Введение к работе
--—— '"'
Актуальность темы. Исследование пространственной структуры биомакромолекул является в настоящее время одним из наиболее быстро развивающихся направлений рентгеноструктурного анализа. Эти работы важкьі для понимания фундаментальных вопросов иолекулярной биологии, в том числе для понимания процессов ферментативного катализа.
В последнее враня в нашей стране я за рубежом интенсивно
изучаются пространственные структуры и механизм действия
пиридоксаль-5'-фосфат-завксикъюс ферментов, катализирующих
разнообразные реакции метаболизма аминокислот (реакция
трансаминиропанил, р- элиминирования, декарбоксилированяя,
рацемизации и др.). К настоящему времени пространственная структура некоторых ферментов этого семейства была определена. Так, например, детально изучена структура ряда трансаминаз, недавно получена пространственная структура триптофан синтазм. Структура пиридоксаль-5'-фосфат-зависииых ферментов, принадлежащих к группе /3- элиминирующих лиаз, представителем которой является тирозин - фепол-лиаза, пока оставалась неизвестной.
Цель работы, - определение пространственной структуры тирозин
фенол-лиазы из Citrobacter intermedius методом
рентгеноструктурного анализа.
Научная новизна работы. Показана эффективность сбора дифракционных данных от кристаллов биомакромолекул на пучке синхротронного излучения накопителя ВЭПП-3. На конкретном объекта установлена эффективность использования метода аномального рассеяния для решения фазовой проблемы при дальнейшей модификации фаз методами Банга и молекулярного усреднения. Впервые определена структура нового представителя пиридоксаль-5'-фосфат-зависимых ферметов -- тирозин - фенол-лиазы при разрешением 2. 7 К. Проведен інализ вторичной, третичной и четвертичной структуры тирозин -{іенол-лиазьі. Проведен ход полипептидной цепи молекулы, построена толиаланиновая модель.
Практическая ценность работы заключается в том, что юлученные. результаты являются основой как для уточнения структуры ирозин - фенол-лиазы при высоком разрешении, так и для изучения сомплексов фермента с кофактором и различными аналогами
субстратов.
Апробация работы. Результаты работы докладывались на 15
Конгрессе международного союза кристаллографов (Бордо, 1990), на
интернациональном симпозиуне по. витамин В_ к карбонильному
катализу (Осака, 1990), на 2-ой европейской школе по
кристаллографии бионакромолакул (Комо, 1991) на конкурсе научных работ ИК АН СССР (1990).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ. Список публикаций приведен в конце автореферата.
Объем работы. Диссертация состоит из введения, четырех глав,
выводов и списка литературы. Она изложена на страницах,
содержит рисунков и таблиц.
