Введение к работе
Актуальность проблемы. Аэробные бактерии рода Pseudomonas в оследнее время стали предметом пристального и систематического зучения, поскольку широко распространены в природе, являются ажным звеном в трофических цепях биоценозов и играют значн-ельную роль в инфекционной патологии человека (Ширяев Д.Т., 1976; Совалев Т.К., 1979; Илюхин В.И., 1985; Беляков В.Д. и др., 1990).
Из имеющих клиническое значение псевдомонад к патогенным от-осят Pseudomonas pseudomallei и Pseudomonas mallei, таксономнчески лизкородственные виды, вызывающие опасные заболевания человека і широкого круга животных - мелиоидоз и сап. Проблема мелиоидоза, о оценкам специалистов, сейчас значима не только для традиционно ндемнчных регионов, но и для ряда областей, где заболевание ранее е регистрировалось (Dodin A., Ferry D., 1975; Dodin А., 1976; Paredes ,., Avila R., 1976; Galimand M., Dodin A., 1982; Ashdown L., Kochler J., 990).
Биомолекулярные основы вирулентности Pseudomonas pseudo-іаііеі - одно из наименее освещенных направлений в изучении данного шкроорганизма. К настоящему времени имеются сведения о патогене-ической роли отдельных клеточных и экстрацеллюлярных биополи-геров возбудителя мелиоидоза (HHdebrand G. et al., 1963; Илюхин І.И., 1985; Ashdown L., Kochler J., 1990; Пивень H.H., 1995; Плеханова І.Г., 1995; Тихонов Н.Г. \\ др., 1995). Однако, данных их детального нализа современными методами электрофоретических и нммунохи-іических исследований в доступной литературе нами обнаружено не ыло.
Цель работы: Выявление и характеристика биополимеров Pseudo-wnas pseudomallei, связанных с вирулентностью данного микроорга-изма.
Задачи исследования:
-
Провести электрофоретический и иммунохимический анализ бис полимеров штаммов возбудителя мелиоидоза различной вирулені ности.
-
Выявить биополимеры, продукция которых коррелирует с уровне; вирулентности штаммов P.pseudomallei, изучить их физнко-хими ческие и иммунохимнческие свойства.
-
Изучить протективные свойства отдельных биополимеров и оценит перспективу их использования в качестве компонентов химическо; вакцины.
Научная новизна.
Впервые с помощью электрофоретического и нммунохимическоп анализа выявлены биополимеры, уровень продукции которых корре лирует с уровнем вирулентности возбудителя мелиоидоза.
Установлено, что клетки вирулентных штаммов возбудителя ме лиоидоза продуцируют высокомолекулярные гликопротеины, входя щие в состав поверхностного антигенного комплекса.
В составе клеточных оболочек вирулентных штаммов возбудител мелиоидоза определены пять мажорных белков, два из которых жестк< связаны с пептндоглнканом.
Показаны протективные свойства высокомолекулярных глико протеинов и пептидогликан-связанных белков клеточной оболочкі при иммунизации животных и последующей экспериментальной ме лиоидозной и сапной инфекции.
Практическая ценность. Материалы диссертации использовань при составлении следующих инструктивно-методических документов:
1. Методические рекомендации "Анализ электрофореграмм об щеклеточных белков патогенных псевдомонад с применением компью терных программ" (Утверждены директором ВолгНИПЧИ 14.06.94г.).
2. Методические рекомендации "Получение и использование ла-тексных иммуноглобулннозых диагностикумов для идентификации некоторых патогенных псевдомонад" (Утверждены директором Волг НИПЧИ 12.12.95г.).
Апробация работы. Материалы диссертации были обсуждены на Российской научной конференции "Генетика и биохимия вирулентности возбудителей особо опасных инфекций (Волгоград, 1992), институтских и межлабораторных конференциях ВолгНИПЧИ (1991-1994), а также на юбилейной конференции ВолгНИПЧИ (Волгоград, 1995).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, отражающих основное ее содержание.