Введение к работе
Актуальность проблемы. Известна важная роль нормальной микрофлоры репродуктивной системы в создании устойчивости к колонизации экониши патогенными и условно-патогенными микроорганизмами, формировании иммунного гомеостаза и др. В последние годы у 30-40% мужчин наблюдаются хронические неспецифические воспалительные заболевания гениталий (Тиктинский О.Л. и др., 1985; Юнда И.Ф., 1990; и др.); в 30-50% случаев причиной бесплодных браков является мужское бесплодие, развивающееся вследствие воздействия на мужские гениталии различных факторов (Исраилов СР., 1982; Пшеничникова Т.Я., 1990; и др.).
В отечественной и зарубежной литературе нет твердых взглядов на причины и патогенез мужского бесплодия (Пепперелла Р.Дж., 1983; Пшеничникова Т.Я., 1990 и др.). Мнения исследователей по этому поводу отличаются большим разнообразием. Одним из факторов нарушения фер-тильности и развития патоспермии является инфицирование внутренних гениталий различными микроорганизмами (Исраилов СР., 1982; Кейт Л.Г. и др., 1988; и др.). Показано снижение оплодотворяющей способности сперматозоидов под действием внутриклеточно паразитирующих возбудителей - хламидий, уреаплазм - и их метаболитов (Кейт Л.Г. и др., 1988; Wolff Н. et al., 1991; и др.). В то же время вопрос о роли условно-патогенных бактерий в патофизиологических механизмах развития бесплодия остается открытым. С одной стороны, данные микроорганизмы являются представителями нормальной микрофлоры репродуктивной системы (Magnanelli S. et al., 1990), и, препятствуя заселению патогенов, обеспечивают колонизационную резистентность экониши (Ильин И.И., 1983). С другой стороны, приобретая агрессивные потенции, они могут явиться этиологическим фактором воспалительного процесса в гениталиях (Corradi G. et al, 1992).
В такой ситуации дифференцировка этиологически значимых микроорганизмов от представителей нормофлоры или контаминантов, очевидно, должна основываться на выявлении у бактериальных культур определенных качественных характеристик, ассоциирующих их с патогенными штаммами микроорганизмов. Ранее была показана связь между уровнем лизоцима эякулята, способностью бактерий к его инактивации и развитием патоспермии (Кузьмин М.Д., 1993). Однако открытым остается вопрос о роли факторов персистенции микроорганизмов в формировании дисбиотических состояний урогеннтального тракта мужчин, развитіпі и хронизащш воспалительных заболеваний гениталий.
Элиминация возбудителей воспалительных процессов в гениталиях и восстановление нормальной микрофлоры репродуктивной системы сопровождается восстановлением репродуктивной функции (Кейт Л.Г. и др., 1988).
В этой связи представляется актуальным изучение видового состава и биологических свойств микрофлоры репродуктивного тракта мужчин в норме и в условиях сниженной колонизационной резистентности. Кроме того, определенный интерес представляют вопросы регуляции микробного биоценоза репродуктивной системы, что позволит повысить эффективность коррекции дисбиотических состояний урогенитального тракта мужчин.
Цель работы: Определение видового состава и биологической роли факторов персистенции микрофлоры репродуктивной системы мужчин в норме и при различных дисбиотических состояниях, а также регулирующего влияния различных факторов на персистентные характеристики бактерий in vitro.
Для достижения данной цели были поставлены и решены следующие задачи:
-
Определить видовой состав микрофлоры уретры и эякулята здоровых мужчин, больных хроническим негонококковым уретритом и хроническим простатитом, осложненным бесплодием.
-
Изучить частоту встречаемости и степень выраженности адгезивной способности, антилизоцимной (АЛА) и антикомплементарной (АКА) активности микроорганизмов, выделенных у мужчин обследуемых групп.
-
Оценить влияние физических (радиоволновая гипертермия) и химических (гормоны) факторов на биологические свойства микроорганизмов.
