Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Мартиросян Нарине Степановна

Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии
<
Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии
>

Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Мартиросян Нарине Степановна. Иммуногенетические маркеры диагностики и прогнозирования течения эндокринной офтальмопатии: диссертация ... кандидата медицинских наук: 14.01.02 / Мартиросян Нарине Степановна;[Место защиты: Российская медицинская академия последипломного образования].- Москва, 2016.- 123 с.

Содержание к диссертации

Введение

ГЛАВА 1. Обзор литературы 13

1.1. Этиопатогенез, иммуногенетика эндокринной офтальмопатии

1.2. Классификация эндокринной офтальмопатии .

1.3. Клиническая картина эндокринной офтальмопатии

1.4. Диагностика эндокринной офтальмопатии

1.5. Подходы к лечению эндокринной офтальмопатии

1.6. Факторы риска развития и прогрессирования эндокринной офтальмопатии 31

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 34

2.1. Материалы исследования 34

2.1.1. Характеристика пациентов, включенных в исследование, и дизайн исследования 34

2.2. Методы исследования 38

2.2.1. Офтальмологическое обследование

2.2.2. Компьютерная томография орбит

2.2.3. Оценка тиреоидного статуса 39

2.2.4. Оценка иммунологических маркеров эндокринной офтальмопатии .

2.2.5. Определение генетических маркеров эндокринной офтальмопатии .

2.2.6. Методы оценки качества жизни пациентов с эндокринной офтальмопатией .

Опрос врачей эндокринологов офтальмологов по тактике лечения эндокринной офтальмопатии

2.2.7. Статистическая обработка результатов 44

исследования

ГЛАВА 3. Результаты исследования 46

3.1. Анализ клинико-демографических данных пациентов 46

3.2. Генетические маркеры 51

3.3. Иммунологические маркеры 59

3.4. Оценка качества жизни пациентов с эндокринной офтальмопатией.

Опрос врачей эндокринологов офтальмологов по тактике лечения эндокринной офтальмопатии

3.5. Факторы прогноза течения эндокринной офтальмопатии

ГЛАВА 4. Обсуждение собственных результатов 78

Выводы 83

Практические рекомендации 84

Список литературы

Клиническая картина эндокринной офтальмопатии

Основными вопросами остаются: идентификация первичного аутоантигена, определение первичной мишени в орбите, является ли это ретробульбарная клетчатка, экстраокулярные мышцы или всегда вовлечены обе структуры. Присутствие антител к рТТГ у большинства пациентов с БГ, тиреоидной дермопатией и ЭОП, повышенная экспрессия рТТГ в орбитальных тканях, особенно при активной ЭОП, и в претибиальной клетчатке предполагает, что именно иммунореактивность против рТТГ лежит в основе всех этих состояний [1, 17, 43, 131]. Однако, необязательное наличие у больных всех трех заболеваний (БГ, ЭОП и претибиальной микседемы) говорит о том, что в патогенезе каждого патологического состояния участвуют дополнительные факторы, обеспечивающие специфичность вовлечения тканей в аутоиммунный процесс [1, 7]. Большинство ученых считают, что ЭОП является следствием перекрестной реакции против рТТГ в ЩЖ и орбите [18].

Рецептор ТТГ представляет собой 764 аминогликопротеин. Антитела к рТТГ подразделяются на два функциональных подтипа: антитела, которые, подобно ТТГ, связываются с тиреоидными клетками и стимулируют их, или стимулирующие антитела к рТТГ (TSAb), и антитела, блокирующие стимуляцию ЩЖ, или блокирующие антитела к рТТГ (TBAb). При БГ имеют место оба типа антител, считается, что их соотношение может меняться, приводя к смене функциональной активности ЩЖ. Существует две методики определения уровня антител к рТТГ в сыворотке крови: метод конкурентного ингибирования связывания ТТГ с рТТГ (TBII) и биологический метод, основанный на определении активности циклического аденозинмонофосфата (цАФМ) [10, 92, 93]. Если первый метод определяет общий уровень антител к рТТГ, то биологическим методом можно определить уровень стимулирующих и блокирующих антител. Однако биологический метод дорог, трудоемок и не применяется в клинической практике. На сегодняшний день разработаны три генерации коммерческих лабораторных наборов для определения антител к рТТГ. Наборы 1-го поколения используют радиорецепторный анализ с растворимым свиным рецептором ТТГ. Наборы 2-го поколения определяют антитела к рТТГ с помощью радиорецепторного, хемилюминесцентного или иммуноферментного анализа с использованием свиного или рекомбинантного человеческого рТТГ, иммобилизированного на твердой фазе. Новейшие наборы иммуноферментного анализа 3-го поколения используют в качестве метки человеческие моноклональные антитела М22, стимулирующие рецептор ТТГ. Некоторые исследования показали большую чувствительность в диагностике БГ наборов 3-го поколения (99%), по сравнению с наборами 2-го (95%) и 1-го (80%) поколений [10, 28]. При этом значимость наборов 3-го поколения для диагностики ЭОП изучена недостаточно.

