Сиалсодержащие гликоконглюгаты при раке яичников Карамазашвили, Лия Марковна

Введение к работе

Актуальность темы. Во многих странах мира в структуре онкологических зыоолеваиий одно из первых мест занимают злокачественные опухоли яичников. Однако, диагностика рака ячников но сей день вызывает определенные затруднения.. Известно, что в 60-807» случаев рак яичішков диагностируется на поздних стадиях своего развития (И.С.Краевская, 1978), что отрицательно сказывается на результатах лечения сольных. Такое скрытое течение болезни предопределяет актуальную необходимость разработки чувствительных и специфических тестов, способствующих ранней диагностике.

Известно, что в процессе злокачественной трансформации клеток происходят выраженные изменения в биосинтезе ганглиозидов -липидно связанных сиаловых кислот (ЛСК), локализированных в плазматических мембранах клеток (s.Hakomori et al. ; 1981). В результате этого изменяется состав, структура и организация ганглиозидов клеточной поверхности. И то же время имеются данные о способности опухолевых клеток постоянно сбрасывать фрагменты плазматических мембран в межклеточное пространство (s .Howard et al. ; 1981}. В результате гликолипид и гликопротён - связанные сиаловые кислоты - накапливаются в циркуляции, и по их уровню (в частности} можно диагностировать злокачественные новообразования.

Поскольку сбрасывание ганглиозидов с поверхности опухолевых клеток носит зачастую избирательный характер (Дятловицкая Э.В. и соавт.; 1984), в крови больных раком яичников появляются отдельные виды ганглиозидов, отсутствующие у здоровых доноров и у больных с неопухолевой патологией.

Обнаружение в крови больных раком отдельного вида ганглиозидов, не имеющего аналогов у здоровых лиц, может иметь важное значение при оценке степени заболевания, и его прогнозирования.

Цель задачи исследования. Цель дашюго исследования состоит в том, чтобы выявить взаимосвязь между биосинтезом ганг-лиозидов и метастазированием опухоли, а также улучшить раннюю диагностику рака яичников, что-даст возможность прогнозировать заболевание и повисить эффективность лечения.

Конкретные задачи работы:

1. Изучение содержания и профиля ганглиозидов в метастази-рущей (ШР-Л) и неметастазирующей (ВИР-OJ карциноме мышей- до и после воздействия циклофосмадида.

2. Использование сравнительной оценки содержания и состава ганглиозидов в опухолях яичников для дифференциальной диагностики.

3. динамическое наолвдение за уровнем общих (ОСЮ и лидидно-связанных (ЯСК) сиаловнх кислот в'сыворотке крови больных с опухолью яичников.

4. Динамическое наблвдение зй активностью галактрзилтранс-феразы СГТ) в сыворотке крови больных с опухолью'яичников.

5. Сопоставление изучаемых тестов с клиническим течением заболевания для оценки эффективности проводимого лечения.

6. Сопоставление результатов исследования с морфологической характеристикой опухоли и прогнозом заболевашш.

Научная новизна - Изучение содержания и профиля ганглиозидов в крови ошшшх и в удаленных опухолевых тканях является совершенно новым научным иссуіедованием, имеющим как теоретическое, так и практическое значение в диагностике и оценке степени заболевания. В теоретическом аспекте такая работа позволяет изучать особенности нарушения оиосинтеза ганглиозидов и их сорасы-вшше в кровоооращешю на стации предрака яичников. На практике такое исследование может иметь важное значение для объективной

- о -

оценки опухолей яичников, выоора тактики лечения и прогнозирования заболевания.

Ъперше в Союзе на оольшом клиническом материале нами были изучены уровни сиыловых кислот в сиворотке крови, опухолевые ткани в биологической жидкости (кисторная. асцетическая жидкость) больных с доорокачественными, пограничными и со злокачественными опухолями яичников.

Практическая значимость раоотц. заключается в поиске опухолевых маркеров, обеспечивающих возможность ранней диагностики заболевания и наблюдения за опухолевым процессом.

Положения на защиту

7. Совокупность данных, полученных при сравнении ганглио-зидов, интактных РМР-0 и ВМР-П, а также ганглиозидов опухолей, леченных циклофосфамидом,- указьшает на очевидную взаимосвязь между профилем ганглиозидов и способностью опухолей к метастази-рованию.

8. Аккумулирование и сбрасьшание вДд представляется непосредственно связанным с опухолевым генезом клеток яичников человека. Дедифференцирование опухоли сопровождается усиленным сбрасыванием вДз в систему кровообращения. *

9. Уровень ганглиозидов, в частности, липидносвязанных сиаловых кислот, может служить надежным, опухолевым маркером в диагностике рака яичников.

10. Изучение активности ГТ может быть использовано при динамическом наолкщении за больными раком яичников и для выбора эффективной терапии.

Внедрение. Методика определения ОСК и ЛСК внедрена в лечебную практику очдела гинекологии ОНЦ МЗ ГССР.

Апробация работы. Основные результаты исследования докладывались на общесоюзной конференции "Актуальные вопросы в биохимической и иммунологической диагностике злокачественных новообразований" (1989г.} и полностью опубликованы в 4 раоотах.

