Введение к работе
Актуальность проблемы. Аэробные бактерии рода Pseudomonas в последнее время стали предметом пристального и систематического изучения, поскольку широко распространены в природе, являются важным звеном в трофических цепях биоценозов и играют значительную роль в инфекционной патологии человека (Ширяев Д.Т., 1976; Ковалев Г.К., 1979; Илюхин В.И., 1985; Беляков В.Д. и др., 1990).
Из имеющих клиническое значение псевдомонад к патогенным относят Pseudomonas pseudomallei и Pseudomonas mallei, таксономнческн близкородственные виды, вызывающие опасные заболевания человека и широкого круга животных - мелиоидоз и сап. Проблема мелиоидоза, по оценкам специалистов, сейчас значима не только для традиционно эндемичных репюнов, но и для ряда областей, где заболевание ранее не регистрировалось (Dodin A., Ferry D., 1975; Dodin А., 1976; Paredes L., Avila R., 1976; Galimand M., Dodin A., 1982; Ashdown L., Kochler J., 1990).
Биомолекулярные основы вирулентности Pseudomonas pseudo-mallei - одно из наименее освещенных направлений в изучении данного микроорганизма. К настоящему времени имеются сведения о патогенетической роли отдельных клеточных и экстрацеллюлярных биополимеров возбудителя мелиоидоза (Hiidebrand G. et al., 1963; Илюхин "В.И., 1985; Ashdown L., Kochler J., 1990; Пивень H.H., 1995; Плеханова Н.Г., 1995; Тихонов Н.Г. и др., 1995). Однако, данных их детального анализа современными методами электрофоретическнх и нммунохи-мнческих исследований в доступной литературе нами обнаружено не было.
Цель работы: Выявление и характеристика биополимеров Pseudomonas pseudomallei, связанных с вирулентностью данного микроорганизма.
Задачи исследования:
-
Провести электрофоретическнй и иммунохимический анализ биополимеров штаммов возбудителя мелиоидоза различной вирулентности.
-
Выявить биополимеры, продукция которых коррелирует с уровнем вирулентности штаммов P.pseudomallei, изучить их физико-химические и нммунохимические свойства.
-
Изучить протективные свойства отдельных биополимеров и оценить перспективу их использования в качестве компонентов химической вакцины.
Научная новизна.
Впервые с помощью электрофоретического и иммунохимического анализа выявлены биополимеры, уровень продукции которых коррелирует с уровнем вирулентности возбудителя мелиоидоза.
Установлено, что клетки вирулентных штаммов возбудителя мелиоидоза продуцируют высокомолекулярные гликопротеины, входящие в состав поверхностного антигенного комплекса.
В составе клеточных оболочек вирулентных штаммов возбудителя мелиоидоза определены пять мажорных белков, два из которых жестко связаны с пептидогликаном.
Показаны протективные свойства высокомолекулярных глико-протеинов и пептвдогликан-связанных белков клеточной оболочки при иммунизации животных и последующей экспериментальной ме-лиондозной и сапной инфекции.
Практическая ценность. Материалы диссертации использованы при составлении следующих инструктивно-методических документов:
1. Методические рекомендации "Анализ электрофореграмм общеклеточных белков патогенных псевдомонад с применением компьютерных программ" (Утверждены директором ВолгНИПЧИ 14.06.94г.).
2. Методические рекомендации "Получение и использование латексних иммуноглобулпновых диагностикумов для идентификации некоторых патогенных псевдомонад" (Утверждены директором Волг НИПЧИ 12.12.95г.).
Апробация работы. Материалы диссертации были обсуждены на Российской научной конференции "Генетика и биохимия вирулентности возбудителей особо опасных инфекций (Волгоград, 1992), институтских и межлабораториых конференциях ВолгНИПЧИ (1991-1994), а также на юбилейной конференции ВолгНИПЧИ (Волгоград, 1995).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, отражающих основное ее содержание.