По мнению многих авторов, уровень антител к рТТГ прямо коррелирует с клинической активностью ЭОП, определяет тяжесть и прогноз заболевания, что свидетельствует в пользу теории о рТТГ, как первичном аутоантигене при ЭОП [6, 9, 40, 45]. Gerding et al показали ассоциацию со степенью активности ЭОП по шкале CAS и степенью проптоза уровня антител к рТТГ, как блокирующих связывания с рТТГ (TBII), так и стимулирующих антител к рТТГ (TSI) [45]. В сравнительно недавнем исследовании в 2012 г. Jang et al оценили уровень антител к рТТГ, определенных лабораторными наборами 1-го и 3-го поколений и биологическим методом у 155 пациентов с ЭОП. Выявлена положительная корреляция уровня антител к рТТГ, определенных всеми тремя методиками с активностью и степенью проптоза, однако эта связь была сильнее при определении стимулирующих антител биологическим методом [62, 63]. В ранее опубликованном исследовании Lytton et al также была показана ассоциация стимулирующих антител к рТТГ с активностью и тяжестью ЭОП [85]. В исследовании Свириденко Н.Ю. с соавт. было показано, что пациенты с высокоактивной ЭОП (СAS 5-7) имеют более высокие уровни антител к рТТГ и большую частоту выявления антител к рТТГ по сравнению с низкоактивной (CAS 3-4) и неактивной ЭОП, уровень антител к рТТГ также зависел от степени тяжести офтальмопатии [9].

Однако результаты исследований, посвященных этому вопросу противоречивы. В исследовании иранских ученых, которые исследовали уровень антител к рТТГ (TRAb), стимулирующих антител к рТТГ (TSAb) и антител, блокирующих стимуляцию рТТГ (TRAb) у пациентов с клинически манифестной ЭОП, с ЭОП по данным компьютерной томографии (КТ) и пациентов с БГ без ЭОП, не выявлена корреляция антител к рТТГ со степенью активности и тяжести ЭОП, в то время как антитела, стимулирующие рТТГ коррелировали с тяжестью ЭОП, однако была выявлена сильная корреляция соотношения TSAb/TBAb c активностью и тяжестью ЭОП в обеих группах больных с ЭОП [120].

Однако теория рТТГ, как первичного аутоантигена, не объясняет манифестацию ЭОП у пациентов с многолетней ремиссией БГ, у пациентов с ХАИТ, подострым тиреоидитом, ЭБГ и отрицательными антителами к рТТГ [95]. Описано развитие ЭОП без антител к рТТГ у пациентов с раком ЩЖ и случай развития ЭОП спустя три года после подострого тиреоидита. Это может быть либо следствием низкой чувствительности диагностических методик, либо преимущественной ролью антител к другим антигенам орбиты. При этом не исключено, что антитела к рТТГ являются пусковым фактором во всех случаях развития ЭОП, но становятся отрицательными на момент клинической манифестации или диагностики ЭОП.

Другой потенциальной мишенью аутоиммунной реакции в ретробульбарной клетчатке является коллаген XIII [35, 47, 49]. В исследовании De Bellis et al была показана ассоциация антител к коллагену XIII с активной ЭОП и положительная корреляция со степенью клинической активности по шкале CAS. Авторы предполагают, что высокие антитела к коллагену XIII являются маркером активного воспалительного процесса в ретробульбарной клетчатке при ЭОП, отражая высокую экспрессию коллагена XIII на мембране активированных ОФ. Однако исследование было проведено на небольшом количестве пациентов, 28 человек с активной ЭОП, 24 человека с неактивной ЭОП [35].