Объем и структура раооты. Диссертационная работа состоит из введения, Зглав (обзор литературы, материал и методы, собственные данные), заключения, выводов и указателя литературы. Работа содержит 5 рисунок и 18 таолиц. Список использованной литературы включает в себя 150 источников (48 отечественных и 102 иностранных). Диссертация наложена на l2tf страницах машинописи.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЯЩцОВАНИЯ

Экспериментальные исследования выполнены на самках мышеи лиши A/ Snail, в возрасте & недель, весом около 20 г, с подкожно имплантированной карциномой молочной железы ВМР-П, метастази-рувдей в печень и яичники в 1007а случаев и неметастазирующей карциномой молочной железы ШР-0. Циклофосфамцд вводили в дозе 150 мг/кг внутрибрюшинно, однократно, на 9-й день после прививки опухолей. На 9-ый, 12-ий, 15-ый, 19-ый и <3-ий день после прививки опухоли удаляли. Ганглиозиды выделяли из опухолевой ткани, очищали, растворяли в смеси хлороформ-метанол (2:1) и определяли содержание ЛСК резорциновым методом. Идентификацию ганглиозидов проводили способом тонкослойной хроматографии и (ТСХ) на пластинках с сшшкагелем о использованием свидетелей известного строения, а также путем исследования продуктов ферме нтолиза ганглио-зэдое нейрамидазой из нехолерного вибрина.

Клиническим материалом для исследования служили сыворотки крови, опухолевые ткани и ґ'Иологическге жидкости, взятые у боль-

пых' с различными опухолями яичников, которые лечились в клиниках Всесоюзного онкологического научного центра ЯШ СССР и Онкологического научного центра МЗ ГССР в период с 1987 по 1990 гг.

Предварительный диагноз был поставлен на основании гинекологического осмотра и дополнительных методов исследования (ульт-розвуковая томография - УЗТ, лапараскопия) и верифицирован при гистологическом исследовании операционного материала. У больных раком яичников оценку состояния заболевания на фоне комбинированного или комплексного лечения проводили по классификации ВОЗ (1972.). Рецидив заболевания выявляли на основе методов УЗТ, КТ (рентгеновская компьютерная томография), лапараскопии и гисто-цитологических исследований. Все больные раком яичников в зависимости от распространенности опухолевого процесса получали различные виды комбинированного или комплексного лечения. Лечение начинали с операции различного объема: экстирпация матки с придатками, большого сальника, надвлагалищная ампутация матки и резекция большого сальника, удаление придатков матки и резекция большого сальника. Операции проводились в зависимости от распространенности опухолевого процесса.

В послеоперационном периоде больные получали цикловую полихимиотерапию по одной из применяемых схем:' CMF (циклофосфан, ме-тотрексан, 5-фторурацил), Ск? (циклофосфан, адриамшпш, 5-фторурацил).

кровь для определения сиаловых кислот отбирали натощак до операции, не менее, чем через три недели после операции и перед началом очередного курса химиотерапии.

Обследогано 12а первичных оольннх в возрасте от 20 до 60 лет, которые о.-йьеденены в следующие группы: I группа - 23 Ооль-

ных с доброкачественными опухолями яичников с диагнозом "цис-таденома яичников", П группа - 19 оольных с пограничными опухолями яичников с диагнозом "папиллярная цистаденома", Ш группа - Ь6 оольных раком яичников 1-іУ стадий (злокачественные эпителиальные опухоли), У 70 больных раком яичников заоолева-ние оыло наШ-іУ стадии, и только у 16 - на і-П.

Контрольная группа состояла из

Для определения ганглиозидного состава Оралась оиологи-ческая жидкость. Изучаемый, операционный материал был рааоит на четыре грушш. В ІУ оыли обьеденены 30 образцов опухолей, рака яичников (эпителиальные опухоли І-ІУ стадии), в Ы г- 15 образцов опухолей пограничного типа, во П группе - 20 образцов доброкачественной опухоли и в I - 5 образцов морфологически неизмененных яичников от больных, оперированных по поводу рака' матки. В ІУ группе асцитическая жидкость была исследована у 15 больных. Во II группе отдельно исследовали оболочку кисты и кистозную вдкость. Образцы опухолей Ш группы представляли собой оболочку кисты с папиллярными разрастаниями на ее внутренней поверхности, В десяти случаях эти опухоли оыли исследованы целиком, а в пяти изучали отдельно оболочку и легко отделяемые разрастания. -

У всех больных диагноз был верифицирован морфологически.

Активность П исследована у 86 больных с различными стадиями болезни (І-ІУ). Активность ГГ определена у перничных больных и в динамике заболевают после химиотерапии и оперативного вмешательства.

Контрольная группа состояла из 20 женщин. Полученный данные обработаны методом вариационной статис- тики. Достоверность различий оценена по критерию Стьюдента,

Похожие диссертации на Сиалсодержащие гликоконглюгаты при раке яичников

Патофизиологические основы коррекции эндогенной интоксикации на фоне полихимиотерапии при раке яичников [Электронный ресурс]Беляева Евгения Васильевна