Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕЖ]. Пептидогликанп принадлежат к числу важнейших структурных компонентов грамположительных бактерий. Это своеобразный гетерополимер, который, являясь уникальным для прокариотов, определяет механические свойства их клеточной стенки и служит основой для включения в ее состав других элементов.
В системе микро-макроорганизм пептидогликаны не являются инертными веществами. Подобно липополисахаридам грамотрицательных бактерий, они воздействуют на различные звенья гомеостаза. Большой интерес вызывает участие пептидогликгнов в реакциях иммунитета. На различных моделях доказана способность пептидоглика-нов и их дериватов индуцировать гиперчувствительность эамедленно-го типа и образование антител, вызывать адъювантный эффект, неспецифически стимулировать лимфоциты, активировать комплемент .( Dziaraki, 19Я6; Parant, Chedid, 19Q6; Seidl, Shleifer, 1986 ). Значительная часть биологической активности пегггидогликанов трансформируется через систему фагоцитоза, включая его клеточное и гуморальное звено.'Это нашло отражение в многочисленных работах, посвященных изучению влияния пегггидогликанов на моноциты и макрофага. Воздействие пептидогли-інов на систему неіітро^ильногс Фагоцитоза и их роль в патогенезе острого гнойного воспаления исследованы гораздо слабее.
Посвящая работу изучению пептидоглинанов, мы выбрали в качестве объекта исследования, золотистый стафилококк. Это связано с несколькими причинами. Во-первых, золотистый стафилококк является классическим индуктором острого гнойного воспаления. Во-вторых, пептидогликаш стафилококков, детально изученные к настоящему времени в плане структурных и антигенных характеристик, представляют наиболее интересный модельный материал для изучения биологи-
ческих свойств этого субстрата. В-третьих, несмотря на то,что. стафі лококк остается одним из ведущих гтиол.ошчееких факторов септических заболеваний, ишунопатогенез стафилококковых инфекций до конца не раскрыт.'О этом плане представляется валним изучение прямого и опосредованного взаимодействия пептидогликанов и их дериватов с эффект ордами механизмами иммунитета и воспаления. Б комплекс вопросов, объединенных этой проблемой, входят качественная и количественная характеристика опсонинов, активация и кондиционирование (Тагоцитов, стимуляция цитокинообразования, влияние на кооперацию клеток. Именно эти позиции, с которыми во многом связана эволюция взаимоотношений в системе "хозяин - паразит", определили основные направлении нашей работы.
ЦЕІГЬ РАБСТ.І - изучить биологические свойства пептидогликана золотистого стафилококка в реакциях, определяицих функциопальную ак-тиьность системы фагоцитоза. ЗАДАЧИ PACCTU :
т Изучить неитро^илстимулируицие свойства пептидогликанов стафилококка на основе люыинолзашсимой хемиліапшесценции.
2. 'Изучить реактивность нейтрофилов к пептидогликану золотистого
стафилококка в системе опсонической кооперации.
-
Изучить количественные параметрі антител различных классов в сравнении с их функциональной (опсонической) активностью у здоровых и больных с пиогенной инфекцией.
-
Изучить влияние пептидогликана золотистогр стаіилококка на взаимодействие нейтрофилов и эндотелиоцитов.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые прі помоци высокочувствительного и объективного метода оценки кислородзависимрго метаболизма, люминолопос^едованно" хемилюминесцениии, обнаружена неодинаковая нейтрофилстимулируїицая аіїтивность пептидогликанов представителей рода Staphylococcus . В опытах с рестимуллцией ие'Й -
трофилов пептидогликанами различных видов стафилококка и латексом установлено, что механизмы возбуждения хемилгамИнесценции однотипны для разных пептидогликанов, но отличаются от хємилгоми-несценции, индуцированной через неопециЗические (гидрофобные) контакты» При изучении опсоио-фагоцитарннх реакі?ій обнаружены не связанные с антителами и комплементом опсонииы с антипептидо-гликановой активностью, установлено уеилеше нейтрофилстимули-мулируюцих свойств пептидогликана золотистого стафилококка после его обработки (Гибронектином. Отмечен низкий уровень антитело-зависимой опсонической активности сывороток больных с хирургической гнойной патологией на с'оне повышенного содержания в них антипептидогликановых Ifed -антител; высказано предположение о том, что недостаток функционально полноценных антител макег способствовать хронизации пиогенного процесса. Получены доказательства того, что пептидогликаны стафилококка усиливают адгезивные реакции в системе "неРтро'Тил - гэндотелий", стимулируя неГ:трофилн и эндотелиотртты; эта активность неодинаково выражена для разных видов стафилококка.
ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Матеріали работы содержат новую информацию об икмунобиологических свойствах основного структурного компонента клеточной сткнки стаїилококков - пептидогликана. Получен препарат для функционального зондирования системы фагоцитоза по реакциям кислородзависимого метаболизма нейтрофмлов. Определены количественные показатели реактивности здоровых лвдей к пептидо-гликану золотистого ста-Тилококка, которые могут служить ориентиром в клинико-диагностической практике. Разработана тест-система" для исследования адгезии нейтро'Тилов на эндотелии. Получено автог>-ское свидетельство И686372 СССР МКИ Q0IN33/543 (публ. 23І09І..Бгол.
85 39) "Способ определения активности рецепторов нейтрог[илов человека". Результаты работы вошли в методические рекомендации "Предупреждение осложнений у новорожденных детей с гнойно-септическими и острыми респираторными заболеваниями" (утвервдены МЗ РСФСР, 1989 г.) . Сделано два рационализаторских предложения: 1)"Много-кратное использование градиента плотности іїиколл-впрогрифин дли фракционирования клеток крсви"( № І2ІІ от 9.02.88); 2)"Сгюсоб оценки неспецифической (гидрофобной) адгезивности нейтрофилов" (!!? IS84 от 16.04.91 ). ПОЛОЖЕНИЯ. Б Ы И О С И М Ц Е НА ЗАЩИТУ:
-
Участие пептидогликаноь в эволюции пиогенного воспалительного процесса может быть связано с их прямым воздействием на функциональные параметры нейтрофилов, а также с усилешем нейтрооилопо-средованных реакций через гуморальные (опсонины)и клеточные (вн-дотелиоциты) Лакторы.
-
Комплексное определение функциональных и количественных параметров антипептидогликановых антител позволяет судить о дефектах в системе опсоно-фагоцитарной защиты и эффективности иммунологического ответа.
АПРОБАЦИЯ РАБ0ТІІ. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на восьмой научной конференции молодых учеши Волго-Вятского региона (Горький, 1988), на I Всесоюзной конференции "Актуальные вопросы теоретической и ирікладной инфекционной иммунологии" (Москва, 1987), на II Всевоюзно^ конференции "Актуальные вопросы клинической микробиологии в неинфекционной клинике" (Барнаул, 1938), на IX межинститутской конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических і стояниях" (Челябинск, 1988), на заседании проблемно!* комиссии "Эпидемиология, микробиология и 'инфекционные болеэни" Нижегородского медицинского института (1992).
ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано II научных работ в центральной периодической печати и научных сборниках. Список приведен в конце автореферата.
ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, вклгсчагацего 27 отечественных и 127 иностранных источников. Работа изложена на 118 листах машинописного, текста и содержит 33 рисунка и 5 таблиц.