Введение к работе
Актуальность проблемы. Киллерный Феномеп был впервые обнаружен у дрожжей Saccharoniyces cerevisiae в 1963 году Makover и Ве-van. Довольно скоро выяснилось, что киллерные клетки секретируют белковые вещества, которые убивают чувствительные дрожжи. Чаще всего для обозначения этих веществ используют термин "киллерные токсины", однако некоторые исследователи предпочитают называть их по-другому: антибиотиками, микоцинами, зимоцинами или зимоиидами. В этой работе используется наиболее распространенный термин "киллерные токсины". В настояшее время во многих лабораториях мира ведутся интенсивные поиски киллерных штаммов среди представителей разных таксономических групп дрожжей. Сейчас известен достаточно широкий круг таких дрожжей и их список постоянно пополняется. Киллерные токсины, продуцируемые различными дрожжами, отличаются по спектрам действия и Физико-химическим свойствам. Генетическая детерминация киллерных токсинов также различна у разных видов. Киллерный" Феномен интересен и* с точки зрения механизма действия' токсина на клетки чувствительных дрожжей. И, наконец, тот Факт, что некоторые киллерные токсины способны воздействовать на патогенные дрожжи, открывает возможность эффективного лечения опасных микозных заболеваний человека и животных.
3 работах ряда авторов описаны киллерные свойства некоторых дрожжевых штаммов - представителей рода Williopsis и вида Hansenula anoraala. Род Williopsis лишь сравнительно недавно выделен как самостоятельная таксономическая единица. Ранее он относился к роду Hansenula. Поэтому представляется целесообразный параллельное изучение киллерных токсинов этих близкородственных таксонов.
цель работы. Выделение и характеристика киллерных токсинов, секретируемьк дрожжами рода Williopsis и Hansenula anomala, а также разработка подходов к созданию лекарственного препарата на основе киялерного токсина Н.апошаїа для лечения кандидоникозов человека и животных.
Научная новизна и практическая ценность работы. Изучены свойства ранее не исследовавшихся штаммов киллерных дрожжей W.pratensis, W.subsufficiens, K.beijerinckli и H.anoaala и продуцируемых ими токсинов. Показано, что данные дрожжи секретируют
ккллерные токсины с уникальными, отличными от других дрожжей, свойствами. Эти токсины отличаются по спектрам действия, физи-ко-химичесюш свойствам, характеру воздействия на чувствительные дрожжи. Вместе с тем они обладают рядом общих черт: все они являются белкаин, в той или иной степени термостабильными; обладают широкими спектрами действия; активность их проявляется в широком диапазоне рН.
Разработаны подходы к созданию лекарственного препарата на основе кюиерного токсина Н.апоиаіа для лечения кандидомикозов человека я животных. Препарат прошел успешные предварительные доклинические испытания на лабораторных животных и пациентах-добровольцах и перспективен для применения в медицине и ветеринарии.
Апробация работы и публикации. По теме диссертации опубликовано 7 статей и одна статья готовится к печати. Материалы диссертации докладывались на Международном специализированном симпозиуме по дроаиан (Рига, 1991 г.).
Структура и объем работы.. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания использованных объектов и методов, изложения полученных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка цитируемой литературы; изложена на 106 страницах, содержит 17 рисунков и 17 таблиц, список литературы содержит 147 названий.