Характеристика пациентов, включенных в исследование, и дизайн исследования

По поводу активной ЭОП 70 пациентов получили системную терапию ГКС: 42,9% (66/154) пациентов с БГ, 12,5% (1/8) с ХАИТ и 27,3% (3/11) пациентов с ЭБГ. Из них 47,1% получали пульс-терапию метилпреднизолоном в суммарной дозе от 4500 до 7000 мг, 28,6% терапию преднизолоном перорально, а 24,3% комбинированную пульс-терапию с последующим приемом пероральных ГКС.

Оценивался также вклад курения в вероятность развития ЭОП в различных группах больных. Выявлено достоверное различие между группами пациентов с с БГ, ХАИТ и ЭБГ. Доля курящих была больше в группе пациентов с БГ и ЭОП – 43,5%, по сравнению с ХАИТ – 12,5%, ЭБГ – 18,2% и пациентами с БГ без ЭОП – 26,9% (р=0,02).

Нами были разработаны методы идентификации аллелей полиморфных маркеров следующих генов-кандидатов: полиморфного маркера A60G (rs3087243) гена CTLA4, кодирующего поверхностный рецептор цитотоксических Т лимфоцитов, полиморфного маркера G(-308)А (rs1800629) гена TNF, кодирующего фактор некроза опухоли, полиморфного маркера G(-1082)A (rs1800896) гена IL10, кодирующего интерлейкин 10, и T3249C (rs4778641) гена IL16. Эти маркеры были отобраны и использованы для изучения ассоциации генов-кандидатов с эндокринной офтальмопатией (ЭОП) у пациентов с болезнью Грейвса (БГ).

В исследование было включено 248 человек, 183 женщины и 65 мужчин, которые были разделены на две группы: пациенты с БГ и сопутствующей ЭОП (группа БГ+ЭОП) и пациенты с БГ, не имеющие в анамнезе офтальмопатии (группа БГ-ЭОП) (таблица 7). Группы не различались по возрасту, полу, возрасту манифестации БГ. Среди пациентов с офтальмопатией было больше курящих, 42,6% против 28,1% (p=0,034). Таблица 7.

Ген, кодирующий антиген 4 цитотоксических Т-лимфоцитов (CTLA4), расположен на хромосоме 2q33. Изучалась роль в развитии ЭОП нескольких полиморфных маркеров гена CTLA4 – A49G, C-318T, +1822CT, A60G. В нашем исследовании мы использовали малоизученный полиморфный маркер A60G гена CTLA4, который ассоциирован с риском развития аутоиммунных заболеваний ЩЖ. Полиморфный маркер A60G G/A (rs3087243) представляет собой однонуклеотидный полиморфизм (остатки гуанина или аденозина) в положении 11411 в 3 -нетранслируемой области. Мы проанализировали ассоциацию полиморфного маркера A60G гена CTLA4 (rs3087243) c эндокринной офтальмопатией у пациентов с БГ (таблица 8, рисунок 5).

Частота аллеля А полиморфного маркера rs3087243 гена CTLA4 была выше в группе пациентов с ЭОП, частота аллеля G выше в группе пациентов с БГ без ЭОП (p=0,0001). Генотип АА достоверно чаще встречался в группе БГ+ЭОП, генотип GG - в группе БГ-ЭОП (p=0,0005). Таким образом, наши данные показали, что аллель А (OR = 2,11; ДИ 95% = 1,44 – 3,09) и генотип АА (OR = 3,99; ДИ 95% = 1,58 – 10,05) ассоциированы с повышенным риском развития ЭОП в русской популяции. При этом аллель G (OR = 0,47; ДИ 95% = 0,32-0,69) и генотип GG (OR = 0,43; ДИ 95% = 0,25 – 0,72), напротив, ассоциированы с пониженным риском развития ЭОП. Таким образом, показана ассоциация полиморфного маркера A60G (rs3087243) гена CTLA4 с риском развития офтальмопатии у пациентов с болезнью Грейвса русского происхождения.

