Введение к работе
Актуальность. Современная химиотерапия злокачественных
новообразовании располагает арсеналом высокоактивных цитостатиков. Однако в клинической практике терапевтическая эффективность не всегда может быть достигнута, что в определенной степени обусловлено множественной лекарственной устойчивостью опухолевых клеток (Aller S.G., 2009; Yuan Н., 2008). Одним из механизмов, определяющих резистентность опухолевых клеток к цитостатикам, является система активного выведения препарата из клеток, представленная Р-гликопротеином и белком множественной лекарственной устойчивости (Aller S.G., 2009; Chavanpatil M.D., 2006; Van der Sandt I.C.J., 2001). С целью преодоления этого барьера увеличивают дозы лекарственных препаратов, что в значительной степени приводит к усугублению побочных эффектов со стороны различных органов и систем. Таким образом, многие цитостатики, являющиеся субстратом Р-гликопротеина, теряют свою клиническую значимость (Huang J., 2008). Актуальность этой проблемы послужила стимулом для разработки подходов к преодолению множественной лекарственной устойчивостью посредством создания наносомальных форм цитостатиков, позволяющих доставить лекарственное вещество внутрь клеток. На сегодняшний день этот подход реализован в наносомальных препаратах на основе альбумина (Абраксан, производитель Абраксис (США)), полиглютаминовой кислоты (Ксиотакс, производитель Сел Терапеутикс (Южная Корея)), полимерных мицелярных наночастиц (Генексол, производитель Самиянг (Южная Корея)) и липосомальных наночастиц (Келикс, производитель Шеринг-Плау (США)). Представитель группы таксанов, паклитаксел обладает мощным цитотоксическим эффектом в исследованиях in vitro, однако его клиническое применение лимитировано следующими показаниями: немелкоклеточный рак легкого, рак яичников, рак молочной железы и саркома Капоши у больных СПИД-ом. Паклитаксел входит в европейские и российские клинические рекомендации как препарат первой и второй линии при
перечисленных выше показаниях (Артамонова Е.В., 2004; Переводчикова Н.И., 2001, Tulpule, 2002; Dhillon, 2005; Stebbing, 2006). Паклитаксел является субстратом Р-гликопротеина в связи с чем, его эффективность в отношении резистентных опухолей существенно снижается (Vicari L., 2008; Prabu P., 2010; Huang J., 2008; Chavanpatil M.D., 2006). Низкая растворимость паклитаксела требует введения в лекарственную форму высокотоксичного солюбилизатора Cremophor EL, а также ограничивает создание его лекарственных форм. Преодолеть множественную лекарственную устойчивость и улучшить биофармацевтические характеристики паклитаксела представляется возможным с использованием нанотехнологического подхода, что и определило цель и задачи настоящего исследования.
Цель работы: Целью настоящего исследования явилось изучение внутриклеточного накопления наносомального паклитаксела и его цитотоксической активности в высокорезистентных клетках Т-лимфобластного лейкоза человека (Jurkat WT).
Основные задачи исследования:
-
Разработать технологию получения наносомальной формы паклитаксела на основе сополимера молочной и гликолевой кислоты (PLGA), определить % включения паклитаксела и размер полученных наночастиц.
-
Изучить кинетику высвобождения паклитаксела из матрикса наночастиц.
-
Исследовать внутриклеточное накопление наносомальной формы паклитаксела в высокорезистентных клетках Т-лимфобластного лейкоза человека (Jurkat WT).
-
Изучить противоопухолевую активность наносомальной формы паклитаксела на высокорезистентных клетках Т-лимфобластного лейкоза человека (Jurkat WT) с использованием стандартных методик оценки цитотоксичности.
5. Изучить влияние поверхностно-активных веществ (ПАВ) на способность наночастиц с паклитакселом подавлять функцию Р-гликопротеина.
Научная новизна:
Разработана технология получения наносомальной формы паклитаксела путем включения его в полимерный матрикс сополимера PLGA. Установлено, что размер наночастиц (НЧ) составил 300±100 нм, процент включения паклитаксела - 90-99%. Показано, что наносомальный
Впервые установлена способность наносомальной формы паклитаксела проникать и накапливаться в ядрах высокорезистентных клеток Т-лимфобластного лейкоза человека (Jurkat WT).
Впервые установлено, что использование НЧ приводит к 4-кратному
повышению цитотоксичности паклитаксела в отношении
высокорезистентных клеток Т-лимфобластного лейкоза человека Jurkat WT в сравнении с обычным раствором паклитаксела.
Практическая значимость:
Показана возможность преодоления опухолевой резистентности за счет включения паклитаксела в полимерный матрикс PLGA наночастиц в присутствии Pluronic F68 и полисорбата 80 на клеточной линии высокорезистентного Т-лимфобластного лейкоза человека (Jurkat WT).
Выявленные внутриклеточное накопление и цитотоксическая активность in vitro создают предпосылки для дальнейшего доклинического изучения наносомальной формы паклитаксела на клетках высокорезистентного Т-лимфобластного лейкоза.
Предложена для дальнейшего доклинического изучения наносомальная форма паклитаксела с улучшенными биофармацевтичевскими характеристиками.
Личный вклад автора. Автором самостоятельно изготовлена наносомальная форма паклитаксела на основе PLGA, и выполнено
дальнейшее фармакокинетическое и фармакологическое изучения на модели высокорезистентных клеток Т-лимфобластного лейкоза человека Jurkat WT.
Апробация работы:
Основные положения и выводы диссертационной работы доложены на второй международной конференции «Проблемы и перспективы современной медицины, биологии и экологии» (Томск, 2010), научно -методической конференций кафедры фармакологии фармацевтического факультета ГОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова (Москва, 2010), 11-ой Всероссийской научной конференции с международным участием «Наноонкология» (Тюмень, 2010), X Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты» (Москва, 2011), VII Международной научно-практической конференция «Наука и современность» (Новосибирск, 2011).
Публикации:
По материалам диссертации опубликовано 5 статьей, в том числе 4 статьи - в журналах, входящих в перечень, рекомендованных ВАК РФ и 1- в зарубежном журнале и 4 тезиса в материалах российских и международных конференции.
Объем и структура диссертации:
![Изучение формы, размеров, положения языка при ортогнатическом прикусе и аномальных прикусах. Характеристика симптомокомплекса индивидуальной макроглоссии [Электронный ресурс]](/i/i/4345/202490.png "Изучение формы, размеров, положения языка при ортогнатическом прикусе и аномальных прикусах. Характеристика симптомокомплекса индивидуальной макроглоссии [Электронный ресурс] Баринова Руфина Витальевна")