Научная новизна Впервые изучен комплекс биологических характеристик (адгезивная способность, АЛА, АКА) как группы патогенетически значимых свойств микроорганизмов, обеспечивающих фенотипиче-скую адекватность определенных видов и штаммов бактерий специфическим условиям урогенитального тракта. Выявлены различия в видовой структуре микроорганизмов, изолированных от здоровых мужчин и больных воспалительными заболеваниями урогенитальной системы: у больных хроническим негонококковым уретритом и хроническим простатитом, осложненным бесплодием, наблюдалось уменьшение содержания в микробиоценозе лактобактерий и коринебактерий и появление в спектре изолированной микрофлоры энтерококков и энтеробактерий. Установлена роль отдельных качественных характеристик бактерий в развитии дисбиотических состояний мужской репродуктивной системы: увеличение в биотопах репродуктивной системы доли штаммов бактерий с набором персистент-ных характеристик и обнаруженные высокие (по сравнению со штаммами микроорганизмов, выделенными о здоровых мужчин) значения АЛА и АКА у условно-патогенных микроорганизмов, выделенных при воспали-
тельных заболеваниях гениталий, подтверждают их этнологическую роль в развитии урогенитального дисбиоза и мужского бесплодия.
Выявлено снижение персистентных свойств стафилококков и энте-робактерий под влиянием радиоволновой гипертермии, что послужило теоретической предпосылкой для разработки «Способа лечения мужского бесгаюдия» путем воздействия на персистентные характеристики микрофлоры эякулята физическими факторами - радиоволновой гипертермией (положительное решение ВНИИГПЭ о выдаче патента РФ по заявке на изобретение №96101283/14(001504) от 15.09.97).
Установлено ингибирующее влияние препаратов тестостерона на АКА и АЛА условно-патогенных микроорганизмов. Выявлены различия в изменении ростовых характеристик бактериальной популяции при культивировании с метилтестостероном: гормон оказывал биостимулирующий эффект на развитие популяции стафилококков и стабилизирующий - на популяцию эшерихий.
Практическая ценность. Полученные в работе данные расширяют теоретические представления о роли отдельных биологических свойств бактерий в формировании микробных биоценозов репродуктивной системы человека и развитии дисбиотических состояний биотопов репродуктивного тракта мужчин.
Практическое значение исследования заключается в возможности использования факторов персистенции микрофлоры в качестве маркеров дисбиотического процесса, в частности при проведении скрининговых исследований для выявления лиц группы риска.
Разработанный способ лечения мужского бесплодия апробирован и внедрен в работу Оренбургского Центра планирования семьи и репродукции и урологического отделения Оренбургской областной клинической больницы.
Предложенные приемы могут быть использованы в работах микроэкологического профиля и при решении медицинских задач.
Положения, выносимые на защиту:
-
Изменение персистентного потенциала микрофлоры репродуктивной системы мужчин отражает микроэкологические нарушения в биотопах репродуктивного тракта.
-
Модификация биологических свойств условно-патогенных микроорганизмов под влиянием физических (радиоволновая гипертермия) и химических (гормоны) факторов определяет возможность регуляторного воздействия в системе «паразит-хозяин».
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на I Международном научном конгрессе студентов, аспирантов и моло-
дых ученых «Молодежь и наука: третье тысячелетие» ("YSTM'96"), Москва, 1996; Российской научной конференции «Персистенция микроорганизмов», Оренбург, 1997; юбилейной научно-практической конференции Оренбургской областной клинической больницы (к 125-летию больницы), Оренбург, 1997.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, получено положительное решение ВНИИГПЭ по заявке на изобретение № 96101283/14(001504).
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста и содержит введение, обзор литературы, 3 главы собственных исследований, заключение, выводы и указатель литературы, включающий 91 отечественный и 75 зарубежных источников. Иллюстрации представлены 6 таблицами и 29 рисунками.