Фактор некроза опухоли является полифункциональным провоспалительным цитокином. В промоторной области гена TNF обнаружено несколько полиморфных участков, из них наибольший интерес представляет полиморфизм G/A в положении -238, так как он расположен в области связывания транскрипционного фактора АР-2. В нашем исследовании мы использовали полиморфный маркер G(–308)A (rs1800629) гена TNF, который находится в частичном неравновесии по сцеплению с маркером G(–238)A (rs361525) гена TNF в европеоидных популяциях. Анализ распределения частот аллелей и генотипов исследуемого полиморфного маркера гена TNF не выявил различий в частоте аллелей G и A у пациентов с ЭОП или без ЭОП (таблица 9, рисунок 6). В тоже время выявлены статистически достоверные различия в распределении частот генотипов. Генотип GG чаще встречается в группе пациентов с БГ и ЭОП, указывая на повышенный риск манифестации ЭОП с OR = 1,92 (ДИ 95% = 1,13 – 3,24). Генотип GA чаще встречается у пациентов с БГ без офтальмопатии (OR = 0,45; ДИ 95% = 0,27 – 0,78). Таким образом, показана ассоциация полиморфного маркера G(–308)A гена TNF с риском развития офтальмопатии у пациентов с болезнью Грейвса русского происхождения.

Интерлейкин 10 описан, как противовоспалительный цитокин, он подавляет синтез провоспалительных цитокинов T-клетками, снижает активность макрофагов, подавляет экспрессию антиген-презентирующих молекул и пролиферацию Т-клеток. В рамках настоящего исследования изучался полиморфный маркер G(-1082)A. Ген интерлейкина 10 расположен на хромосоме 1q31-32. Полиморфный маркер G(-1082)A (rs1800896) представляет собой однонуклеотидный полиморфизм (остатки гуанина или аденозина) в положении -1082 в промоторной области гена.

При сравнительном анализе распределения частот аллелей и генотипов полиморфного маркера G(-1082)A (rs1800896) гена IL10 были получены статистически достоверные отличия (таблица 10). Показано, что в группе БГ+ЭОП аллель А и генотип АА были преобладающими, оказывая предрасполагающее влияние на риск развития ЭОП у пациентов с БГ (OR=4,45, ДИ 95%=2,93 – 6,75; OR=6,34, ДИ 95%=3,63 – 11,08 соответственно). В то время, как аллель G и генотип GG играли протективную роль и указывали на пониженный риск манифестации ЭОП (OR=0,22, ДИ 95%=0,15 – 0,34; OR=0,09, ДИ 95%=0,03 – 0,33 соответственно). Таким образом, полиморфный маркер G(-1082)A (rs1800896) гена IL10 ассоциирован с развитием ЭОП у пациентов с БГ русского происхождения (рисунок 7).

Методы оценки качества жизни пациентов с эндокринной офтальмопатией

Последняя часть анкеты заполнялась только врачами-эндокринологами и была посвящена тактике ведения пациентов с БГ при эндокринной офтальмопатии (рисунок 17). В качестве терапии первого ряда большинство опрошенных эндокринологов предпочитают проведение медикаментозной терапии (95,5%), 13,6% готовы направить пациентов на радиойодтерапию, однако эта терапия малодоступна на сегодняшний день, а 9,1% на тиреоидэтомию. При этом 46% эндокринологов предпочитают проведение медикаментозной терапии по схеме с назначением одного тиреостатика, а 54% по схеме «блокируй 88 замещай». Именно последняя схема более предпочтительна у пациентов с ЭОП, поскольку позволяет быстрее достичь и стабильно поддерживать эутиреоидное состояние. При рецидиве тиреотоксикоза тактика терапии менялась, 95,5% опрошенных эндокринологов рекомендуют радикальное лечение, однако 9% готовы провести повторный курс тиреостатической терапии.

Клинические рекомендации отмечают необходимость информирования всех пациентов с ЭОП о рисках, связанных с курением и рекомендации строгого отказа от курения. В нашем опросе лишь 4,5% эндокринологов отметили необходимость рекомендации отказа от курения.

Европейская группа по изучению эндокринной офтальмопатии EUGOGO, как и национальные рекомендации, предлагают направлять пациентов с тяжелой и средней тяжести ЭОП в специализированные медицинские центры. По данным опроса, 96% рецензентов считают целесообразным организацию совместных консультаций эндокринолога и офтальмолога пациентам с ЭОП, а у 11% опрошенных в организациях существуют такие междисциплинарные команды.

