Введение к работе
Актуальность проблемы. Инфекционная иммунология признает у человека и высших животных существование единственной формы специфического реагирования на микробы, проявляющейся в виде иммунной реакции. Специфические эффекты этой реакции обнаруживаются не ранее двух-трех дней от начала взаимодействия организма с антигеном [I.M. Roit, 1991].
Наряду с этим описана экстренная специфическая реакция
крови, возникающая в момент контакта организма с микробами.
Для нее характерно отсутствие латентного периода, а длитель
ность реакции соответствует времени циркуляции в крови рас
творимых микробных субстанций [В.Н. Каплин, 1996]. Экстрен
ная специфическая реакция крови проявляется в эффектах уси
ления антигенсвязывающей активности эритроцитов [В.Н.Каплин,
И.П.Корюкина, В.Ф.Кузнецов, 1984], фагоцитарной активности
лейкоцитов [В.Н.Каплин и соавт., 1964-1996 и др.] и адгезивной
способности лимфоцитов в форме их розеткообразования
[Л.П.Быкова и соавт., 1984-1991; А.С.Закс, А.А.Быкова, Т.А.Юшкова, 1986-1993; Л.А.Прасолова, 1988; Л.Г.Казанцева, 1993 и др.]. Все эти эффекты моделируются при взаимодействии in vitro крови с растворимыми субстанциями микробов [В.Н. Каплин, 1996].
Среди указанных реакций наиболее изучена экстренная фагоцитарная реакция. Ее возникновение объясняют специфическим преобразованием рецепторного аппарата нейтрофилов под влиянием микробного стимула, направленного непосредственно на фагоцитирующую клетку, что заставляет предполагать заинтерисо-ванность в этой реакции явления специфической адгезии [В.Н. Каплин, 1996]. Однако возможность формирования экстренной реакции специфической адгезии нейтрофилов на микробы не изучена и не ясны возможности применения этой реакции в иммунодиагностике инфекций. Исследование адгезии нейтрофилов сложно из-за необходимости отделения процесса поглощения объектов и большой вариабельности показателей адгезии нейтрофилов у здоровых и больных людей [И.В.Петрова, Л.Л.Васильева, 1976, 1983].
Целью работы является разработка методики определения реакции специфической адгезии нейтрофилов на микробы, изучение закономерностей формирования этой реакции в модельных опытах in vitro и возможностей ее применения в иммунодиагностике инфекций.
Задачи исследования
-
Разработать методику исследования реакции специфической адгезии нейтрофилов.
-
Исследовать закономерности формирования реакции специфической адгезии нейтрофилов на микробы при ее моделировании in vitro.
3. Изучить специфические изменения адгезивной способ
ности нейтрофилов при туберкулезе и клещевом энцефалите.
4. Обосновать применение показателя адгезивной способности
нейтрофилов в качестве диагностического теста при инфекциях.
Научная новизна
Разработана методика исследования реакции специфической адгезии нейтрофилов на микробы, обладающая высокой чувствительностью, специфичностью и позволяющая использовать единый унифицированный количественный критерий реакции;
впервые исследованы in vitro закономерности формирования реакции специфической адгезии нейтрофилов на растворимые микробные субстанции;
установлена независимость экстренной реакции специфической адгезии нейтрофилов от антителообразования и неантигенная природа этой реакции;
установлено, что механизм реакции специфической адгезии нейтрофилов на микробы связан со специфическим преобразованием рецепторного аппарата нейтрофилов;
впервые изучена реакция специфической адгезии нейтрофилов у больных туберкулезом и клещевым энцефалитом, установлена возможность ее формирования в ранней стадии инфекций, высокая специфичность и чувствительность.
Практическая ценность и внедрение. Разработан новый универсальный диагностический тест при инфекциях, расширяющий сферу иммунодиагностики инфекционной патологии. Показана высокая чувствительность и специфичность реакции специфической адгезии нейтрофилов, возможность унификации ее оценки и применения в ранней диагностике инфекций. По материалам исследования подана заявка на изобретение "Способ иммунодиагностики инфекций" и подготовлены методические рекомендации, которые используются в учебном процессе кафедры детских инфекций ПГМА.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Методика исследования специфической адгезивной спо
собности нейтрофилов.
-
Экстренная реакция специфической адгезии нейтрофилов при моделировании in vitro.
-
Диагностический критерий реакции специфической адгезии нейтрофилов.
-
Реакция специфической адгезии нейтрофилов у больных туберкулезом и клещевым энцефалитом и возможность ее эффективного определения в ранней стадии инфекции.
-
Механизм формирования реакции специфической адгезии, нейтрофилов.
Апробация работы. Работа выполнена на кафедре патологической физиологии ПГМА и является фрагментом комплексной темы "Разработка новых методов иммунологического исследования и ранняя иммунологическая диагностика инфекций и деструктивных процессов во внутренних органах" (N госрегистрации 01820080720).
Материалы работы доложены на кафедре патологической физиологии ПГМА (1995) и на научной сессии ПГМА (1996). Диссертация апробирована на совместном заседании кафедр микробиологии и патологической физиологии ПГМА (1996).
Публикации. По материалам исследования опубликовано 4 работы.
Объем работы. Диссертация изложена на 123 страницах машинописи, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, двух глав собственных исследований, заключения и выводов. Библиографический указатель включает ссылки на работы 156 отечественных и 40 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 28 таблицами и 5 рисунками.