовании.
I.Изучить влияние ПЭ мелклеточного матрикса на самые ранние процессы активаиии лимфоцитов (синтез РНК , синтез ДЧК, экспрессия реиепторов для интерлейкина-2 (Ил-2).
2.Определить интерлейкиногенные свойства ПЭ межклеточного матрикса.
3.Изучить влияние ПЭ на процессы дифферениировки лимфо-идных клеток (индукиия антителосекретирующих клеток, синтез иммуноглобулинов и ар).
4.Определить влияние ПЭ межклеточного матрикса на пролиферацию некоторых Оыстропролиферирующих лимфомных человеческих линий.
Научная новизна результатов исследования.
Впервые проведено систематическое изучение регуляторного действия полиэлектролитов межклеточного матрикса на клетки иммунной системы.Выявлена естественная регуляторная роль молекул клеточного микроокрунения и доказано, что микроокружение не является только инертным наполнителем межклеточных пространств, а выполняет функцию активного регулятора жизнедеятельности клеток помещенных в него.
Впервые показано отличие естественных полиэлектролитов матрикса от обычных ионофоров и каналогенов, обеспечивающих перенос ионов путем взаимодействия непосредственно с липидами клеточной мембраны.Показано также и их отличие от действия В- и Т-клеточных митогенов -ЛПС и Кон А как на пролиферации;, так и на дифферениировку лимфоидных клеток.
Впервые доказано, что, не обладая собственой митогенной активностью , ' полиэлектролиты матрикса могут слупить усилителями других эффекторов.В частности, вместе с субоптимальными дозами митогена или совместно с. активаторами протеинкиназы С , полианионы матрикса могут йндушровйть выход покоящихся лимфоцитов в Gi фазу клет&чноГР цикла
и экспрессию рецепторы к Ил-2..
остановлено, что кроме участия в активами/, клєтсч^гіу делений ПЭ могут служить активаторами в дифФерекииговке Б-клеток сами по себе, так и в качестве ко-фактоооЕ совместно с активаторами протеинкиназы С и Ил-2. При этой гликопротеиды мембраны лимфоцитов , служащие рецепторами для некоторых ;.'/тогенов и самих иммуноглобулинов, остаются неповрежденными и доступными после воздействия ПЭ матрикса. Доказано тормозящее влияние ПЭ на пролиферацию быстро-пролиферирующих линий человеческих клеток, что открывает возможностть поиска препаратов для подавления роста бласт-ных клеток на основе естественых межклеточных ПЭ.
Практическая значимость работы.
Новые научные факты, представленные в диссертации, дополняют современные знания о тонких механизмах активации иммунитета естественными компонентами межклеточного матрикса (полианионы: хондроитин С (ХС), гепаран-сульйат (ГС), гепарин и дерматан-сульфат (ДО и показывают их илентичность во многих аспектах с синтетическим полиэлектролитом декстран-сулъфат. Исследование важных для физиологии клетки процессов после воздействия полиэлектролитами доказывает не только безвредность полиэлектролитов матрикса для клеток иммунной системы, но и их адъювантное влияние на многие клеточные процессы. Их воздействие на развитие Оластных клеток позволяет сделать вывод, что они являются активными регуляторами жизнедеятельности клеток.В связи с этим методические подходы, примененные в данной работе, могут быть использованы при изучении молекулярной фармакологии препаратов с иитотоксическим действием.
Публикация результатов исследовании и апробация счбсть:. По теме диссертации опубликовано о работ.Основное результаты доложены на международных конференциях болгарски) ученых ( Москва 1959, 1990 и Пловдив, 1990 >.
Объем и структура работы.Работа написана по оСггопричяттму плану , состоит из введения, обзора литературы, материален и методов, результатов исслевованиня. обсуждения с-з.зулОтатс v. выводов. Список литературы включает НО источнике?:. ;;г- -их^С зарубежных авторов.Работа изложена нэ 32 стр. магіїнопис-г: :
