Введение к работе
- -"Актуальность проблемы, ^.-"-Уч -Проблема изыскания новых антибиотиков как для медицинского, так и немедицинского применения в настоящее время не потеряла своего значения. Большая часть используемых в медицине антибиотиков выделена из культур актиномицетов. Помимо антибиотиков актиношцеты образуют и другие биологически активные вещества, такие как витамины, гормоны, ферменти, иммуномодуляторы, инсектициды, гербициды и др. Основываясь на современных исследованиях как советских, так и зарубежных ученых, мн имеем все основания полагать, что возможности актиномицетов как поставщиков биологически активных веществ далеко не исчерпаны.
Первым шагом на -пути к созданию новых природных антибиотиков является выделение микроорганизмов - потенциальных продуцентов новых антибиотиков из природных мест обитания. Перспективным источником получения новых соединений являются новые и' редкие культуры актиномицетов. Поэтому создание новых методов преимущественного выделения актиномицетов редких родов из природных мест обитания представляет собой актуальную задачу. Исследования по теме диссертации выполнялись по планам НИ? ВНИИ по изысканию новых антибиотиков АМН СССР на 1988, 1989, 1990 г.г. (N госрегистрации темы 0188.0010304), а также, по союзной проблеме "антибиотики" на 1986 -1990 годы.
Цель и задачи исследования.
Целью нашего исследования являлась разработка и исследование методов выделения из почвы актиномицетов в процессе изыскания продуцентов антибиотиков. Для реализации этой цели в процессе исследования разрешались следующие экспериментальные задачи:
1)Изучение методов предварительной обработки образцов почз,
качественных и количественных закономерностей выделения актиномицетов кз обработанных образцов.
Z)Изучение чувстЕигельности культур различных родов порядка Actinoir.ycetales к ряду антибиотиков и химических агентов для их оценки как селектишых агентов.
-
Исследование закономерностей выделения различных родов актиномицетов на средах с этими соединениями.
-
Выделение актиномицетов с помощью комплексного метода, за-лючающегося в посеве предварительно обработанного почвенного образца на селективную среду с несколькими антибиотиками различного характера действия.
-
Исследование антагонистических свойств выделенных культур актиномицетов и отбор культур, перспективных для изыскания новых антибиотиков.
-
Изучение таксономических характеристик выделенных актиномицетов и определение их родовой и видовой принадлежности.
-
Изучение строения пептидогликана и ДНК-ДНК гомологии у новых культур, выделенных в результате исследований и относящихся к редким родам актиномицетов.
Научная новизна
Впервые детал но изучена чувствительность актиномицетов различных родов к тобрамицину, налидиксовой кислоте, гелиомицину и к диоксидину с целью оценки возможности использования их в качестве селективных 'агентов. Установлено, что наиболее подходящим агентом ' для выделения актиномицетов из почв и подавления роста сопутствующих бактерий, обладающих стелющимся характером роста, является на-дидиксовая кислота, которая особенно благоприятна для изоляции
- з -редких родов актино"ицетов Amycolatopsis, Micromcncc- era, Streptosporangium и Saccharothrix.
Разработан комплексный метод выделения актиномицегов из предварительно обработанных карбонатом кальция образцов почвы, посеянных на селективную среду с несколькими антибиотиками (налидиксовой кислотой,тобрамицином, ристомицином или новобиоцином, нистатином).
При использовании разработанных селективных мєтодое из ..очвы выделены культуры актиномицетов, являющиеся представителями ноеых видов редких родов актиномицетов: Glycomyc-ез roseoluteus sp. nov. и Saccharothrix orenburg-is sp. nov. Были выделены также культуры Streptomyces enissocaesilis 4281a- ноеый продуцент антибиотика знтимицина А и Streptomyces misaraensts 4284/85 - новый продуцент антибиотика нетропсина.
Практическая ценность.
Разработан комплексный метод выделения актиномицетов из поч-зы, в результате применения которого- получена возможность изолиро-зать преимущественно редкие-роды а.ткношщегов, пр« ставляюцие іерспективньгй источник получения новых антибиотиков.
Подготовлена матрица для идентификации родов актиномицетов на основании морфологических и хеыотаксономических признаков,которая юсле программной обработки может быть использована для ускоренней идентификации родов актиномицетов.
В результате проведенной работы выделено 5195 культур актико-йщетов и собрана большая коллекция культур, относящихся к редким зодам актиномицетов, которая исгэльзуетсн в настоящее врекя для ізьюкания продуцентов антибиотиков и таксономического исследования ^которых групп актиномицетов. Из 64 выделенных штаммоз актиномице-
- 4 -тов во ВНИИ по изысканию ноеых антибиотиков АМН СССР получены анти биотики-сырцы, лечебные свойства которых изучены или изучаются в настоящее время.
Результаты диссертации использованы в методическом пособии кафедры биологии почв ф-та Почвоведения МГУ им. М. Е. Ломоносова "Почвенные актиномицеты", вошли составной частью в коллективную монографию "Поиск продуцентов антибиотиков среди актиномицетов редких родов".
Апробация работы. Результаты работы доложены на конференциях молодых ученых ВНИИ по изысканию новых антибиотиков АШ СССР (1986,1988 г. г.),на 1-ом советско-американском симпозиуме по антибиотикам и химиотерапии (Москва, 1988), Всесоюзном семинаре по направленному поиску антибиотиков и других биологически активных веществ (Москва, 1987) и Всесоюзном семиьаре по актуальным направлениям поиска антибиотиков" (Алма-Ата, 1989).
Публикации. Основное содержание работы опубликовано в 8 печатных трудах.
Объем и структура работы.