Введение к работе
Актуальность работы. При создании композиционных полимерсодержащих сорбентов для выделения и очистки биополимеров наиболее перспективны пористые кремнеземы с иммобилизованными полимерными фазами. В частности, применение фторсодержащих полимеров в качестве модификаторов кремнеземных носителей позволило создать ряд сорбентов, характеризующихся высокой хемостойкостью, гидролитической стабильностью и уникальными сорбционными свойствами. Однако трудности, возникающие при проведении полимеризации фторсодержащих мономеров, а также при масштабировании процессов получения фторполимерсодержащих композиционных сорбентов стимулируют поиск и реализацию новых подходов при создании подобных материалов. Одним из таких подходов является фторирование предварительно иммобилизованных на поверхности носителя тонких полимерных пленок с применением дифторида ксенона, что позволяет получать сорбенты с повышенным содержанием фтора. Такие сорбенты при значительном снижении неспецифической сорбции характеризуются высокой селективностью в процессах выделения высокочистых препаратов нуклеиновых кислот из различных источников.
Цель работы: создание композиционных полифторбутадиенсодержащих сорбентов для выделения и очистки нуклеиновых кислот. Определение оптимальных параметров при получении таких сорбентов, а также исследование их структурных характеристик и адсорбционных свойств в процессах выделения ДНК из различных источников.
Научная новизна:
1. Предложен новый способ получения композиционных фторполимерсодержащих
сорбентов, заключающийся в проведении фторирования полимерной фазы,
предварительно иммобилизованной на поверхности дисперсных объемно-пористых
носителей. Определены оптимальные условия для иммобилизации и фторирования
полимерной фазы.
-
Впервые при получении композиционных полифторполимерсодержащих сорбентов на основе объемно-пористых кремнеземов использован дифторид ксенона в качестве фторирующего агента.
-
Показано, что при использовании дифторида ксенона в качестве фторирующего
агента возможно получать в мягких условиях композиционные полифторбутадиенсодержащие сорбенты, сохраняющие пористость и механическую прочность, присущие исходному носителю, и вместе с тем отличающиеся повышенным содержанием фтора, что исключает неспецифическую сорбцию при выделении нуклеиновых кислот.
4. Показано, что синтезированные предлагаемым способом сорбенты отличаются
повышенной гидролитической стабильностью в щелочных средах.
5. Показано, что полученные сорбенты оказываются более эффективными в сравнении с
коммерческими аналогами при выделении чистых ДНК с высоким выходом за счет
снижения неспецифической сорбции.
Практическая значимость: предложены новые композиционные полифторбутадиенсодержащие сорбенты на основе объемно-пористых кремнеземов, которые характеризуются контролируемой пористостью, гидролитической стабильностью, высокой селективностью и позволяют получать чистые препараты ДНК из различных источников с высоким выходом.
Автор защищает:
-
Способ получения композиционных полифторбутадиенсодержащих сорбентов на основе дисперсных объемно-пористых носителей, отличающихся высокой селективностью при выделении и очистке нуклеиновых кислот.
-
Оптимальные условия получения сорбентов, обеспечивающие иммобилизацию равномерной тонкой пленки полимера на поверхности объемно-пористых частиц носителя, а также повышенное содержание фтора в иммобилизованных полимерных пленках.
-
Дифторид ксенона в качестве фторирующего агента для получения композиционных полифторбутадиенсодержащих сорбентов с повышенным содержание фтора, обусловливающим низкий уровень неспецифической сорбции при выделении нуклеиновых кислот.
-
Оптимальные значения молекулярной массы и состав исходных олигобутадиенов, используемых при иммобилизации тонких полимерных пленок на поверхности объемно-пористых носителей для последующего фторирования.
-
Композиционные полифторбутадиенсодержащие сорбенты на основе кремнеземов для получения чистых препаратов ДНК из различных источников с высоким выходом.
Апробация работы: отдельные результаты работы докладывались на
международных конференциях: "18th International Symposium on Column Liquid Chromatography" (1993), "Third International Symposium on Bioorganic Chemistry" (1995), "17th DECHEMA Annual Meeting on Biotechnology" (1999), на "VII всероссийском симпозиуме по молекулярной жидкостной хроматографии" (1997), на научно-практической конференции "Биомедицинские технологии" (1996).
Публикации: по материалам диссертации опубликовано 9 печатных работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на т/С (у страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введение, литературный обзор, исходные вещества и методы исследования, результаты и их обсуждение, выводы; включает -/О таблиц и /zb рисунков. Библиография содержит 150 наименований.