Введение к работе
Актуальность проблеммы.
Моноциты периферической крови являются важным звеном в иммунной системе человека. Благодаря своим свойствам фагоцитировать чужеродный материал, опосредовать антителозависимую цитотоксичность (АЗЦТ), вырабатывать ряд факторов, они принимают активнейшее участие в защите организма, фундаментальная роль в процессировании и представлении антигенов обеспечивает" ключевую функцию этих клеток в индукции иммунного ответа, а регуляция клеточной пролиферации, регенерации, различных типов метаболизма и т. д. - их существенное значение в поддержании клеточного гомеостаза и других процессах. В патогенезе многих заболеваний иммунной системы лежат дефекты функционирования моноцитов. Поэтому изучение рецепторного аппарата и функционирования этих клеток может расширить знания об иммунной системе человека, поможет рещить некоторые практические проблемы клинической иммунологии.
Удобным инструментом в исследованиях такого рода могут стать моноклонадьные антитела (МКАТ). С их помощью можно не только маркировать поверхностные структуры клеток, определяя их принадлежность к той или иной популяции, но и изучать тонкие механизмы функционирования клеток. В институте Иммунологии МЗ СССР уме несколько лет ведутся работы по получению и использованию МКАТ к поверхностным маркерам лимфоцитов человека Так, получена панель МКАТ к дифференцировочным антигенам Т-лимфоцитов. В-лимфоцитов, которые нашли свое применение в клинике. Излучение ШАТ к поверхностным рецепторам моноцитов позволило бы расширить спектр антител, применяемых в клинической иммунологии, и помогло бы в изучении некоторых особенностей функционирования этих клеток в норме и патологии.
- г -
Цель работа Получение моноклональных антител к поверхностным антигенам моноцитов человека, характеристика их, исследование функциональной активности, изучение возможности применения для иммунодиагностики.
Задачи исследования.
-
Получение гибридом к поверхностным антигенам моноцитов' человека
-
Серологическая и иммунохимическая характеристика полученных антител.
-
Характеристика поверхностных структур моноцитов, распознаваемых полученными антителами.
-
Исследование функциональной роли структур, выявляемых полученными антителами.
-
Изучение возможности использования подученных ЫКАТ для фенотипирования моноцитарного звена иммунной системы в норме и при некоторых формах лимфопролиферативных заболеваний.
Научная новизна.
Получены 5 гибридом, секретируицие моноклональные антитела против поверхностных антигенов моноцитов чг товека.
Проведен корреляционный анализ экспрессии дифференциро-вочных антигенов, выявляемых коммерческими ЫКАТ известной специфичности и полученными ЫКАТ.
Получены два ЫКАТ, T5G11 и ЛШОО, выявляющие два эпитопа одного антигена, обладающего характеристиками, отличными от характеристик известных антигенов.
Обнаружено, что )ТАТ T5G11 ингибирует FcR-опосрегованные функции моноцитов, благодаря необычному углеводному составу Fc фрагмента ЫКАТ.
Получено ЫКАТ T5Q11 с измененным углеводным составом Fc-
фрагмента, обладающее особыми функциональными характеристиками.
- Найдено, что полученные ЫКАТ модно применять в качестве реагентов для иммунофенотипирования больных с некоторыми формами лимфолейкозов.
Практическое1 значение работа
Получены гибридомы, которые могут быть использованы для наработки МКАТ в больших количествах. МКАТ, продуцируемые этими гибридомами распознают поверхностные структуры, характерные, в основном, для моноцитов периферической крови человека. Эти -нтитела могут использоваться в фундаментальных исследованиях для изучения субпопуляционной структуры лимфоцитов. Пэлученное антитело T5G11, ингибируюдее FcR-onwC-редозанные функции моноцитов, может быть использовано для изучения некоторых аспектов функционирования моноцитов, а в прикладных исследованиях - для оценки иммунного статуса в норме и при патологии, фенотипирования некоторых форм лимфо-пролиферативных заболеваний. Полученные ЫКАТ нашли применение в гематологическом отделении больницы им. Боткина и в БНГЦ 1С СССР для иммунофенотипирования больных, стр?-ающих острыми и хроническими формами моноцитарных, миелсмоноцитарных и миело-монобластных лейкозов.
Публикация результатов исследования и апробация материалов работы.
По теме диссертации опубликовано 4 работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на конкурсе молодых ученых (февраль, 1989) и на межлабораторной конференции Института имыунологмм КЗ СССР (май, 1991).
- 4 -Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 115 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 7 глав собственных исследований, включая материалы и методы исследования, обсуждения, выводов. Содержит 4 таблицы и 13 рисунков. Список литературы включает 155 работ отечественных и зарубежных авторов.