Введение к работе
Актуальность темы. В последние десятилетия особое внимание органов здравоохранения привлечено к проблеме внутри-больничных инфекций, заболеваний, связанных с оказанием медицинской помощи. Эти инфекционные заболевания резко снижают эффективность лечебных мероприятий, увеличивают сроки пребывания больных в стационарах, повышают легальность (Kramer и соавт.,1984; В.В.Влодавец,1989; Н.А.Семина и соавт.,1989;. Р.Х.Яфаев и Л.П.Зуева,1989; В.П.Венцел,1990). Большую часть внутрибольничных инфекций вызывают условно-патогенные микроорганизмы, в том числе и представители многих родов семейства Enterobacteriaceae: Escherichia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Yersinia и др. Если в недавнем прошлом внимание микробиологов, главным образом, привлекали эшерихии, сальмонеллы, шигеллы, то в последнее время обращается внимание на все большее число родов и видов этого семейства.
Род Serratia является типичным примером этого процесса. За последние десятилетия при различных заболеваниях, наряду с S.marcescens, высевались представители других видов этих бактерий, отмечается увеличение удельного веса их при внутрибольничных инфекциях (Pecarrere и соавт.,1979; Pitt и соавт.,1980; Harden и соавт., 1980; Serruses-Schontens и соавт.,1984; Horwitz и соавт.,1987; Zbidenn Blass,1988).
Серрации обнаруживаются повсеместно - в воде, почве, пищевых продуктах, в различном клиническом материале (моча, кровь, фекалии, слизь из носоглотки, мокрота, гной из абсцессов и др.). Наряду с этим, эти бактерии используются в биотехнологии при получения продигиозина, из которого впоследствии готовится лекарственный препарат продигиозан, у некоторых представителей серрации обнаружена азотфиксирующая активность и способность к деградации лигнина.
Род Serratia является одним из сравнительно слабоизученных среди энтеробактерий, но возрастающая частота выделения серрации и их этиологическая значимость при внутрибольничных инфекциях объясняют интерес к поискам надежных эпидемиологических маркеров, которые дали бы возможность сравнительно быстро и точно разграничивать серрации от представителей других родов, а также внутри рода и внутри видов.
Методы эпидемиологического маркирования бактерий достаточно разнообразны и разграничиваются на классические и моле-
кулярные. К первым относятся биотипирование, серотипирование, фаготипирование, бактериоцинотипирование, резистенстипирование; ко вторым - плазмидный анализ, рестрикционный анализ, полиме-разная цепная реакция, иммуноолотинг и др. (Darini, 1994). Среди этих методов особое место принадлежит методу фаготипирования, который оправдал себя при изучении многих бактерий (Callow, 1959; Blair и Williams,1961).
Данные о типировании ссрраций ограничиваются отдельными сообщениями о попытках серотипирования (Auchen и Pitt,1995), биотипирования (Traub,1991), бактериоцинотипирования (Anderhub и соавт., 1977) и фаготипирования (Pitt и соавт.,1980; Р.Х.Гайрабеков и И.М.Габрилович,1993).
Целью работы было совершенствование методов эпидемиологического маркирования серрации различного происхождения, в частности с использованием метода фаготипирования.
Для достижения этой цели следовало решить следующие задачи:
-
Изучить различные эпидемиологические маркеры серрации.
-
Исследовать биологические свойства фагов серрации, представляющих две коллекции - Нальчикскую и Английскую.
-
На основе результатов исследования фагов серрации разработать рациональную схему фаготипирования этих бактерий.
Работа выполнена в соответствии с основными направлениями научных исследований Кабардино-Балкарского государственного университета в рамках темы : "Разработка способов выявления и эпидемиологического маркирования условно-патогенных представителей энтеробактерий", зарегистрированной во ВНТИЦентре, N гос.регистрации 01.91.0044705.
Научная новизна. Проведен анализ распространения среди серрации, выделенных из патологического материала и из внешней среды, факторов вирулентности различной природы, полирезистентности, плазмидного профиля- ДНК. Сравнительное изучение свойств фагов серрации из 2 коллекций - Нальчикской и Английской - позволило отобрать типовые фаги, использованные для разработки схемы фаготипирования этих бактерий.
Практическая значимость. Разработана рациональная схема фаготипирования S.marcescens, включающая 4 типовых фага из разных коллекций и позволившая выделить 14 фаготипов этих бактерий. С помощью предложенной схемы типированы 84,3% исследованных штаммов S.marcescens. Показана возможность патотипи-
рования серраций. Полученные результаты использованы в практической работе учреждений системы санэпиднадзора Кабардино-Балкарской Республики. Материалы диссертации внедрены в учебный процесс в Кабардино-Балкарском государственном университете и в Кабардино-Балкарской государственной сельскохозяйственной академии.
Апробация работы. Результаты работы обсуждались на:
-
выездной сессии Президиума Академии естественных наук (Махачкала, 1993);
-
научной конференции, посвященной 25-летию ветеринарного факультета КБАМИ (Нальчик, 1994);
-
научной конференции молодых ученых "Достижения медицинской науки - практическому здравоохранению" (Нальчик, 1995);
4) юбилейной конференции, посвященной 30-летию меди
цинского факультета (Нальчик, 1996).
По материалам диссертации опубликовано 9 работ.
Положения, выносимые на защиту
-
У серраций достаточно часто обнаруживаются факторы вирулентности, которые являются эпидемиологическими маркерами этих бактерий. В качестве таких маркеров может быть использована также полирезистентность бактерий и наличие у них плазмид.
-
Фаги S.marcescens из двух коллекций близки между собой по морфологии негативных колоний, антигенным свойствам, чувствительности к действию внешних агентов, параметрам взаимодействия с чувствительными клетками, но различаются по спектру действия.
-
Для целей фаготипирования целесообразно использовать фаги, представляющие разные коллекции, что дает больший процент типируемых штаммов.
Структура н объем диссератцин. Диссертация изложена на 130 страницах машинописи, иллюстрирована 33 таблицами и 1 рисунком, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 3 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, указателя литературы, включающего 169 источников, из которых 36 отечественных и 133 зарубежных, и приложения.