Введение к работе
Актуальность проблемы.
Герпесвируспые инфекции являются одной из наиболее ажных проблем здравоохранения. Это обусловлено повсеместным |аспространением среди здорового населения цитомегаловируса CMV), вируса простого герпеса I и II типа (HSV ІШ), Эпштейна-Барр ируса (EBV), являющихся наиболее яркими представителями ерпесвирусов. Установлено, что частота обнаружения специфических [ммуноглобулинов класса IgG к CMV, HSV I\II, EBV в сыворотке' крови юпуляции здорового населения составляет 85.5-99.8% [Канторович '.А. с соав., 1980; Жданов В.М., 1982; С.Лурия с соав., 1981;.С.Литвин соав., 1994; Condoreli F. et al., 1993; LuiP. Et al., 1994 и др.].
Существование передачи герпесвирусов (CMV, HSV I\II, EBV) от іатери к ребенку, включая и вертикальную передачу определяет одно о ведущих мест этих инфекций в перинатальной патологии и мертности [Демидова С А с соав 1968 1981; Фарбер Н А. с соав 975 1987; Канторович РА с соав ,1980; Самохин ПА 1987! Федоров М В! с соав.1994 Симакова М Г с соав 994 DiosР 971 Stern Н 1977 Shfraki К et al 1980; Stagno, S et al 1985; tULL WHO 1985] Пр этом клинико-лабораторшя диапюстика нутоиутРобных герпесе
Здавна ГСуїих 7Г с соаГ 1997 Dwve D E et a 1993їи да] Зность имения проблемы в„побного ижЬ широваТия бусловлена nS всего Гполиэт^опншостью герпесвипус ой атологии шГто^алов^ус т^^^п^^?2бТ^ш^ Гпштейна Баог^Z^l 4^^S^^^^J^nSi
лаГшиїокиГ, спелом ^^^Ш^К^НИОПП^^с
Это определяет необходимость комплексного обследования не олько ребенка, но и его матери, основной целью которого является бнаружение активной формы герпесвирусной инфекции у матери и іаркеров врожденной герпесвирусной инфекции у новорождённого, то важно для прогнозирования риска развития перинатальной атологии [Кудашов Н.И. с соав., 1998].
Внутриутробное инфицирование происходит в антенатальном ли интранатальном периодах развития плода. Около 2% детей нфицируются внутриутробно и почти 10% - во время родов или разу после них. В то же время, лишь 10% инфицированных детей аболевают в неонатальном периоде [Цинзерлинг А.В., Шастина В.В., 988; Шабалов Н.П., 1996]. В последние годы отмечается значитель-
ный рост частоты смешанных внутриутробных инфекций [Самсыгит Г.А., 1996; Нисевич Л.Л. с соав., 1998 и др.]. Учитывая широку: распространённость герпесвирусов в природе, а также возможность v, длительной персистеншш в организме человека, можно предположит одновременное заражение плода и новорождённого нескольким вирусами. В настоящее время существуют единичные работь посвященные изучению смешанных инфекций, которые показываю' что причиной тяжелых форм поражения детей являются н моноинфекции а ассоциированные вирусно-вирусные и вируснс бактериальные инфекции [Газовская Л.А,1997; Жданова Л.И. 199' Кудашов Н И с соав 1998]
До настоящего момента не проводились исследованш
касающиеся комплексной клинико-эпидемиологическо
характеристики смешанных герпесвирусных инфекций в патологи плода и новорождённого.
В последние 10 лет созданы объективные предпосылки дл выяснения роли антиэндотоксинового иммунитета (АЭИ) патогенезе разных заболеваний. Разработаны авторски диагностические технологии изучения клеточного [Яковлев М.Ю. соав., 1993; Лиходед В.Г. с соав., 1997] и гуморального звеньев АЭ1 [Уразаев Р.А. с соавт., 1992].
Тем не менее, в литературе нет работ, посвященных изученик состояния и взаимосвязи иммунологических показателе! эндотоксинемии у доношенных детей, инфицированны: герпесвирусами.
Все изложенное выше указывает на актуальность вьібранно! темы научного исследования.
Цель исследования.
Установить широту распространения герпесвирусно! инфекции среди здорового населения и её роль в формированш неонатальной патологии, выяснить её влияние на показател! клеточного и гуморального звеньев антиэндотоксинового иммунитет; и обосновать оптимальные методы ранней диагностики.
Задачи исследования.
1.Провести клинико-лабораторное обследование женщин первичных доноров крови, женщин, родивших здоровых детей I! женщин, родивших детей с признаками перинатальной патологии нг наличие маркёров герпесвирусов с использованием полимеразноіі цепной реакции и иммуноферментного анализа.
2.Осуществить клинико-лабораторное обследование здоровы>
новорождённых детей на наличие маркёров герпесвирусов с
использованием полимеразной цепной реакции н
иммуноферментного анализа.