Пациентам с офтальмопатией также был предложен опросник, рекомендуемый Европейской группой по изучению офтальмопатии (EUGOGO) для оценки качества жизни пациентов с ЭОП (рисунок 18). Опросник состоит из двух шкал по 8 вопросов – шкала для оценки зрительных функций и шкала для оценки внешнего вида. Окончательный был рассчитывался по формуле (промежуточный бал-8)/16 х 100 и мог варьироваться от 0 до 100 баллов. Всего возвращено и обработано 100 анкет. Среди опрошенных пациентов 17% имели тяжелую ЭОП, 54% ЭОП средней тяжести и 29% легкую форму ЭОП. Пациенты с тяжелой ЭОП имели самое низкое качество жизни со средним балом 43,7. Качество жизни пациентов с ЭОП средней тяжести было выше, и средний бал составил 65 баллов. При этом достоверное разницы между пациентами с активной и неактивной ЭОП не было. Пациенты с легкой ЭОП имели соответственно самое высокое качество жизни со средним баллом 80. 80 70 60 50 40 30 20 10 0л егка я ЭОП средняя ЭОП тяжелая ЭОП

В группу проспективного наблюдения вошли 26 пациентов с активной ЭОП (медиана 4 [3; 5]), среди которых 60% имели низкоактивную ЭОП (CAS 3-4), а 40% высокоактивную ЭОП (CAS 5-7). У 46,2% была диагностирована тяжелая ЭОП, у 54,8% ЭОП средней тяжести. Всем пациентам проводилась иммуносупрессивная терапия – пульс-терапия метилпреднизолоном в суммарной дозе 6000 мг с оценкой эффективности лечения и уровня антител к рТТГ через 3, 6 и 12 месяцев. На момент начала терапии все пациенты имели компенсированную или субкомпенсированную функцию ЩЖ. Терапия определялась как эффективная, а пациенты относились в группу ответивших на лечении, при активности ЭОП 2 по шкале CAS. В группу ответивших на лечение вошли 18 пациентов (65,4%), а в группу неответивших на лечение с персистирующей активной ЭОП вошли 8 человек (34,6%). В каждой временной точке уровень антител к рТТГ в группе пациентов, не ответивших на лечение был достоверное выше по сравнению с пациентами, ответившими на лечение (таблица 12).

Прогностическая ценность определения антител к рТТГ в динамике на фоне иммуносупрессивной терапии активной ЭОП определялась методом ROC-анализа.

Уровень антител к рТТГ выше 28,8 мЕд/л на момент начала пульс-терапии метилпреднизолоном с чувствительностью 75% и специфичностью 76,5% указывает на больший шанс неэффективной иммуносупрессивной терапии (рисунок 20).

При осмотре через 3 месяца иммуносупрессивной терапии уровень антител к рТТГ снизился в обеих группах, при этом уровень антител менее 10,1 мЕд/л определял в дальнейшем положительный ответ на терапию терапии (AUC – 0,967, p=0,005). (рисунок 21) Антитела к рТТГ более 5,1 мЕд/л через 6 месяцев и 8,2 мЕд/л через 12 месяцев иммуносупрессивной терапии указывают на отрицательный исход лечения (рисунок 22).

ROC-кривая чувствительности и специфичности антител к рТТГ через 6 и 12 месяцев терапии. Другими факторами, влияющими на эффективность иммуносупрессивной терапии являются тяжесть ЭОП (p 0,001), наличие признаков вовлечения глазодвигательных мышц – двоение или нарушение подвижности (p=0,016), длительность манифестации ЭОП, персистенция антител к рТТГ 7 мЕд/л после терапии ГКС.

Иммунологические маркеры

Соответственно поставленным задачам работа была разделена на несколько фрагментов. Для определения роли потенциально значимых для русской популяции больных генов-кандидатов в развитии и прогрессирования ЭОП у пациентов с болезнью Грейвса проведен анализ полиморфных маркеров генов CTLA4, TNF, IL10 и IL16. Для уточнения клинической значимости определения антител к кальсеквестрину и коллагену XIII для диагностики и определения степени активности и тяжести ЭОП проведено исследование в группах пациентов с БГ без офтальмопатии и в группах больных ЭОП с различной степенью активности и тяжести заболевания. Несомненным является роль антител к рТТГ в патогенезе ЭОП, однако сведения об ассоциации уровня антител к рТТГ со степенью активности и тяжести ЭОП, а также их прогностической роли остаются противоречивыми [9, 120]. Проведено сравнительное исследование определения антител к рТТГ с помощью двух различных методик иммуноферментного анализа. Оценивалось прогностическое значение определения уровня антител к рТТГ в динамике на фоне иммуносупрессивной терапии. Кроме того, нами оценивалось качество жизни пациентов с различной степенью активности и тяжести заболевания. В связи с выходом Федеральных клинических рекомендаций по диагностике и лечению эндокринной офтальмопатии у пациентов с аутоиммунной патологией щитовидной железы представляло интерес изучение тактики ведения этой группы больных врачами эндокринологами и офтальмологами, а также оценка согласованности действий специалистов, для чего нами был разработан опросник.

