Введение к работе
Актуальность проблемы. Пневмококковый менингит (Ш) у детей продолжает оставаться одной из важнейших проблем здравоохранения по причине значительного удельного веса этих заболеваний в общей структуре острых бактериальных менингитов (ОБМ), высоких показателей летальности и большой частоты неврологических осложнений ( Bolan, 1985; Shelek, 1985$ Басе Р.Л., 1988; Сорокина М.Н., 1992).
Не исключая важнейшей роли резистентности организма хозяина в возникновении генерализованной инфекции, существенное значение следует придавать факторам патогенности возбудителя.
В настоящее время доказана роль капсулы пневмококка в возникновении менингита и других тяжелых форм пневмококковой инфекции (ПИ) ( Латів, 1968).
Известно, что в развитии любой.генерализованной инфекции решащее значение имеют инвазивные и токсические свойства микроорганизма (Езепчук D.B., 1977). Принято считать, что инвазив-ность пневмококка обеспечивается гиалуронидазой ( Hobby et al., 1941), однако мы не нашли в литературе прямых доказательств роли гиалуронидазы пневмококка в инвазии и способности штамма проникать через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ).
Исследователи предполагают, что клинические проявления при ЕМ обусловлены действием нескольких токсических продуктов. К их числу относят: уЗ-гемолизин (пяевмолизин), продукты энзимного распада клеточной стенки, поверхностный протеин А ( Тоаавя *t «і., 1985, 1989; Brilea et al., 1988; Lee , І99І; Boalnole, 1992). Однако частота их выявления и функциональная значимость этих продуктов неизвестна.
В литературе приводятся экспериментальные доказательства токсического действия пневмолизина ( Shuaway et al., 1971; Boulaoie, 1992), который подавляет фагоцитарные механизмы защиты хозяина, ингибирует продукцию иммуноглобулинов ( Paton et al., 1983, 1989). Однако неизвестна роль пневмолизина в возникновении тяжелых форм ПИ, в том числе ПМ.
Единственным критерием вирулентности пневмококка продолжает оставаться показатель вирулентности для мышей. В настоящее время установлено, что этот показатель не всегда коррелирует с патогпн-яоетью для человека (Резпова Ю.З., 1988).
Анализ литературы показал, что удельная знэтимость Дикторов патогэннэстн пневмококка и их дліференгйрованпая роль на оззляч-
ных этапах инфекционного процесса при менингите не ясна до сих пор. Отсутствие четких критериев патогенности и доступных методов их определения не позволяет выявить среди штаммов, выделенных от носителей, потенциально опасные, а также определить прогноз уже возникшего заболевания пневмококковой природы.
Цель и задачи исследования. Цель исследования заключалась в выявлении значимости некоторых факторов патогенности пневмококка в развитии ПЫ у детей.
В связи с этим в работе были поставлены задачи:
1. Определить следующие признаки патогенности у штаммов
пневмококка, выделенных от больных менингитом и другими форма
ми ПИ:
принадлежность к серовару,
вирулентность для мышей,
гиалуронидазвая активность (ГА),
наличие пневмолизина.
-
Показать роль гиалуронидазы в возникновении ПЫ на клиническом материале и в эксперименте.
-
Усовершенствовать методы определения факторов патогенности пневмококка - гиалуронидазы и пневмолизина, сделать.их пригоднима для бактериологических исследований в условиях практики.
-
Определить набор признаков патогенности штаммов пневмококка, характеризующие потенциальную эпидемиологическую опасность здоровых носителей этих штаммов.
Научная новизна работы:
-
Впервые установлена корреляция между уровнем ГА, принадлежностью пневмококка к определенным сероварам и возможностью развития Ш.
-
Экспериментально доказана роль уровня ГА штаммов пневмококка в проникновении через ГЭБ и развитии менингита.
-
Впервые показано, что наличие пневмолизина (уб-гемолизина) является обязательным признаком штаммов, вызывающих менингит.
-
Предложена математическая'зависимость, характеризующая потенциальную способность штамма вызывать менингит у человека
. при заражении.
5. Впервые при менингите на основании бактериологических и
патоморфологических исследований, показана созможность длительного (до 1,5 месяца; сохранения жизнеспособных клеток пневмококка в мягкой мозговой оболочке, вещества мозга, что способствует затяжному, рецидивирующему течению процесса у детей.
Научно-практическая ценность работы. На основании сравнительной оценки методов микробиологической диагностики ПМ установлено, что реакция непрямой иммуяофлюоресценшш (РЮШ является наиболее чувствительным и специфическим методом, позволяющим выявить в спинно-мозговой жидкости (СМ) пневмококки, не способные к репродукции на искусственных питательных средах. Использование РНИФ обеспечивает раннюю и эффективную диагностику Ш.
Совершенствование микробиологической диагностики ПМ позволило наиболее полно выявить больных этой формой ПИ и впервые рассчитать показатели заболеваемости ПМ у детей в Санкт-Петербурге в I985-I99I гг.
Выявлены доминирующие серовары пневмококка, вызвавшие менингиты у детей в Санкт-Петербурге в 80-е годы: I, 2, б, 15, 19. Определены наиболее вирулентные для детей серовара,пневмококка -I, 2 я 19, что необходимо для разработки диагностических и профилактических препаратов.
Стандартизированы и усовершенствованы методы определения у пневмококка ТА и пневмолизина, которые можно использовать в условиях практики.
На основании полученных результатов составлены и утверждены МЗ КМСР методические рекомендации "Метод непрямой иммуно-флюоресценции в ранней диагностике пневмококковой инфекции у детей" (Л., 1989) (совместно с А.С.Кветной, А.П.Батуро, В.В.Ивановой и др.).
Утверждена заявка на изобретение "Способ моделирования пневмококковой инфекции" JS 4808948, положительное решение от П.II.91 (совместно с Л.В.Говоровой, А.С.Кветяой, Р.А.Яаснровнм).
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Гиалуронидаза пневмококка является фактором, способству
ющим инвазии и преодолению микроорганизмами ГЭБ.
2, Пневмолизин (fi-гемолизин), как один яз токсячесгах Док
торов пневмококка, имеет значение в развитии менингита.
3. Предложена формула расчета комплексного показателя для оценки степени патогенности пневмококкового штамма, характеризующего потенциальную способность вызывать менингит при заражении этим штаммом.
Апробация работы. Основные результаты работы доложены на: Всесоюзных конференциях "Менингококковая инфекция и гнойные менингиты" (Архангельск, 1986; Новосибирск, 1990); II и 15 итоговых научно-практических конференциях НИИ детских инфекций (Санкт-Петербург, 1989, 1993); научной конференции в лаборатории эпидемиологии острых менингитов НШЭм им.Н.Ф.Гамалеи, РАМН (Москва, 1991); 12 Lancefield интернациональном симпозиуме по стрептококкам и стрептококковым заболеваниям (Санкт-Петербург, 1993).
По теме диссертации опубликовано II работ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 170 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований (4 главы) , обсуждения результатов и заключения, выводов, списка литературы, включающего 90 отечественных и 127 зарубежных источников. Текст иллюстрирован 29 таблицами и 4 рисунками.