Введение к работе
Актуальность проблемы. В настоящее время существует несколько методов иммунотерапии опухолей. Большой популярностью пользуется экспериментальная ' и клиническая терапия злокачественных новообразований с помощью компонентов стенок бактерий. В качестве иммуномодуляторов в лабораториях и клиниках широко используют лшополисахарид (ЛПС) и мурамилдипептид (ЫДП) (главным образом их производные)-гликоконъюгаты бактериального происхождения, , обладающие иммуностимулирующими свойствами. Было продемонстрировано, что комбинация ЛПС и МДП (или его производного глюкоаамишлмурамйлддпептида), способны вызывать регрессию опухолей tBloksma N.. et а!., 1984). Основным препятствием для использования в онкологических клиниках бактериальных иммуномодуляторов является их токсичность. Противоопухолевое и токсическое действие ЛПС .опосредуется фактором некроза опухоли (ФНО). При этом известно, что наиболее чувствительны к токсическому действию иммуномодуляторов, таких как ЛПС и ФНО, животные-опухоленосители (Bartholeyns J., et.alj 1987, J -osnic J.A... et.al, 1989, Mulrhead M.J., et.al., 1981].
Анализ данных литературы показал, что в 47Ж случаев онкологические больше умирают от бактериальных инфекций, при этом наиболее часто смерть вызывают, грамотрицателъные бактерии [Inagakl J., et.al., 1974]. Инфекционные процессы не только чаще возникают иа фона ослабленного опухолью иммунитета, но и оказываются более фатальными для онкологических больных. Гибель больных опухолями наступает из-за повышенной чувствительности организма к токсическим эффектам эндотоксина.
Возможно, что феномен гиперчувствителыюсти
-4- . опухоленосителей к эндотоксину связан с явлением кахексии у онкологических больных. В этом случае даже минимальные количества эндотоксина, содержащегося в сыворотке, могут, индуцировать продукцию ФНО, что наблюдается в некоторых случаях опухолевой кахексии IBalxwlll P., et.al., 1987].
Имеются единичные работы, в которых обсувдается вопрос о механизмах повышения чувствительности животных с опухолями к токсическому действию ЛПС. Известно, что в летальности при введении эндотоксина принимает активное участие ФНО IBeutler В.A., et.al., 1985], однако его роль в повышенной летальности опухоленосителей не изучена. Данные литературы показывают, чтосенсибилизация к летальному действию ЛПС, связана с активацией клеток ретикулоэндотелиальной системы (РЭС) [Berendt M.J., et.al. 1980, Bredfield J.W.B., et.al., 19801. Было обнаружено, что моноциты онкологических больных способны продуцировать повышенное количество ФНО при стимуляции ЛПС In vitro Шага К., et.al., 1907], однако ато не было показано для системы In vivo.
В связи с изложенным выше, изучение механизмов развития гиперчувствителыюсти опухоленосителей к эндотоксину помовэг приблизиться к решению проблем токсичности некоторых терапевтических препаратов, используемых в онкологических клиниках.
Цель и задачи исследования. Целью исследования являлось изучение механизмов развития пшерчувствительности мышей-опухоленоситдлей к летальному действию комбішащш ЛПС и ЦДЛ и изучение роли ФНО в этом процессе. В связи с этим перед исследованием были поставлены следувдие задачи: I. Изучить возможность переноса гиперчувствительности к
эндотоксиновому шоку интактным ЖИВОТНЫМ от животных опухоленосителей.
2. Изучить участие, клеток иммунной системы в процессе
сенсибилизации к эндотоксиновому шоку.
3. Изучить динамику продукции ФНО In vivo при введении ЖС и
ВДІ у мшей-опухсленосителей и мышей, сенсибилизированных
некоторыми факторами организма мышей-опухоленосителей.
4. Изучить влияние сенсибилизации факторами организмч
опухоленосителей на продукцию ФНО In vitro.
-
Изучить некоторые биохимические характеристики факторов сенсибилизации.
-
Исследовать возможность переноса гишрчувсгвительности к ФНО от мышей-опухоленосителей интактнш животным.
Научная новизна работы. В процессе настоящего исследования нами были впервые описаны следующие факты:
-
Состояние гиперчувствительности к эндотоксиновому шоку мокет быть перенесено интактным животным от мышей-опухоленосителей с помощью сиворотки.
-
Факторы, содеряащиеся в сыворотке опухоленоситг"ей и сенсибилизирующие швотных к токсическому действию ЛПС и ЩЦІ, относятся к веществам с молекулярными массами 10-30, 100-300 и >300 кД.
-
Состояние гиперчувствительности мшпей-опухоленоситолей и мышей, сенсибилизированных сывороткой опухолевых животных, сопрсвокдается гиперпродукцией и длительной персистенцией ФИО в крови, после введения ЛПС и ЩЦІ.
-
С помощью сыворотки мышей-опухоленосителей MOEHO повысить чувствительность интактных животных к токсическому действию рекомбинантного ФНО.
-6-Теоретическая и практическая ценность выполненного
исследования. Принципиальное значение имеет впервые описанный нами факт, свидетельствующий о возможности переноса гиперчувствительности с помощью сыворотки. Теоретическая ценность этого феномена состоит в том, что сенсибилизацию к токсическому действию ЖС у опухоленосителей вызывают гуморальные факторы, накапливающиеся в организме хозяина. Практическая ценность этого факта заключается в том, что в будущем могут быть разработаны методы сорбирования факторов сенсибилизации и тем самым снижена гиперчувствительность онкологических больных к эндотоксину. Значительный научный интерес представляют собой данные о гиперпродукции ФИО у мышей-опухоленосителей и мышей, сенсибилизированных сывороткой опухоленосителей. Теоретическая ценность . этих наблюдений состоит в том, что они раскрывают механизм повышенной летальности мышей-опухоленосителей при инъекции ЛПС и МШІ. В целом настоящая работа позволяет выделить -некоторые особенности течения эндотоксинового шока у мышей-опухоленосителей .
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседании. Общества иммунологов (Москва, 1991). на I съезде иммунологов России (Новосибирск. 1992), на Xth Международном конгрессе иммунологов (Эдинбург, 1990).
Публикации. Основные положения диссертации изложены в 6 печатных работах.
Структура диссертации, диссертация состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы (4 главы), материалы и методы исследования, результаты собственных исследований (3
-7-главы), обсуждение полученных результатов, выводы и список литературы. Диссертация написана на русском языке на 108 страницах машинописного текста, иллюстрирована 6 таблицами. 16 рисунками и I схемой. Указатель литературы содерзсит 152 источника, из которых 6 отечественных и 146 иностранных.