В исследование было включено 283 пациента с БГ и/или ЭОП. Диагноз ЭОП верифицировали в соответствии с рекомендациями EUGOGO, активность заболевания определялась по шкале клинической активности CAS, а тяжесть офтальмопатии согласно классификации EUGOGO.

Для генетическое исследования были сформированы 2 группы: пациенты с БГ и ЭОП (141 человек) и пациенты с БГ без ЭОП (107 человек), численность групп достаточна для получения достоверных данных. Впервые исследована ассоциация полиморфного маркера A60G (rs3087243) гена CTLA4, полиморфного маркера G(-308)А (rs1800629) гена TNF, полиморфного маркера G(-1082)A (rs1800896) гена IL10 и полиморфного маркера T3249C (rs4778641) гена IL16 с ЭОП у пациентов с болезнью Грейвса русского происхождения. Полученные нами результаты показали, что у пациентов с БГ в анамнезе и ЭОП достоверно повышены частоты встречаемости аллелей А и генотипов АА и снижена доля аллелей G и генотипа GG полиморфных маркеров rs3087243 гена CTLA4 и rs1800896 гена IL10, а также генотипа GG полиморфного маркера rs1800629 гена TNF что может свидетельствовать о предрасполагающем влиянии генотипа риска AA и аллели А полиморфного маркера rs3087243 гена CTLA4 и генотипа риска АА и аллели А rs1800896 гена IL10, а также генотипа GG полиморфного маркера rs1800629 гена TNF на риск развития ЭОП у пациентов с БГ русского происхождения. Таким образом, полиморфные маркеры rs3087243 гена CTLA4, rs1800896 гена IL10 и rs1800629 гена TNF ассоциированы с риском развития ЭОП у пациентов с БГ русского происхождения, что согласуется с результатами других исследований [99-105]. Большинство исследований было проведено на азиатской популяции больных и только в двух исследованиях непосредственно сравнивались больные с БГ, имеющие и не имеющие ЭОП. Нами впервые изучена и показана роль указанных полиморфизмов в русской популяции больных. При этом нами впервые была получена ассоциация полиморфного маркера rs3087243 гена CTLA4 со степенью активности и тяжести ЭОП, уровнем антител к рТТГ, а также ассоциация rs3087243 гена CTLA4 и rs1800629 гена TNF с благоприятным течением ЭОП с неактивной формой, не требовавшей иммуносупрессивной терапии. Таким образом, риск манифестации ЭОП у больных с БГ может быть обусловлен не только средовыми, но и генетическими факторами риска, также как и течение ЭОП.

Для изучения роли иммунологических маркеров была сформирована группа из 88 человек с БГ и/или ЭОП различной степени активности и тяжести. Определение антител к кальсеквестрину показало высокую специфичность в отношении ЭОП. Так же, как и исследователи из группы Gopinath et al мы не получили достоверной разницы между пациентами с преимущественно миогенной и отечной формой ЭОП, что может объясняться немногочисленной группой пациентов с изолированной формой течения ЭОП, а также тем, что у большинства пациентов определялись увеличенные экстраокулярные мышцы не смотря на отсутствие признаков их дисфункции. Однако и в нашем исследовании частота положительных антител была выше у пациентов с признаками поражения глазодвигательных мышц (двоением и/или нарушением подвижности глазодвигательных мышц), однако разница не достигла статистической значимости. Впервые выявлена ассоциация антител к кальсеквестрину не только со активностью, но также со степенью тяжести ЭОП. Таким образом антитела к кальсеквестрину могут рассматриваться, как иммунологические маркеры ЭОП, маркеры активности и тяжести процесса. Медиана уровня коллагена XIII не различалась в группах больных с БГ и ЭОП, возможно это связанно с тем, что оба заболевания аутоиммунной природы и уровень коллагена XIII отражает наличие воспалительного процесса, тем не менее максимальные его значения, превышающие 1500 пг/мл наблюдались только в группе пациентов с ЭОП. Была выявлена корреляция с плотностью ретробульбарной клетчатки по данным КТ, что косвенно отражает наличие отека в ретробульбарных тканях и активность ЭОП. Нами впервые изучался уровень коллагена XIII в сыворотке крови пациентов с ЭОП.