Введение к работе
актуальность проблемы. Бурное развитие промышленности в последние десятилетия привело к значительному увеличению числа аллергических заболеваний. По данным ВОЗ, аллергические заболевания вышли на 3 место в структуре общей заболеваемости. Около 40% населения развитых стран имеют скрытую или явно выраженную аллергию (Палеев Н.Р., Царькова Л.Н., Ворохов А.И. 1989).
Иммунологическим критерием эффективности гипосенсибилизиру-ющей терапии многие авторы считают нарастание блокирующих IgG- и IgG4-aHTHTeA (Djurup R., 1990). Отмечается очевидная корреляция между увеличением уровня IgG-, lgG4-aHTHTeA и эффективностью лечения (Gervazieva V.B., Mokronosova М.л., Agafonov V.E., 1993). Антитела IgG класса привлекают большое внимание в связи с поисками у них анафилактических свойств. (Yunginger J.W., Pauli D.R., Jones R.T., 1987) Установлено, хотя и косвенно, что IgG4-aHTHTe-ла, часто встречающиеся в сыворотках больных аллергией, могут обладать как функцией блокирующих антител, так и реагиновой активностью (Stanworth D.R., 1986). В то же время, ряд авторов считают, что IgG4-aHTHTeAa играют незначительную роль в патогенезе аллергии ( Poulsen L.K., Stahl Skov P., 1988) Отдельные авторы полагают, что выработка специфических IgG4-aHTHTeA к различным аллергенам (пищевые, инсектные, бытовые и др.) отражает состояние нормального иммунного ответа человека. Продукция этих антител позволяет быстро очистить организм от инородных белков, абсорбированных в крови (Lee D. , Edwards R.G., Dewdney Janet M. , 1991). Все вышеизложенное свидетельствует, что значение этих антител в патогенезе атопической аллергии изучено еще недостаточно. Это в значительной степени объясняется отсутствием доступных, высокочувствительных методов, позволяющих количественно определять содержание IgG- IgG4-aHTHTeA (IgG-AT, IgG4-AT) как при однократных исследованиях сывороток, так и в динамике иммунотерапии.
В этой связи ЦЕЛЬЮ настоящего исследования является: разработка иммуноферментной (ИФА) тест-системы для количественного оп-
ределения аллергенспецифических IgG- и IgG4-AT и изучение роли IgG- и IgG4-AT при аллергической патологии человека.
Для достижения этой цели требовалось решить следующие ЗАДАЧИ:
а) получить референс-реагенты и коньюгаты, позволяющие ко
личественно определять содержание аллергенспецифических IgG- и
IgG4-AT;
б) отработать параметры тест-систем для количественного оп
ределения аллергенспецифических IgG- И IgG4-AT;
в) изучить диагностическое значение IgG- и lgG4-AT при ал
лергических заболеваниях, вызванных аллергенами из коровьего мо
лока, куриного яйца, D.pteronyssinus и D.farinae;
г) изучить динамику изменений уровней аллергенспецифических
IgG- и IgG4-AT в процессе специфической гипосенсибилизирующей те
рапии аллергенами из клещей D.pteronyssinus и D.farinae.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. В результате проведенных исследований получены следующие новые данные:
-
Разработаны референс-реагенты (контрольные образцы с известным содержанием IgG и IgG4) на основе иммуноглобулиновой фракции сыворотки человека и показана их адекватность для количественного определения в ИФА содержания аллергенспецифических IgG- И IgG4-AT.
-
Разработана модульная тест-система ИФА, позволяющая определять в исследуемых образцах сывороток количественное содержание IgG- и IgG4-AT к широкому спектру аллергенов.
-
Проведено количественное исследование содержания специфичных к аллергенам из коровьего молока, куриного яйца, D.pteronyssinus, D.farinae IgG- и Ig04-AT у различных групп аллергических больных и здоровых людей с применением разработанных нами им-муноферментных тест-систем. Выявлена и подтверждена связь между повышением содержания этих антител и гиперчувствительностью к вышеуказанным аллергенам, установленной клинически и подтвержденной наличием IgE-AT. При этом, повышенное содержание аллергенспецифи-
ческих IgO- и IgG4-AT выявлено даже у тех больных, у которых при наличии соответствующей клинической картины аллергенспецифические IgE-AT не обнаружены.
-
Впервые установлены показатели содержания в сыворотке крови здоровых людей аллергенспецифических IgG- и IgG4-AT к аллергенам нз коровьего молока, куриного яйца. Выявлено, что эти показатели различны для каждого аллергена. Показано, что наличие IgG- и IgG4-AT в пределах вышеуказанных норм отражает состояние нормального иммунного ответа человека на введение в организм продуктов, содержащих данные белки.
-
Показано, что иммунологической основой клинической эффективности специфической иммунотерапии больных аллергенами из D.pteronyssinus и D.farinae является достоверное увеличение содержания в сыворотке крови противоклещевых IgG- И IgG4-AT.
В результате исследований разработана технология получения иммуноферментных тест-систем для количественного определения аллергенспецифических IgG- и IgG4-aHTHTeA к широкому спектру аллергенов. Инструкция по изготовлению и контролю утверждена Ученым Советом НИИВС им И.И.Мечникова РАМН "31" октября 1991 года.
![Конструирование иммуноферментных тест-систем на основе авидин-биотинового взаимодействия для определения антител (дифтерийных, столбнячных, коклюшных, анти-HBs) [Электронный ресурс]](/i/i/4438/210884.png "Конструирование иммуноферментных тест-систем на основе авидин-биотинового взаимодействия для определения антител (дифтерийных, столбнячных, коклюшных, анти-HBs) [Электронный ресурс] Вязникова Татьяна Владимировна")