3.Провести клинико-лабораторное обследование новорождённых детей с перинатальной патологией на наличие маркёров
герпесвирусов с использованием полимеразнои цепной реакции и иммуноферментного анализа.
4.0пределить диагностическую значимость индикации специфических иммуноглобулинов класса IgM к вирусу цитомегалии для диагностики острой цитомегаловирусиой инфекции у новорождённых.
5.Провести сравнительный анализ течения заболевания у новорождённых детей при моно- и микст.шфицировании вирусами CMV, HSV I\II, EBV.
6.Исследовать состояние и динамику показателей клеточного и гуморального звеньев антиэндотоксинового иммунитета здоровых новорождённых и детей с наличием ДНК {DNA) герпесвирусов (CMV, HSV ШI, EBV).
Научная новизна.
Впервые путем проведения проспективного контролируемого клинико-эпидемиологического и лабораторного обследования с использованием комплекса современных высокочувствительных методов (ИФА и PCR) индикации маркеров герпесвирусной инфекции получены новые данные о широте распространения герпесвирусов (CMV, HSVIMI, EBV) в популяции здорового населения г. Москвы. Экскреция DNA герпесвирусов выявлена у 1\4 части женщин -первичных доноров крови.
Установлено, что в 64.5% случаев новорождённые дети с перинатальной патологией инфицированы герпесвирусами, при этом почти у половины из них имело место мнкстинфицирование (52.7%).
Получены данные, указывающие на низкую диагностическую значимость определения Anti-CMV IgM в сыворотке крови у ііедоношенньїх детей в возрасте от 2 до 45 дней жизни для диагностикн острой CMV, а в возрасте 1.5 месяцев и более диагностическая значимость этого исследования повышается.
Показано отсутствие различий в частоте обнаружения Anti-CMV IgG, Anti-HSV I\II, Anti-EBV IgG в группе здоровых новорождён-ных и детей с перинатальной патологией в раннем неонатальном териоде что указывает на низкую диагностическую значимость данных маркеров для этой возрастной группы.
Подтверждена диагностическая ценность обнаружения DNA DMV, HSVIMI, EBV В слюне, моче и сыворотке крови методом PCR для верификации клинического диагноза у новорождённых детей.
Определены клинические особенности течения раннего неонатального периода у новорождённых детей с перинатальной гатологией, инфицированных герпесвирусами. Доказано, что «благоприятное течение раннего неонатального периода, более жкелые поражения центральной нервной системы (ЦНС), высокая
частота развития гнойно-воспалительных заболеваний достоверж чаще встречались у детей с микстинфицированием.
Установлено, что у здоровых новорождённых в первые сутк1 жизни титр антител к Эт увеличивается, а эндотоксинсвязывающа5 способность лейкоцитов периферической крови остаётся на низкол уровне.
Показано, что у доношенных новорождённых дете* внутриутробное инфицирование герпесвирусами сопровождаете; сниженными показателями клеточного и гуморального звеньев АЭИ У детей с микстинфицированием степень снижения показателей АЭИ более выражена, чем у детей с моноинфицированием.
Практическая значимость.
Результаты проведенного исследования позволили обоснован необходимость внедрения метода PCR для обнаружения герпесвирусных DNA в группах женщин с высоким риском перинатального инфицирования Беременные женщины с отягощенным анамнезом и дети с перинатальной патологией нуждаются в комплексном обследовании на наличие герпесвирусоЕ (CMV, HSV I\II, EBV).
Полученные данные позволили определить факторы риска
развития внутриутробной инфекции у новорождённых: наличие
хронических воспалительных заболеваний матери, эрозия шейки
матки, самопроизвольные выкидыши, мертворождение,
преждевременные роды, осложнённое течение беременности и родов, длительный безводный промежуток.
Внедрены в практику высокоинформативные методы оценки антиэндотоксинового иммунитета. Определены нормативные показатели клеточного и гуморального звена АЭИ у здоровых доношенных новорожденных, а также их диагностическая л прогностическая значимость при инфицировании герпесвирусами новорождённых детей.
Внедрение результатов исследования.
Результаты исследования внедрены в практику работы отделений патологии новорождённых и блока интенсивной терапии ДИКБ N6, в педагогический процесс кафедры неонатологии РМАПО.
Апробация работы.
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на 1-ой конференции, посвященной памяти профессора В.Н.Галанкина (Москва, 1998), на межрегиональном научно-практическом совещании врачей по теме: "Полимеразная цепная реакция в диагностике и контроле терапии инфекционных и наследственных болезней" (г Санкт-Петербург 1998) на совместной научно-практической конференции кафедры неонатологии РМАПО МНИИЭМим Г Н Габричевского и ДЕК ГКБ N7 (г Москва 1999)
Публикации.
По материалам исследований опубликовано 9 печатных работ.
Объем и структура диссертации.